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DOI: 10.3791/55403-v
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Die ungleichmäßige Verlust von Medium aus Mikrotiterplatten wirkt sich auf die Reproduzierbarkeit einheitlicher vielzelligen Tumor Sphäroidformation. Kulturbedingungen zu verbessern signifikant Medium Verlust zu reduzieren wird die Reproduzierbarkeit der Sphäroidbildung und die Ergebnisse der Sphäroid basierenden Assays unter Verwendung der flüssig overlay-Technik verbessern.
Das übergeordnete Ziel dieses Verfahrens ist es, die Skalierbarkeit und Reproduzierbarkeit der gleichmäßigen Sphäroidbildung unter Verwendung einer Liquid-Overlay-Technik in 384-Well-Platten zu verbessern. Der Hauptvorteil dieser Technik besteht darin, dass sie die übermäßige Wiederverwendung von Medien von mehreren Platten reduziert und dadurch die Reproduzierbarkeit der Sphäroidbildung verbessert. Wir haben die Methode zur Kultivierung von 3D-Sphäroiden für Arthropoden-Screening-Tests in unserem Labor entwickelt und validiert, und unsere Studie bestand darin, den Kanteneffekt in den Platten der mehrzelligen Kulturen zu bewerten.
Heute werde ich das Verfahren zusammen mit Sona, einem Poster aus dem Labor, demonstrieren. Beginnen Sie dieses Verfahren, indem Sie null Komma sieben, fünf Gramm Agarose mit niedrigem Schmelzpunkt abwiegen und zu 100 Millilitern McCoy's 5A-Medium mit oder ohne Phenolrot und ohne Serum hinzufügen. Erhitzen Sie die Lösung in der Mikrowelle und schwenken Sie sie alle ein bis zwei Minuten, um die Agarose vollständig aufzulösen.
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