Anwendung und Methodik der zerstörungsfreien ¹⁹F Zeitbereich NMR-Technik den Inhalt in Fluor-haltige Arzneimittel zu messen

Das übergeordnete Ziel dieser Niederfeld-Fluor-19-Zeitbereichs-Kernspinresonanz-Methode besteht darin, den durchschnittlichen Gehalt an florinierten Arzneimitteln in formulierten Arzneimitteln zu bestimmen. Dabei handelt es sich um eine zerstörungsfreie Technik für die Entwicklung und Herstellung von Arzneimitteln in der pharmazeutischen Industrie. Diese Methode kann helfen, zentrale Fragen im Bereich der Pharmazie bei der Formulierung von Arzneimitteln und Arzneimitteln zu beantworten.

Schlagen Sie den durchschnittlichen Gehalt an Arzneimitteln in Tabletten und Kapseln vor. Der Hauptvorteil dieser Technik besteht darin, dass sie zerstörungsfrei und schneller ist als herkömmliche Methoden wie die Hochleistungsflüssigkeitschromatographie bei der Messung des durchschnittlichen Gehalts von Arzneimitteln in Arzneimitteln. Wiegen Sie die Proben für die Kalibrierung in den entsprechenden NMR-Röhrchen bis zur Markierungslinie oder einer Höhe von etwa 30 Millimetern.

Wiegen Sie die formulierten Arzneimittelproben auch in den entsprechenden NMR-Röhrchen bis zur Markierungslinie oder einer Höhe von etwa 30 Millimetern. Legen Sie anschließend die Teflon-Standardprobe in ein 25- oder 26-Millimeter-NMR-Röhrchen. Setzen Sie den NMR-Schlauch in die Sonde im Magneten ein.

Lassen Sie das Rohr fünf bis 10 Minuten lang äquilibrieren, bevor Sie das Instrument auf f 19 stimmen. Wählen Sie auto o one im Befehlsmenü in der RINMR-Software. Wiederholen Sie die Messung mindestens dreimal.

Und nehmen Sie den letzten Wert des Parameters o one. Navigieren Sie zum Befehlsmenü in der RINMR-Software und wählen Sie auto p 90, um den 90-Grad-Impuls für f 19 mit der Standard-Teflonprobe unter Verwendung der im Gerät verfügbaren automatischen Standardkalibrierungssequenz zu kalibrieren. Für ein besseres Signal-Rausch-Verhältnis legen Sie die im 25-Millimeter-NMR-Röhrchen vorbereitete API-Probe in die im Magneten installierte f 19-Sonde und lassen Sie sie mindestens 10 Minuten lang äquilibrieren.

Messen Sie die Relaxationszeit t one gemäß den Anweisungen im Gerätehandbuch für jede API-Probe unter Verwendung des Standardexperiments für die Inversionswiederherstellung aus der RINMR-Software. Um die Relaxationszeit zu messen, navigieren Sie zur Sequenz und wählen Sie Last in der RINMR-Software. Wählen Sie dann die inverse Wiederherstellungsimpulssequenz aus und klicken Sie auf Öffnen.

Überprüfen Sie, ob die Basisparameter die richtigen Werte haben, indem Sie auf die Registerkarte a klicken. Wählen Sie im Menü "Extras" die Option "Skripte" aus und es öffnet sich ein Fenster. Wählen Sie dann den Tab für t one aus und klicken Sie auf den grünen Pfeil.

Es öffnet sich ein weiteres Fenster. Wählen Sie die Verzögerungslistendatei mit den entsprechenden Verzögerungen aus. Oder erstellen Sie die Liste, nachdem Sie auf Öffnen geklickt haben.

Sobald die Verzögerungsliste zufriedenstellend ist, klicken Sie auf OK. In einem Fenster wird eine Aufforderung zur Erstellung einer Datei für alle zu sammelnden Spektren angezeigt, um den Wert t one zu berechnen. Klicken Sie für das Gerät auf Speichern, um mit der Datenerfassung zu beginnen.

Speichern Sie die Dateien automatisch im ausgewählten Ordner. Es öffnet sich ein Fenster mit der Relaxationskurve t eins und der Zeitkonstante oder t eins Wert. Um die Kalibrierkurve zu erstellen, legen Sie zunächst eine Kalibrierprobe für einen bestimmten Wirkstoff in den Magneten.

Die Proben werden für mindestens fünf Minuten für die kleineren Röhrchen und 10 Minuten für die größeren Röhrchen äquilibriert. Erwerben Sie ein freies Induktionszerfalls- oder Festkörperexperiment mit den entsprechenden Parametern, indem Sie den Anweisungen im Gerätehandbuch folgen. Laden Sie auf der Registerkarte "Sequenz" der RINMR-Software die Impulssequenz, indem Sie die Sequenz auswählen und auf "Öffnen" klicken.

Überprüfen Sie, ob die Basisparameter die richtigen Werte aufweisen. Messen Sie alle Proben, die für jeden Wirkstoff vorbereitet wurden, nachdem sie fünf bis 10 Minuten lang auf die Temperatur des Magneten abgestimmt wurden, um die Kalibrierkurven für jede API-Probe zu erstellen. Speichern Sie die Daten in einem Ordner, und geben Sie jedem experimentellen Lauf einen eindeutigen Namen.

Berechnen Sie den Gewichtsprozentsatz der Proben, basierend auf der Menge in jedem Röhrchen. Unter Berücksichtigung der Reinheit der API-Probe im größten Röhrchen. Legen Sie die bereits vorbereiteten formulierten Arzneimittelproben in den Magneten, um sie nacheinander zu messen.

Äquilibrieren Sie die Proben fünf Minuten für kleine NMR-Röhrchen oder 10 Minuten für die Proben in den größeren NMR-Röhrchen. Erfassen Sie das gleiche NMR-Experiment unter den gleichen Bedingungen wie für die kalibrierten Proben für jeden Wirkstoff. Öffnen Sie die RI-Kalibrierungssoftware.

Rufen Sie alle soliden Daten auf, indem Sie auf das Clip-Symbol klicken, um die FID- oder Solid-Dateien von einem bestimmten API und dessen Arzneimittelproben als Tabletten zu öffnen. Geben Sie für alle gemessenen Proben die Gewichtsprozentsätze in der Spalte Konzentration und die Gewichte in der Spalte Masse ein. Wählen Sie den entsprechenden Bereich aus, indem Sie die Durchschnittsmethode verwenden, um die Kalibrierungskurve zu erstellen.

Speichern Sie die Kalibrierkurve. Wählen Sie als Nächstes den Bereich des Volumenkörperexperiments mit fünf bis 300 Punkten aus, um die Kalibrierungskurven zu erstellen. Die Ergebnisse der Kalibrierung mit der Methode "Durchschnitt" werden in Tabellenform angezeigt.

Als zweite Kalibrierungsmethode verwenden Sie die Fit-Methode in der RI-Kalibrierungssoftware, um die Kalibrierkurve mit demselben ausgewählten Bereich zu erstellen. Speichern Sie die Kalibrierkurve. Die Ergebnisse der Kalibrierung mit der Fit-Methode werden in Tabellenform angezeigt.

Als dritte Methode der Kalibrierung öffnen Sie die Mnova-Software. Ziehen Sie alle Volumendaten aus einer bestimmten API. Geben Sie die Gewichtungsprozentsätze der Stichproben ein.

Wählen Sie im erweiterten Menü Zeitbereich und dann Quantifizierung aus. Es öffnet sich ein Fenster. Klicken Sie auf das blaue Pluszeichen, um den Integrationsbereich auszuwählen.

Integrieren Sie dann den entsprechenden Bereich mit dem Magnitudenmodus, um die Kalibrierungskurve zu erstellen. Speichern Sie die Kalibrierkurve. Geben Sie in der Tabelle die prozentualen Anteile der Arzneimittel pro Probe in der Spalte Konzentration nur für die Standards ein.

Und die Gewichte für alle Proben unter der Massenspalte. Die Kalibrierproben sollten rot sein. Stellen Sie sicher, dass die Signalfunktion y gleich s über m ist, um das Signal auf Masse zu normalisieren.

Um Reproduzierbarkeit und Wiederholbarkeit zu gewährleisten, messen Sie jede Probe dreimal an verschiedenen Tagen und erstellen Sie in beiden Softwarepaketen eine Kalibrierkurve. Stellen Sie sicher, dass Sie die Dateien mit der Kalibrierungskurve speichern. Lesen Sie die NMR-Daten der gemessenen Proben ab und geben Sie deren Gewichte ein, um den Gewichtsprozentsatz von fluoriertem API in den formulierten Tabletten oder Kapseln zu bestimmen.

Verwenden Sie die Kalibrierkurven, die Sie aus jeder der drei verschiedenen Kalibriermethoden erhalten haben. Berechnen Sie schließlich die Menge an fluoriertem Arzneimittel pro Tablette oder Kapsel als Durchschnittswert, indem Sie die Gleichung im Textprotokoll verwenden. Und vergleichen Sie sie mit den von der Software berechneten Werten auf der Grundlage der Kalibrierkurven.

Hier sind repräsentative Ergebnisse der Kalibrierkurve von Cinacalcet HCL dargestellt, berechnet als freie Base und dreifache Messungen. Verwendung der RI-Kalibrierungssoftware im Durchschnittsmodus. Die Verwendung der RI-Kalibriersoftware im Fit-Modus führt zu einer ähnlichen Kalibrierkurve von Cinacalcet HCL in dreifacher Ausfertigung.

Die Kalibrierkurve von Cinacalcet HCL in dreifacher Ausfertigung unter Verwendung der Mnova-Software-Flächenmethode im Magnitudenmodus liefert vergleichbare Ergebnisse. Hier sehen Sie eine Tabelle mit den Ergebnissen für die berechneten Dosen von Cinacalcet free base in kommerziellen Tabletten. Mit ihren Statistiken durch RI-Kalibrierungssoftware unter Verwendung der Durchschnitts- und Anpassungsmethode sowie der Mnova-Software.

Einmal gemeistert, kann diese Technik in 15 bis 20 Minuten durchgeführt werden. So können die Kalibrierproben beispielsweise eine Stunde dauern. Und sie müssen nur einmal durchgeführt werden, wenn sie ordnungsgemäß durchgeführt werden.

Nachdem Sie sich dieses Video angesehen haben, sollten Sie ein gutes Verständnis dafür haben, wie Sie den durchschnittlichen Gehalt an fluorierten Arzneimitteln in formulierten Arzneimitteln durch die zerstörungsfreie Technik der Niederfeld-Fluor-19-TD-NMR quantifizieren können. Vergessen Sie nicht, dass die Arbeit mit Medikamenten und NMR-Instrumenten extrem gefährlich sein kann und dass bei der Durchführung dieses Verfahrens immer Vorsichtsmaßnahmen wie persönliche Schutzausrüstung und keine Metallgegenstände in der Nähe des Magneten getroffen werden sollten.