Name: Ein Wiederherstellungsmodell kardiopulmonalen Bypass ohne Transfusion oder inotrope Substanzen bei Ratten (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-03-23T13:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 54 s
Description: Erfahren Sie ein kardiopulmonales Bypass-Wiederherstellungsmodell bei Ratten ohne Transfusion oder inotrope Substanzen. Diese Methode ermöglicht die Untersuchung langfristiger Organkomplikationen.

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Anerkennung erstreckt sich auf Dr. T. Taki und Dr. M. Funamoto für ihre technische Unterstützung.

Vor dem Experiment sollten alle Ratten eine Woche gegeben werden zu akklimatisieren. Alle chirurgischen Eingriffe an Tieren sollte gemäß dem Leitfaden für die Pflege und Verwendung von Labortieren (www.nap.edu/catalog/5140.html) oder anderen entsprechenden ethischen Richtlinien erfolgen. Protokolle zu genehmigen des Tierschutz-Ausschusses bei der entsprechenden Institution, bevor Sie fortfahren. Alle nachfolgenden Verfahren müssen unter aseptischen Bedingungen durchgeführt werden.
1. Vorbereitung CPB-Schaltung
Hinweis: Tragen Sie persönliche Schutzausrüstung einschließlich Handschuhe, Brillen, und einen sauberen Mantel oder Einweg-Kleid.
<ol><li>Aufbau des CPB-Schaltung<ol>
<li>Verbinden Sie Polyvinylchlorid-Röhren mit einem venösen Reservoir, predesigned für CPB-Schaltung und eine modifizierte neonatale Membran Oxygenator wie in Abbildung 1dargestellt. Stellen Sie sicher, alle Anschlüsse dicht sind und Wasser nicht undicht werden.</li>
		<li>Legen Sie eine CPB-Schaltung auf der Walze Pumpvorrichtung laut des Herstellers Protokolle.</li>
		<li>Halten Sie die Walze Pumpe auf einem höhenverstellbaren Tisch und stellen Sie die Tischhöhe bis 10 cm unter der experimentellen Schreibtisch.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Grundierung der CPB Schaltung<ol>
<li>Mix 12 mL Stärkelösung Hydroxyethyl mit 0,1 mL Heparin und 0,5 mL 7 % Natriumbicarbonat Lösung für Grundierung CPB-Schaltung.</li>
		<li>Erstklassige Schaltung mit 11 mL der Priming-Lösung, mit der Pumpe Walze leichtes drehen. Legen Sie eine Entlüftung 18-Gauge-Nadel in das Reservoir für Luft.</li>
		<li>Schlug die Membrane Oxygenator mehrmals um zu deair mit dem Oxygenator kippen. Luft muss vollständig verdeckt werden, zur Vermeidung von Luftembolien und unzureichende Sauerstoffversorgung. Während der Schaltung Grundierung, erhitzen Sie die Schaltung durch eine elektrische Wärmelampe am Stausee.</li>
	</ol>
</li>
</ol>2. Verfahren vor CPB
Hinweis: Das OP-Feld und die Geräte sollten durch 70 % Alkohol oder eine quartäre Ammonium-Verbindung vor dem Gebrauch desinfiziert werden.
<ol><li>Anästhesie und tierische Einstellung<ol>
<li>Eine Ratte mit 3,0 % Isofluran gemischt Luft einatmen in einem Verdampfer zu betäuben. Die Ratte auf eine Arbeitsständer und Intubation eine 16-Gauge-Kanüle in der Luftröhre. Folgen Sie Ihren lokalen Tierpflege Leitlinien Analgesie Dosierung und Häufigkeit (z.B. Buprenorphin 0,005 mg/kg s.c.) Hinweis: Ratten müssen auf Tiefe Anästhesie und Reflexe zu verlieren. Die Atmung sollte rhythmisch aber nicht verhaftet werden.</li>
		<li>Übertragen Sie die Ratte auf ein OP-Tisch ausgestattet mit ein elektrisches Heizkissen. Starten Sie die Beatmung mit 8 mL/kg des Tidalvolumen, Atemfrequenz von 70 Takte/min. und 30 % der inspiriert Sauerstoff-Fraktion von der Sauerstoff-Sensor überwacht.</li>
		<li>Die Narkose mit 1,5-2,0 % Isofluran und eine zusätzliche Gabe von Ketamin/Xylazin bei CPB Initiation zu erhalten.</li>
		<li>Überwachen Sie die rektale Temperatur mithilfe der rektale Sonde. Aufrechterhalten Sie durch Einstellung der Temperatur das Wärmekissen und platzieren die Schaltung über die Wärmelampe normothermic Körpertemperatur von 37 ° C.</li>
		<li>Die Ratte in Rückenlage und dehnen Sie die vier Gliedmaßen durch Befestigung mit Nadeln. Überwachen Sie die Herzfrequenz indem die ECG Elektrode Nadel auf der bilateralen Schulter und dem linken Bauch. Legen Sie eine feuchte Gaze oder gelten Sie ophthalmologischen Salbe für die Augen, um Trockenheit zu verhindern.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Kanülierung<ol>
<li>Rasieren Sie nach der Desinfektion der Oberfläche des ganzen Körpers durch Sprayingby Spritzen, 70 % Ethanol oder einem anderen antiseptischen Lösung das Haar mit einem Rasiermesser auf der bilateralen inguinalen Region und rechts zervikalen Region. Lokalanästhetika (z. B. Lidocain) sollte vor der Hautinzision verwendet werden. Hinweis: als eine Alternative, eine chirurgische Gestrüpp des Standortes Schnitt werden, anstatt den ganzen Körper verwendet kann sprühen von 70 % Ethanol zu einen Rückgang der Temperatur des Körpers zu vermeiden.</li>
		<li>Einschneiden der Haut (ca. 5 mm) an der bilateralen inguinalen Regionen und rechts zervikalen Region von Schere und unverblümt sezieren das Gewebe um die rechten main Femoral Arterie freizulegen. Trennen Sie sorgfältig die Arterie aus der Vene und Nerven in der Nähe. Am Ende des gemeinsamen Femoral Arterie mit 4-0 Seide und Exposition durch Spannung verbinden.</li>
		<li>Die Arterienwand (ca. 1 mm) direkt gemeinsamen Femoral Arterie um Mikro Schere senkrecht auf die Arterie und die sorgfältig cannulate einen 24-Spur intravenöse Katheter aus der Schnitt bis zu einer Tiefe von 1 cm für die Überwachung der systemischen arteriellen Druck und Analyse von Gas-Partialdruck im arteriellen Blut.</li>
		<li>Heparin Natrium (500 I.E./kg) aus dem Katheter zu verwalten.</li>
		<li>2.2.2 und 2.2.3, einen 24-Spur intravenöse Katheter in die linke gemeinsame Femoral Arterie als eine arterielle Infusion-Linie für die CPB-Schaltung cannulate Schritte.</li>
		<li>Legen Sie eine 17-Gauge-Multi-Öffnung-Angiocatheter in den richtigen internen Halsschlagader und in den rechten Vorhof und unteren Hohlvene (IVC) vorantreiben. Drücken Sie den Katheter nicht etwa, wie das Schiff leicht brechen kann. Schließen Sie den Katheter an die CPB-Schaltung zur venösen Drainage.</li>
		<li>Decken Sie jeden kanülierte Region mit feuchter Gaze um Verunreinigungen zu vermeiden.</li>
	</ol>
</li>
</ol>3. Verfahren bei CPB
<ol><li>Liefern Sie 100 % Sauerstoffgas an der Oxygenator bei 0,8 L/min bei CPB und verringern Sie der Atemfrequenz bis 30 Takte/min. zu. Der arterielle Sauerstoff-Partialdruck ist von 200 bis 400 MmHg erforderlich.</li>
	<li>Erhöhen Sie zu Jahresbeginn CPB die Temperatureinstellung des das Wärmekissen auf maximal 42 ° C, um den unmittelbaren Tropfen der Körpertemperatur nach CPB Einleitung zu mildern. Einstellen Sie die Temperatur auf 37 ° C, sobald die Körpertemperatur wieder 36 ° C.</li>
	<li>Vorsichtig beginnen Sie die CPB-Fluss und halten Sie ein Auge auf das Volumen des Blutes in das Reservoir. Eine leere Reservoir kann Luftembolien verursachen. Wenn das Volumen des Blutes in das Reservoir abnimmt, senken Sie Förderstrom der Pumpe durch die Tischhöhe einstellen oder Ändern der Position von den Drainagekatheter. Positionieren Sie den venösen Drainagekatheter, der leicht Perforation der rechten Vorhof und/oder Herzrhythmusstörungen verursachen könnten nicht neu.</li>
	<li>Erhöhen und damit die Pumpenleistung bei 100 mL/kg/min, während der mittlere Blutdruck bei 70 MmHg gehalten wird. Wenn die entsprechenden Blutdruck aufrechterhalten wird, geht ein kleines Volumen von mindestens 1 mL in das Reservoir. Ist weniger als 1 mL Blut in das Reservoir, kann es eine Luft-Embolie in den Organen führen.</li>
	<li>Wenn der Blutdruck instabil ist, geben Sie 2-3 mL der Lösung Grundierung die Strecke (es kann nach der CPB Anämie verursachen).</li>
</ol>4. Verfahren nach CPB
<ol><li>Klemmen Sie das venösen Abfluss-Rohr und aus dem Kreislauf zu entfernen. Die Infusion des verbleibenden Blutes im Kreislauf allmählich auf die Arterie, die Blutdruck aufrechtzuerhalten.</li>
	<li>Die Atemfrequenz zu 70 Takte/min. zu erhöhen.</li>
	<li>Der venösen Drainagekatheter und der linken arteriellen Katheter entfernen, dann das Schiff in der proximalen und distalen Website verbinden.</li>
	<li>Entfernen Sie die arterielle Linie von der richtigen Femoral Arterie 60 min nach dem Ende des CPB.</li>
	<li>Reinigen Sie jede Wunde mit Kochsalzlösung und schließen Sie die Wunde mit Nähten.</li>
	<li>Anästhesie und Extubate die intratracheale Röhre nach der Überprüfung die Spontanatmung des Tieres zu beenden.</li>
	<li>Verwalten Sie gewärmte sterile isotone Flüssigkeiten zu und nutzen Sie Wärme Passepartout und elektrische Wärmelampe um die Tiere warm zu halten. Überprüfen Sie die Bedingungen des Tieres häufig bis zur Genesung aus der Narkose. Bereitzustellen Sie Unterstützung der Atmung bei Bedarf. Hinweis: Sobald das Tier zu bewegen beginnt, sollte die Wärmequelle Teil des Käfigs erlauben das Tier wählen Sie warme oder kühle Seite entnommen werden.</li>
	<li>Halten Sie das Tier neben der Gesellschaft anderer Tiere, bis die Atmung vollständig wiedererlangt. Nicht das Tier bis zur endgültigen Genesung an das Unternehmen zurück.</li>
	<li>Überprüfen Sie die Aufnahme von Nahrung und Wasser nach der Wiederherstellung aus der Narkose und unterstützen Sie geeignete Ernährung. Verwalten Sie Analgetika zu und überprüfen Sie auf Anzeichen von Unbehagen oder Schmerzen.</li>
</ol>

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</ol>

Alle Autoren haben nichts bezüglich kommerzieller Support offenzulegen.

In diesem Modell Ratte CPB Serum und Lunge Ausdruck Niveaus von inflammatorischen Zytokinen und HMGB-1, einen wichtigen Transkriptionsfaktor reguliert die Entzündungsreaktionen drastisch erhöht nach CPB. Bisherige klinische Studien zeigten, dass die Serum-Sekretion von HMGB-1-Ebene ist bei Patienten mit kardiovaskulären Chirurgie11erhöht, und der Spitzenpegel Serum HMGB-1 bei CPB mit schwerer systemischer Entzündungsreaktion-Syndrom war und Lunge Sauerstoffversorgung Wertminderung nach CPB<sup cla...

1953 Dr. John H. Gibbon Jr. erfolgreich die erste Herzchirurgie mit CPB1durchgeführt, und es wurde nachträglich eine wesentliche Modalität in der kardiovaskulären Chirurgie. Während die Techniken und Geräte erheblich verfeinert wurden, Multi-Organ Komplikationen im Zusammenhang mit CPB noch beeinträchtigen das Ergebnis des Herz-Kreislauf-Operationen, und postoperative Morbidität und Mortalität2beeinträchtigen. CPB-bezogene Organschäden verursacht durch Aktivierung des Immunsystems und Synthese von proinflammatorischen Zytokinen, Kompliment-Aktivierung und Produktion von Sauerstoff freie Radikale2. Die Pathophysiologie, hat jedoch nicht vollständig aufgeklärt.
Rekapitulation der klinischen Einsatz von CPB Tiermodellen ermöglichen die Klärung der pathophysiologischen Prozesse während und nach der CPB; Dadurch können prä-klinischen Studien bei der Entwicklung von Strategien, um diese Komplikationen zu vermeiden. Seit Popovic Et Al. zunächst berichtete einem Rattenmodell CPB in 19673, Ratte CPB Modelle wurden verfeinert und haben allmählich an die Stelle der großen Tiermodelle durch höhere Wirtschaftlichkeit, komfortable Versuchsabläufe und eine Vielzahl von Testmethoden in genetische und Protein-Ebene. Darüber hinaus können Inzucht Ratten genetisch identische, Verringerung der möglichen biologischen Vorurteile sein.
Fabre Et Al. ein Wiederherstellungsmodell, die der Untersuchung der langfristigen mehrere Orgel Folgeerscheinungen von CPB4 erlaubtgegründet. Die Vorteile dieses einfachen Überleben-Modells sind die Flexibilität (CPB Durchfluss und Dauer), stabile Lebenszustand und Reproduzierbarkeit bei systemischen Entzündungen. Ratte-CPB-Modelle sind entscheidend für die Untersuchung der therapeutischen Strategien, die darauf abzielen, Multi-Organ Verletzungen während der CPB5, geworden und verschiedene Modelle zur Simulation der klinischen Situationen während der CPB vor kurzem entwickelt worden. De Lange Et Al. ein Herzstillstand Modell entwickelt, die verwendet werden können, um die enzymatischen, genetischen und histologischen Antworten in Bezug auf Myokard-Schädigung7zu charakterisieren. Peters Et Al. Myokardinfarkt und kontrollierte Reperfusion mit einem miniaturisierten CPB Modell analysieren Herz Dysfunktion durch die fokale Ischämie und Reperfusion Verletzungen8angeordnet. Jungwirth Et Al. gegründet ein tief hypothermen Herz-Kreislauf-Verhaftung (DHCA) Modell, das die globale Ischämie und Reperfusion Verletzungen durch DHCA und unterstützt mögliche neuroprotektive Strategien6erläutern kann. Studien mit DHCA untersuchen den Einfluss von Hypothermie, Reperfusion und/oder Hämolyse ausgelöst Signalisierung Veranstaltungen9. Tiefe Hypothermie kann Einfluss auf die Aktivierung und Inaktivierung verschiedener Enzyme und Wege und Mechanismen bleiben unbekannt10. Auf der anderen Seite Herzstillstand Modelle oder Herzen Ischämie anzuwenden, Ischämie und Reperfusion Herz Verletzungen zu untersuchen. Diese Ratte CPB-Modelle, die sehr menschlichen CPB rekapitulieren können pathologische Prozesse im Zusammenhang mit CPB zu offenbaren und CPB-bedingte Komplikationen verringern.
Dieses Protokoll zeigt ein einfaches CPB-Modell ohne Transfusion oder inotrope Agenten in eine Ratte. Dieses Modell ermöglicht die Untersuchung der langfristigen mehrere Orgel Folgeerscheinungen von CPB.

<table><tbody><tr><td>Nagetierventilator 7025</td><td>Ugo Basile</td><td>7025</td><td>Beatmungsgerät</td></tr><tr><td>OxiQuant B</td><td>ENVITEC</td><td>46-00-0023</td><td>Sauerstoffsensor</td></tr><tr><td>CMA 450 Temperaturregler</td><td>CMA</td><td>8003759</td><td>Temperaturregler</td></tr><tr><td>CMA 450 Heizkissen</td><td>CMA</td><td>8003763</td><td></td></tr><tr><td>CMA 450 Rektalsonde</td><td>CMA</td><td>8003761</td><td></td></tr><tr><td>DIN(8) bis Einweg-Blutdruck-Wandler</td><td>ADInstruments</td><td>MLAC06</td><td></td></tr><tr><td>Einweg-Blutdruck-Wandler</td><td>ADInstruments</td><td>MLT0670</td><td></td></tr><tr><td>IX-214 Datenrekorder</td><td>iWorx Systems</td><td>IWX-214</td><td>Verstärker</td></tr><tr><td>LabScribe Software</td><td>iWorx Systems</td><td></td><td>Software</td></tr><tr><td>Rollenpumpe</td><td>Furue Science</td><td>Model RP-VT</td><td></td></tr><tr><td>Pumpe Happy Cath</td><td>Medikit</td><td>EB 19G 4HCLs PP</td><td>17-Gauge-Angiokatheter mit mehreren Öffnungen</td></tr><tr><td>SURFLO ETFE I.V. Katheter</td><td>Terumo</td><td>SR-OX2419CA</td><td>24-Gauge-Angiokatheter</td></tr><tr><td>Oxygenator</td><td>Mera</td><td>HPO-002</td><td></td></tr><tr><td>CPB-Circuit</td><td>Mera</td><td>maßgeschneiderte</td><td></td></tr><tr><td>Hespander-Fluidlösung</td><td>Fresenius Kabi</td><td>3319547A4035</td><td>Hydroxyethylstärke</td></tr></tbody></table>

ein wiederherstellungsmodell kardiopulmonalen bypass ohne transfusion oder inotrope substanzen bei ratten

A Recovery Cardiopulmonary Bypass Model Without Transfusion or Inotropic Agents in Rats

Herz-Lungen-Bypass (CPB) ist unverzichtbar in der kardiovaskulären Chirurgie. Trotz der dramatischen Verfeinerung der CPB Technik und Geräte, Multi-Organ Komplikationen im Zusammenhang mit längerer CPB noch beeinträchtigen das Ergebnis des Herz-Kreislauf-Operationen und verschlechtern postoperativen Morbidität und Mortalität. Tiermodellen Rekapitulation der klinischen Einsatz von CPB ermöglichen die Klärung der pathophysiologischen Prozesse, die bei CPB auftreten und prä-klinischen Studien zur Entwicklung von Strategien zum Schutz vor diesen Komplikationen erleichtern. Ratte CPB Modelle sind aufgrund ihrer mehr Wirtschaftlichkeit, komfortable Versuchsabläufe, reichlich Testmethoden an den genetischen oder Proteingehalte und genetische Konsistenz vorteilhaft. Sie sind einsetzbar für die Untersuchung von der Aktivierung des Immunsystems und die Synthese von proinflammatorischen Zytokinen, Kompliment-Aktivierung und Produktion von freien Sauerstoffradikalen. Die Ratte-Modelle wurden verfeinert und haben allmählich an die Stelle der großen Tiermodelle. Hier beschreiben wir ein einfaches CPB-Modell ohne Transfusion und/oder inotrope Agenten in eine Ratte. Das Wiederherstellungsmodell ermöglicht der Untersuchung der langfristigen mehrere Orgel Folgeerscheinungen von CPB.

Abbildung 1 zeigt die gesamte CPB-Schaltung. Die physiologischen Variablen in diesem Modell sind in Abbildung 2gezeigte und Rektaltemperatur gehören, meine arteriellen Blutdruck und die Herzfrequenz. Abbildung 3 zeigt die arterielle Blut Gasanalysen während CPB, einschließlich der arterielle Sauerstoff-Partialdruck, Partialdruck des arteriellen Kohlendioxid, Hämatokrit, Basenabweichung, Serum Ausdruc...

Hier präsentieren wir ein Protokoll, um ein einfaches Wiederherstellungsmodell der kardiopulmonalen Bypass ohne Transfusion oder inotrope Agenten in eine Ratte zu beschreiben. Dieses Modell ermöglicht die Untersuchung der langfristigen mehrere Orgel Folgeerscheinungen von kardiopulmonalen Bypass.

Ein Wiederherstellungsmodell kardiopulmonalen Bypass ohne Transfusion oder inotrope Substanzen bei Ratten

Cardiopulmonary bypass (CPB) is indispensable in cardiovascular surgery. Despite the dramatic refinement of CPB technique and devices, multi-organ ...

Das übergeordnete Ziel dieses Verfahrens ist es, mehrere Organkomplikationen im Zusammenhang mit dem kardiopulmonalen Bypass in einem Nagetiermodell ohne den Einsatz von Transfusionen oder inotropen Mitteln zu untersuchen. Diese Methode zur Behandlung von CPB bei einem Kleintier kann dazu beitragen, wichtige Vorgänge in der kardiovaskulären Zellernährung zu verbessern. Letztendlich wird der Einsatz dieser Technik dazu beitragen, Strategien zum Schutz vor Komplikationen bei kardiopulmonalen Bypass-Operationen zu entwickeln.Richten Sie zunächst den kardiopulmonalen Bypass-Kreislauf ein, verbinden Sie die Polyvinylchlorid-Schläuche mit dem venösen Reservoir, das für den CPB-Kreislauf vorgesehen ist, und verbinden Sie die Schläuche mit einem modifizierten Neonatal-Membranoxygenator. Stellen Sie dann sicher, dass alle Verbindungen fest sitzen und nicht undicht sind. Befestigen Sie anschließend auf einem höhenverstellbaren Tisch den Kreislauf an einer Rollenpumpe.Stellen Sie dann die Höhe des Tisches auf 10 Zentimeter unter der Ebene des Experiments ein. Grundieren Sie nun den Kreislauf mit 11 Millilitern der Ansauglösung und starten Sie die Pumpwalze sanft in Rotation. Stecken Sie dann eine 18-Gauge-Entlüftungsnadel in den Behälter und heizen Sie den Kreislauf mit einer Wärmelampe, die über dem Behälter positioniert ist.Kippen Sie anschließend den Membranoxygenator und lösen Sie ihn mehrmals aus, um die Leitung zu entlüften. Dieser Schritt ist unerlässlich, um Luftembolien und unzureichende Sauerstoffversorgung zu verhindern. Nachdem Sie die Ratte betäubt und intubiert haben, bringen Sie sie auf einen Operationstisch, der mit einem elektrischen Heizkissen ausgestattet ist.Eine Atemfrequenz von 70 Zyklen pro Minute und mit 30 % eingeatmetem Sauerstoff. Überwachen Sie den Sauerstoffgehalt mit dem Sauerstoffsensor. Um die Anästhesie aufrechtzuerhalten, verabreichen Sie 1,5 bis 2 % Isofluran und verabreichen Sie Pentobarbital zu Beginn der CPB.Richten Sie als Nächstes einen rektalen Temperaturfühler ein und halten Sie einen normalen thermischen Körper aufrecht, indem Sie die Temperatur des Heizkissens anpassen und den Stromkreis mit einer Lampe erhitzen. Überwachen Sie dann die Herzfrequenz mit einem EKG, das an der beidseitigen Schulter und am linken Bauch angebracht ist. Tragen Sie nun Feuchtigkeitsgaze auf das Gesicht der Ratte auf, um die Augen zu bedecken.Als nächstes rasieren Sie die Haare über der beidseitigen Leistenregion und der rechten Halsregion. Desinfizieren Sie dann die Haut mit drei abwechselnden Peelings aus 70 % Ethanol und Betadin oder Chlorhexidin. Die Ratte ist nun bereit, kanüliert zu werden.Beginnen Sie die Operation mit einem fünf Millimeter großen Schnitt an der beidseitigen Leistenregion und der rechten Halsregion mit einer Schere. Präparieren Sie dann das Gewebe stumpf, um die rechte Oberschenkelarterie freizulegen. Trennen Sie anschließend vorsichtig die Arterie von der Vene und dem Nerv.Ligatieren Sie dann das Ende der Arteria femoralis communis mit einer 4-0-Seidennaht. Machen Sie dann einen einen Millimeter senkrechten Schnitt in die rechte Oberschenkelarterie und kanülieren Sie ihn vorsichtig mit einem intravenösen 24-Gauge-Katheter bis zu einer Tiefe von einem Zentimeter. Verwenden Sie diesen Katheter zur Überwachung des systemischen arteriellen Drucks und zur Analyse des Gaspartialdrucks im arteriellen Blut.Verabreichen Sie anschließend Heparin-Natrium über den Katheter. Wiederholen Sie diesen Vorgang, um die linke Arteria femoralis communis zu kanülieren, und verwenden Sie diese Kanüle als arterielle Infusionsleitung für den CPB-Kreislauf. Führen Sie als Nächstes einen 17-Gauge-Angiokatheter mit mehreren Öffnungen in die rechte Vena jugularis interna ein und schieben Sie ihn in den rechten Vorhof und die untere Hohlvene vor.Seien Sie vorsichtig, da das Gefäß leicht platzen kann. Verbinden Sie dann den Angiokatheter mit dem CPB-Kreislauf für die venöse Drainage. Decken Sie abschließend jede kanülierte Region mit feuchter Gaze ab, um eine Kontamination zu vermeiden.Das Tier ist nun bereit für die CPB. Bevor Sie mit dem CPB beginnen, beginnen Sie mit der Abgabe von 100 % Sauerstoffgas an den Oxygenator mit 0,8 Litern pro Minute und verringern Sie die Atemfrequenz auf 30 Zyklen pro Minute. Halten Sie den arteriellen Sauerstoffpartialdruck zwischen 200 und 400 Millimeter Quecksilbersäule.Erhöhen Sie anschließend die Temperatur des Wärmekissens auf 42 Grad Celsius, um den unmittelbaren Abfall der Körpertemperatur nach dem Start der CPB abzumildern. Starten Sie nun vorsichtig den CPB-Fluss und behalten Sie das Blutvolumen im Reservoir im Auge. Ein leerer Behälter kann eine Luftembolie verursachen, also passen Sie den Pumpendurchfluss an, indem Sie die Tischhöhe einstellen.Positionieren Sie den venösen Drainagekatheter nicht neu, um die Flussrate zu verändern. Die Bewegung dieses Katheters kann den Vorhof perforieren oder eine Herzrhythmusstörung verursachen. Erhöhen Sie anschließend den Pumpendurchfluss auf bis zu 100 Milliliter pro Kilogramm pro Minute.Halten Sie nun den mittleren Blutdruck bei 70 Millimeter Quecksilbersäule. Wenn der Blutdruck stabil ist, ist ein kleines Volumen von einem Milliliter Blut im Reservoir akzeptabel. Bei geringerem Risiko besteht eine Luftembolie.Wenn sich der Blutdruck nicht stabilisiert, geben Sie zwei bis drei Milliliter Priming-Lösung in den Kreislauf. Wenn sich die Körpertemperatur wieder normalisiert hat, reduzieren Sie die Temperatur des Wärmekissens auf 37 Grad Celsius. Nachdem die CPB abgeschlossen ist, klemmen Sie den venösen Drainageschlauch ein und entfernen Sie ihn aus dem Kreislauf.Gießen Sie dann nach und nach das restliche Blut im Kreislauf in die Arterie, um den Blutdruck aufrechtzuerhalten. Erhöhen Sie anschließend die Atemfrequenz auf 70 Zyklen pro Minute. Entfernen Sie dann den venösen Drainagekatheter und den linken arteriellen Katheter.Als nächstes ligatisieren Sie das Gefäß an der proximalen und distalen Stelle. Entfernen Sie anschließend den arteriellen Zugang aus der rechten Oberschenkelarterie. Reinigen Sie dann jede Wunde mit Kochsalzlösung und verschließen Sie sie mit Nähten.Sobald die Spontanatmung einsetzt, beenden Sie die Anästhesie und extubieren Sie den Intratrachealtubus. Verabreichen Sie dann erwärmte sterile isotonische Flüssigkeiten und verwenden Sie eine Heizmatte und eine elektrische Wärmelampe, um das Tier warm zu halten, bis es sich von der Narkose erholt hat. Beobachten Sie das Tier genau und unterstützen Sie bei Bedarf die Atemwege.Zu den arteriellen Blutgasanalysen während der CPB gehören der Partialdruck des arteriellen Sauerstoffs, der Partialdruck des arteriellen Kohlendioxids, der Hämatokrit, der Basenüberschuss, die Serumexpression von Kalium und das Potenzial von Wasserstoff. Während des gesamten Eingriffs waren die Herzfrequenz und der mittlere arterielle Druck stabil. Die rektale Temperatur und der Hämatokrit nahmen zu Beginn der CPB aufgrund der durch das Priming-Volumen verursachten Hämodilution ab.Der Partialdruck des arteriellen Sauerstoffs stieg während der CPB aufgrund der Membranoxygenierung signifikant an. Hämatoxylin- und Eosin-Färbungen der Lunge nach CPB zeigen in der CPB-Gruppe im Vergleich zur Kontrollgruppe interstitielle Ödeme, Infiltration entzündlicher Zellen und Blutungen. Darüber hinaus waren die Serumkonzentrationen von Tumornekrosefaktor alpha, Interleukin sechs und High Mobility Group Box 1 nach CPB jeweils erhöht.Nachdem Sie sich dieses Video angesehen haben, sollten Sie ein gutes Verständnis dafür haben, wie Sie ein grobes CPB-Verfahren ohne Transfusion oder entropische Mittel durchführen können. Einmal gemeistert, kann diese Technik in zwei Stunden durchgeführt werden, wenn sie richtig ausgeführt wird. Wenn Sie dieses Verfahren versuchen, ist es wichtig, daran zu denken, die Hämodynamik der Ratte regelmäßig zu überprüfen.Nach ihrer Entwicklung ebnete diese Technik den Weg für Forscher auf dem Gebiet der Herz-Kreislauf-Chirurgie, um entzündliche und andere wichtige Organkomplikationen bei CPB zu erforschen.

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Research

Forschung

JoVE Journal

Immunology and Infection

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