Eine neue Methode zur Induktion einer Depression-ähnliches Verhaltens bei Ratten

Das übergeordnete Ziel dieses Modells ist es, die Ansteckung von Depressionen bei Ratten zu ermitteln. Diese Methode kann helfen, Schlüsselfragen im Verhaltensbereich zu beantworten, wie z. B. Wirkmechanismus, Prävention, Eindämmung und Behandlung von ansteckenden Depressionen. Der Hauptvorteil dieser Technik besteht darin, dass es sich um ein neues Modell zur Etablierung von ansteckenden Depressionen handelt.

Die Implikationen dieser Technik erstrecken sich auf die Therapie von Depressionen, da es derzeit kein Format für die Untersuchung ansteckender Depressionen gibt. Für das experimentelle Verfahren wählten wir männliche Sprague-Dawley-Ratten ohne offensichtliche Pathologie aus, die jeweils zwischen 300 und 350 Gramm wiegen. Halten Sie drei Ratten pro Käfig mit Futter und Wasser ad libitum verfügbar.

Erlauben Sie mindestens zwei Wochen Adaption bei einem 12-stündigen Hell-Dunkel-Zyklus. Vor Beginn des Experiments sind alle Ratten mit einem dreitägigen Saccharose-Präferenztest auf das Vorhandensein depressiver Verhaltensweisen zu testen. Setze dazu die Ratten während des Dunkelzyklus in einzelnen Käfigen im selben Raum wie den Stall.

Geben Sie eine Flasche mit 100 Millilitern 1%iger Saccharoselösung für 24 Stunden in jeden Käfig und lassen Sie die Adaption einwirken. Entfernen Sie nach 24 Stunden die Flaschen und entziehen Sie den Ratten 12 Stunden lang Futter und Wasser. Stellen Sie nach 12 Stunden zwei Flaschen, eine mit 100 Millilitern 1%iger Saccharoselösung und die andere mit 100 Millilitern Leitungswasser, für vier Stunden in jeden Käfig.

Notieren Sie nach vier Stunden das Volumen in Millilitern über die konsumierte Saccharoselösung und das Wasser und berechnen Sie die Affinität zur Saccharosepräferenz wie gezeigt. Eliminiere Ratten, die positiv auf Depressionen getestet wurden, und eliminiere dann Ratten, die in denselben Käfigen wie die depressiven Ratten untergebracht waren. Falls erforderlich, schließen Sie weitere Ratten nach dem Zufallsprinzip aus, um die endgültigen Gruppen zu bilden.

Kennzeichnen Sie die Ratten mit nummerierten Aufklebern. Um eine Depression zu induzieren, setzen Sie die 60 Ratten in der chronisch unvorhersehbaren Stressgruppe zwei der folgenden sieben Stressoren aus. Verwenden Sie in einer zufälligen Reihenfolge für fünf aufeinanderfolgende Wochen einen Stressor tagsüber und den anderen nachts.

Halten Sie die Ratten in größeren Gruppen, indem Sie sechs Ratten statt der üblichen drei pro Käfig für 18 Stunden setzen. Setzen Sie die Ratten drei Stunden lang in einen Käfig, der um 45 Grad entlang der vertikalen Achse geneigt ist. Den Ratten wird 18 Stunden lang die Nahrung entzogen.

Entziehen Sie den Ratten 18 Stunden lang das Wasser und setzen Sie sie nach einer Stunde leeren Wasserflaschen aus. Setzen Sie die Ratten während des Nachtzyklus acht Stunden lang in einen Käfig mit nasser Einstreu. Setzen Sie die Ratten zweimal pro Woche 24 Stunden lang in einem umgekehrten Hell-Dunkel-Zyklus kontinuierlicher Beleuchtung aus.

Setzen Sie die Ratten während des Nachtzyklus fünf Minuten lang in eine heiße Umgebung mit 40 Grad Celsius. Bestätigen Sie nach der Exposition gegenüber den beiden ausgewählten Stressoren die Entwicklung einer Depression, indem Sie den Saccharose-Präferenztest durchführen. Setzen Sie zunächst zwei CUS-exponierte Ratten pro Käfig in 30 verschiedene Käfige.

Geben Sie dann eine Ratte aus der Gruppe der Depressionsansteckungskrankheiten in jeden Käfig mit zwei CUS-exponierten Ratten und lassen Sie das Zusammenleben fünf Wochen lang unter Standardbedingungen zu. Nach fünf Wochen des Zusammenlebens unterziehen Sie alle Gruppen den Saccharose-Präferenz-, Freiland- und Zwangsschwimmtests. Reinigen Sie das Gerät vor dem Einsetzen jedes Tieres mit 5%igem Alkohol.

Setze die Ratte an die Ecke des offenen Feldes mit Blick auf die Wand. Nehmen Sie das Verhalten der Ratte fünf Minuten lang mit einer Videokamera auf. Analysieren Sie Nachaufzeichnungen der Gesamtstrecke, der Geschwindigkeit im zentralen Teil des Feldes und der im zentralen Teil des Feldes verbrachten Zeit.

Zur Gewöhnung legen Sie die Ratte für eine 15-minütige Schwimmstunde in einen Glaszylinder mit Wasser bei Raumtemperatur. Nehmen Sie die Ratte aus dem Zylinder, trocknen Sie sie mit Küchenpapier ab und setzen Sie sie 15 Minuten lang in einen warmen Käfig, bevor Sie die Ratte wieder in den Heimkäfig zurückbringen. Nehmen Sie am nächsten Tag eine fünfminütige Schwimmstunde auf Video auf und analysieren Sie die Aufnahmen auf Immobilität, Klettern und Stuhlgang.

Nachdem sie Ratten fünf Wochen lang CUS zur Induktion von Depressionen ausgesetzt und anschließend gesunde Ratten für weitere fünf Wochen den CUS-exponierten Ratten ausgesetzt hatten, zeigten beide Gruppen von Ratten am Ende depressive Verhaltensweisen, was sich in einer verminderten Präferenz für Saccharose zeigte. Im Freilandtest hatten Ratten sowohl in der CUS-exponierten als auch in der Depressions-Ansteckungsgruppe im Vergleich zur Kontrollgruppe verringerte Gesamtreisestrecken und verringerte mittlere Geschwindigkeiten. Die Zeit, die die Ratten aus der Kontrollgruppe in den beiden Versuchsgruppen in der Mitte des offenen Feldes verbrachten, unterschied sich nicht signifikant.

Sowohl CUS-exponierte als auch Depressions-Ansteckungsratten zeigten nach dem erzwungenen Schwimmtest eine verlängerte Immobilität. Eine signifikant längere Zeit der Inaktivität wurde jedoch nur in der CUS-exponierten Gruppe im Vergleich zur Kontrollgruppe registriert. In einem anderen untersuchten Testparameter, der Kletterzeit, zeigten sowohl Gruppen von CUS-exponierten Ratten als auch Ratten mit Ansteckungsdepression im Vergleich zur Kontrollgruppe stark eingeschränkte Klettereigenschaften.

Die Bestimmung der Defäkationsrate führte dazu, dass für beide Versuchsgruppen im Vergleich zur Kontrolle hohe Kotmengen registriert wurden. Beim Versuch dieses Verfahrens ist es wichtig, daran zu denken, die zufällige Rotation der Stressoren während des chronischen unvorhersehbaren Stressmodells aufgrund des hohen Bedarfs an manueller Arbeit im Voraus zu planen. Nach diesem Verfahren können weitere Tests wie Elevated Plus Maze oder Mirror Test durchgeführt werden, um die Verhaltensänderungen nach der Depression weiter zu untersuchen.