Name: Ein Protokoll der degenerativen Tenocyte von Menschen zu erwerben (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-06-09T14:30:00.000+00:00
Duration: 9 min 25 s
Description: Lernen Sie die Isolierung degenerativer menschlicher Tenozyten während der Epikondylitis-Chirurgie. Diese Methode ermöglicht die Gewinnung von Gewebe ohne zusätzliche Patientenverletzung für die Tendinopathie-Forschung.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Diese Forschung wurde unterstützt durch einen Zuschuss aus den Korea Health Technology R & D Project durch das Korea Gesundheit Industrie Entwicklung Institut (KHIDI), das vom Ministerium für Gesundheit & Wohlbefinden, Republik Korea finanziert wurde (gewähren Nummer: HI16C1559).

Das Protokoll wurde im Einklang mit der Deklaration von Helsinki und das Protokoll von der Institutional Review Board am CHA Bundang Medical Center genehmigt wurde.
1. degenerative Sehne Gewebe Ernte vom Patienten
<ol><li>Laterale Epicondylitis zu diagnostizieren, indem unter eine Anamnese und körperliche Untersuchung Befunde mit: Zärtlichkeit über die Sehnige Ursprung in der Nähe der seitlichen Epicondylus; Schmerzen, hervorgerufen durch widerstanden Erweiterung des Handgelenk.</li>
	<li>Verwenden Sie die folgenden Einschlusskriterien: über 18 Jahre alt; eine Geschichte der laterale Epicondylitis für ein Minimum von sechs Monaten; widerspenstigen für nicht-operativen Behandlung; mindestens drei Monate vergangen seit Injektion von Kortikosteroiden, Platelet rich Plasma oder Botulinumtoxin (Botox)</li>
	<li>Ausschließen folgender: schwangere Frauen; Patienten mit einer Geschichte der Halswirbelsäule Krankheit, Ellenbogen Arthritis, rheumatologic Krankheit, Operation um Ellenbogen und Nerv Entrapment-Syndrom; Patienten, die sich weigern, Gewebe zu spenden.</li>
	<li>
OP-Technik Hinweis: Siehe Abbildung 1-24.<ol>
<li>Legen Sie nach allgemeiner Anästhesie mit Isofluran und endotracheale Intubation den Arm auf den Tisch und wenden Sie eine blutsperre. Dann bewerben Sie Betadine Agent auf den ganzen Arm und drapierung mit einem aseptischen op.</li>
		<li>Setzen Sie den seitlichen Ellenbogen durch einen Schnitt von 3 – 5 cm mit Nr. 15 chirurgischen Skalpell Klinge nur Anteromedial an der seitlichen Epicondylus und proximalen auf die Ebene des Gelenks.</li>
		<li>Visuell erkennen Sie Beinstrecker Carpi Radialis Longus (ECRL) und Beinstrecker Aponeurose Schnittstelle und machen Sie einen Spaltung Schnitt 2 – 3 mm in der Tiefe zwischen der ECRL und Beinstrecker Aponeurose mit Nr. 15 chirurgischen Skalpellklinge an der identifizierten Schnittstelle.</li>
		<li>Extrahieren Sie die ECRL anterior, den pathologischen Beinstrecker Carpi Radialis Longus Brevis (ECRB) Ursprung unten in direkter Sicht bringt.</li>
		<li>Identifizieren Sie visuell die pathologische degenerative Gewebe durch seine charakteristische stumpf grau Farbe und in der Regel ödematös und lockeren Gewebe.</li>
		<li>Resezieren Sie nach der Identifizierung sorgfältig alle degenerative Gewebe stark mit Nr. 15 chirurgischen Skalpell und Mini-Blades.</li>
		<li>Des resezierten Gewebes (ca. 1 cm3) sofort in Phosphat gepufferte Kochsalzlösung (PBS) einbinden und das umliegende Gewebe außer Sehne Gewebe vorsichtig in ca. 10 mL PBS so bald wie möglich zu entfernen.</li>
		<li>In Fällen mit knöchernen Überbein an der seitlichen Epicondylus Überbein mit einer Rongeur zu entfernen und mit einer Raspel zu glätten. Machen mehrere Bohrlöcher (Durchmesser 1,6 mm, ca. 6 – 8 Löcher) in den anterolateralen Kondylus Gefäßversorgung zu verbessern. Dies ist optional.</li>
		<li>Schließen Sie die Wunde schichtweise mit nicht resorbierbarem Nahtmaterial.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
Gesunden tenocyte
	<ol>
<li>Die verbleibenden Sehne der Auto-Muskelfaserriss oder Auto-Patella Sehne während der Rekonstruktion des vorderen Kreuzbandes einzuholen Sie gesunde Tenocytes, und verwenden Sie es als das Steuerelement für die folgenden Experiment25. Hinweis: Die Anzahl der in dieser Studie verwendeten Proben waren drei in jeder Gruppe.</li>
	</ol>
</li>
</ol>2. Histologie
<ol><li>Etwa die Hälfte des geernteten Gewebes in neutral gepufferte 10 % Formalin in einer chemischen Abzugshaube oder ähnlichem aufbewahren.</li>
	<li>Einbetten des Gewebes in paraffinblock (4 – 5 mL) und Abschnitt es koronal in 4 – 5 µm Abschnitten.</li>
	<li>
Führen Sie Abschnitte von Kontrolle und degenerative Sehne mit Hämatoxylin und Eosin Fleck (H & E) und Alcian blau Fleck bei einem pH-Wert von 2,5 zu Flecken. Durchzuführen Sie H & E Färbung in einem automatisierten Fleck-Maschine wie folgt.
	<ol>
<li>Deparaffinize mit Xylol (3-Mal, 5 min, beziehungsweise).</li>
		<li>Hydrat von abgestuften Alkohole, Wasser (100 % Alkohol, 4 min. 100 % Alkohol, 3 min; 95 % Alkohol, 2 min, 70 % Alkohol, 1 min; Wasser, 2 min).</li>
		<li>In Hämatoxylin 5 min Waschen in Wasser für 2 min gut färben.</li>
		<li>Unterscheiden sich in saurem Alkohol von 1 % (1 % HCl in 70 % Alkohol) für 3 s. Waschen gut in Wasser 3 Minuten lang.</li>
		<li>Neutralisieren von HCl durch Eintauchen in ein 0,5 % Ammoniak für 10 s, gefolgt von 3 min Wasser waschen.</li>
		<li>Für 5 min in Eosion färben.</li>
		<li>Austrocknen durch Alkohole (80 % Alkohol, 30 s, 95 % Alkohol, 1 min, 100 % Alkohol 1 min, 100 % Alkohol 2 min).</li>
		<li>Klar in Xylol (3-Mal, 2 min, 2 min und 3 min, beziehungsweise).</li>
		<li>Mit einer Abdeckung Folie montieren.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
Durchführen Sie Immunohistochemitry (IHC) mit dem Bond Polymer verfeinern Detection Kit gemäß den Anweisungen des Herstellers mit geringfügigen Änderungen.
	<ol>
<li>Führen Sie nach 4.wenn mit Xylol ein Antigen Retrieval Verfahren mit Bond Epitop Retrieval Lösung für 30 min bei 100 ° C. Die Anleihe Epitop Retrieval Lösung enthält eine basierte Citrat-Puffer und Tensid (1 L, pH 5,9-6,1).</li>
		<li>Endogene Peroxidasen durch das Gewebe mit Wasserstoffperoxid für 5 min Inkubation zu stillen.</li>
		<li>Inkubieren Sie die Abschnitte für 15 min bei einer Umgebungstemperatur (21-22 ° C) mit primären Antikörper gegen den vaskulären endothelialen Wachstumsfaktor (VEGF) (1: 200), Tenomodulin (1: 200) oder Mohawk (1: 200).</li>
		<li>Durchführen Sie Sekundärantikörper tagging mit einem Biotin-freie Polymeren Meerrettich Peroxidase-Linker Antikörper Konjugat System.<ol>
<li>Verwendung sekundäre Kaninchen anti-Maus IgG in 10 % (V/V) tierische Seren in Tris gepufferte saline/0.09% 2-Methyl-4-isothiazolin-3-one Lösung, Maus-Antikörper zu lokalisieren.</li>
			<li>Verwenden Sie Anti-Kaninchen Polymer Poly-HRP-IgG (< 25 µg/mL) mit 10 % (V/V) tierische Seren in Tris gepufferte saline/0.09%, Kaninchen-Antikörper zu lokalisieren.</li>
			<li>Verwenden Sie 3, 3'-Diaminobenzidine Tetrahydrochloride Hydrat in einer Lösung der Stabilisator, den Komplex über einen braunen Niederschlag zu visualisieren.</li>
			<li>Gegenfärbung mit < 0,1 % Hämatoxylin (blau), die Zellkerne zu visualisieren.</li>
		</ol>
</li>
	</ol>
</li>
	<li>Beobachten die Dias befleckt mit H & E, Alcian blaue Flecken und IHC für VEGF, Tenomodulin und Mohawk unter Lichtmikroskop und repräsentative mikroskopische Bilder der einzelnen Folien unter einem Hochleistungs-Feld (400 X) zu erhalten.</li>
</ol>(3) Tenocyte Kultur
<ol><li>
Gewebe-Vorbereitung
	<ol>
<li>Bereiten Sie die Sehne Probe durch das Entfernen des umliegenden Gewebes mit Mikro-Scheren und Pinzetten gründlich vor.</li>
		<li>Mit PBS waschen und in kleine Stücke (etwa 1 mm3 oder weniger) hacken.</li>
		<li>Gewebe für 1 h in 30 mL Dulbeccos geändert Eagle Medium (DMEM) ergänzt mit 30 mg/mL Kollagenase II bei 37 ° c zu verdauen</li>
		<li>Ein 100 µm-Sieb Zelle durchlaufen Sie Zellen.</li>
		<li>Deaktivieren Sie Kollagenase II durch Zugabe von 1 mL der fetalen bovine Serum (FBS).</li>
		<li>196 X g für 5 min zentrifugieren.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
Zellkultur
	<ol>
<li>3 x 105 Zellen in eine 100 mm Schale Saatgut und Kultur mit DMEM mit 10 % FBS und 1 % Antibiotikum antimykotische Lösung bei 37 ° C in einem 5 % CO2 Inkubator für 1 Woche ergänzt.</li>
		<li>Alle drei Tage, bis 80 % Zusammenfluss tritt das Kulturmedium zu ändern. Gesunden und degenerative Zellproben bis Durchgang vier Kultur und verwenden für Experiment.</li>
	</ol>
</li>
</ol>(4) Immunocytochemistry (ICC)
<ol><li>Übertragen Sie 200 µL kultivierte Zelle (2 x 105 Zellen) auf die acht Vertiefungen einer Kammer Folie und wachsen Sie die Zellen zum Zusammenfluss mit der Zugabe von frischen Medien für 1 Tag.</li>
	<li>Die Zellen mit PBS waschen und mit 500 µL 4 % Formaldehyd pro Bohrloch befestigen.</li>
	<li>Inkubieren Sie die Folien mit 0,5 % Triton x-100 mit PBS-Puffer für 10 min für Permeabilisierung der Membranen.</li>
	<li>Block in PBS mit 1 % Rinderserumalbumin und 0,05 % TWEEN-20 für Mohawk und Tenomodulin, beziehungsweise.</li>
	<li>Über Nacht in der Dunkelheit mit Maus Anti-Mohawk monoklonale Antikörper (1: 100 Verdünnung) und Ziege-Anti-Tenomodulin-Antikörper (1: 100 Verdünnung) bei 4 ° C inkubieren.</li>
	<li>Inkubieren Sie die sekundäre Antikörper (Alexa 555-Anti Ziege (1: 200) für Tenomodulin; Alexa-488-Anti-Maus (1: 200) für Mohawk) im Dunkeln für 1 h bei Raumtemperatur.</li>
	<li>Mit 0,5 µL einer Fluoreszenz Eindeckmedium montieren.</li>
	<li>Mit einem Fluoreszenzmikroskop (400 X) zu analysieren.</li>
</ol>5. Verbreitung Assay
<ol><li>
Zelle künstliche mit wasserlöslichen tetrazoliumsalz (WST)-1 zu messen.
	<ol>
<li>Säen Sie gesunde und degenerative Zellen in 96-well-Platten bei einer Dichte von 2 x 103 Zellen pro Bohrloch für 24, 72 und 120 h.</li>
		<li>Fügen Sie nach der Inkubation 10 µL 10 % WST-1-Lösung in jede Vertiefung.</li>
		<li>Inkubieren Sie die Platten für 3 h bei 37 ° C in 5 % CO2.</li>
		<li>Messung der optischen Dichte bei 450 nm mit einer Mikrotestplatte Reader. Nehmen Sie Lesungen mindestens dreimal zu allen Zeitpunkten für jede Probe.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
Maßnahme zelluläre DNA-Menge mit der BrdU-Assay.
	<ol>
<li>Samen beide gesund und degenerative Zelle in 96 Platten gut bei einer Dichte von 2 x 103 Zellen pro Bohrloch für 24, 72 und 120 h.</li>
		<li>Fügen Sie nach der Inkubation 10 µL 10 % BrdU Lösung in jede Vertiefung.</li>
		<li>Inkubieren Sie die Platten für 3 h bei 37 ° C in 5 % CO2.</li>
		<li>Fügen Sie 100 µL/Well der Befestigung/Denaturing Lösung (60 – 70 % Ethanol, 0,1-0,5 % Natriumhydroxid) und halten Sie die Platte bei Raumtemperatur für 30 Minuten.</li>
		<li>Fügen Sie 100 µL/Well 1 h 1 x Erkennung Antikörperlösung und halten die Platte bei Raumtemperatur vorbereitet.</li>
		<li>Entfernen Sie Lösung zu und waschen Sie der Platte dreimal mit 1 x Waschpuffer.</li>
		<li>Fügen Sie 100 µL/Well 1 X HRP-konjugierten Sekundärantikörper Lösung vorbereitet und halten Sie die Platte bei Raumtemperatur für 30 Minuten.</li>
		<li>Entfernen Sie die Lösung und waschen dreimal mit 1 x Waschpuffer.</li>
		<li>Fügen Sie 100 µL 50 % TMB-Substrat.</li>
		<li>30 min bei Raumtemperatur inkubieren.</li>
		<li>100 µL Stopplösung hinzufügen.</li>
		<li>Messung der optischen Dichte bei 450 nm mit einer Mikrotestplatte Reader. Hinweis: Nehmen Sie Lesungen jederzeit mindestens dreimal Punkte für jede Probe.</li>
	</ol>
</li>
</ol>6. statistische Analyse
<ol><li>Sammeln und Analysieren von Daten mit SPSS.</li>
	<li>Zeigen Sie Daten vom Mittelwert ± Standardfehler von Mittelwert.</li>
	<li>Einsatz-Mann Whitney U-Test.</li>
	<li>Betrachten Sie Unterschiede statistisch signifikant, wenn der p -Wert kleiner als 0,05 ist (p < 0,05).</li>
</ol>

<ol><li>Ackermann, P. W., Renstrom, P. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/23016086">Tendinopathy in sport.</a> Sports Health. 4 (3), 193-201 (2012).</li>
<li>Maffulli, N., Wong, J., Almekinders, L. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Types+and+epidemiology+of+tendinopathy%5BTitle%5D)+AND+%22Clinical+Sports+Medicine%22%5BJournal%5D)">Types and epidemiology of tendinopathy.</a> Clinical Sports Medicine. 22 (4), 675-692 (2003).</li>
<li>Lui, P. P., Chan, L. S., Fu, S. C., Chan, K. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Expression+of+sensory+neuropeptides+in+tendon+is+associated+with+failed+healing+and+activity-related+tendon+pain+in+collagenase-induced+tendon+injury%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Sports+Medicine%22%5BJournal%5D)">Expression of sensory neuropeptides in tendon is associated with failed healing and activity-related tendon pain in collagenase-induced tendon injury.</a> American Journal of Sports Medicine. 38 (4), 757-764 (2010).</li>
<li>Han, S. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+corticosteroid+on+the+expressions+of+neuropeptide+and+cytokine+mRNA+and+on+tenocyte+viability+in+lateral+epicondylitis%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Inflammation+%28London%29%22%5BJournal%5D)">Effects of corticosteroid on the expressions of neuropeptide and cytokine mRNA and on tenocyte viability in lateral epicondylitis.</a> Journal of Inflammation (London). 9 (1), 40(2012).</li>
<li>Uchio, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Expression+of+neuropeptides+and+cytokines+at+the+extensor+carpi+radialis+brevis+muscle+origin%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Shoulder+and+Elbow+Surgery%22%5BJournal%5D)">Expression of neuropeptides and cytokines at the extensor carpi radialis brevis muscle origin.</a> Journal of Shoulder and Elbow Surgery. 11 (6), 570-575 (2002).</li>
<li>Lieber, R. L., Loren, G. J., Friden, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vivo+measurement+of+human+wrist+extensor+muscle+sarcomere+length+changes%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neurophysiology%22%5BJournal%5D)">In vivo measurement of human wrist extensor muscle sarcomere length changes.</a> Journal of Neurophysiology. 71 (3), 874-881 (1994).</li>
<li>Regan, W., Wold, L. E., Coonrad, R., Morrey, B. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microscopic+histopathology+of+chronic+refractory+lateral+epicondylitis%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Sports+Medicine%22%5BJournal%5D)">Microscopic histopathology of chronic refractory lateral epicondylitis.</a> American Journal of Sports Medicine. 20 (6), 746-749 (1992).</li>
<li>Sharma, P., Maffulli, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tendon+injury+and+tendinopathy%3A+healing+and+repair%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Bone+and+Joint+Surgery+American+volume%22%5BJournal%5D)">Tendon injury and tendinopathy: healing and repair.</a> Journal of Bone and Joint Surgery American volume. 87 (1), 187-202 (2005).</li>
<li>Lui, P. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Stem+cell+technology+for+tendon+regeneration%3A+current+status%2C+challenges%2C+and+future+research+directions%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+Cells+Cloning%22%5BJournal%5D)">Stem cell technology for tendon regeneration: current status, challenges, and future research directions.</a> Stem Cells Cloning. 8, 163-174 (2015).</li>
<li>Dahlgren, L. A., van der Meulen, M. C., Bertram, J. E., Starrak, G. S., Nixon, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Insulin-like+growth+factor-I+improves+cellular+and+molecular+aspects+of+healing+in+a+collagenase-induced+model+of+flexor+tendinitis%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Orthopedic+Research%22%5BJournal%5D)">Insulin-like growth factor-I improves cellular and molecular aspects of healing in a collagenase-induced model of flexor tendinitis.</a> Journal of Orthopedic Research. 20 (5), 910-919 (2002).</li>
<li>Schnabel, L. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mesenchymal+stem+cells+and+insulin-like+growth+factor-I+gene-enhanced+mesenchymal+stem+cells+improve+structural+aspects+of+healing+in+equine+flexor+digitorum+superficialis+tendons%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Orthopedic+Research%22%5BJournal%5D)">Mesenchymal stem cells and insulin-like growth factor-I gene-enhanced mesenchymal stem cells improve structural aspects of healing in equine flexor digitorum superficialis tendons.</a> Journal of Orthopedic Research. 27 (10), 1392-1398 (2009).</li>
<li>Durgam, S. S., Stewart, A. A., Sivaguru, M., Wagoner Johnson, A. J., Stewart, M. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tendon-derived+progenitor+cells+improve+healing+of+collagenase-induced+flexor+tendinitis%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Orthopedic+Research%22%5BJournal%5D)">Tendon-derived progenitor cells improve healing of collagenase-induced flexor tendinitis.</a> Journal of Orthopedic Research. 34 (12), 2162-2171 (2016).</li>
<li>Titan, A., Andarawis-Puri, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tendinopathy%3A+Investigating+the+Intersection+of+Clinical+and+Animal+Research+to+Identify+Progress+and+Hurdles+in+the+Field%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Bone+and+Joint+Surgery+Review%22%5BJournal%5D)">Tendinopathy: Investigating the Intersection of Clinical and Animal Research to Identify Progress and Hurdles in the Field.</a> Journal of Bone and Joint Surgery Review. 4 (10), (2016).</li>
<li>Dirks, R. C., Warden, S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Models+for+the+study+of+tendinopathy%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Musculoskeletal+Neuronal+Interaction%22%5BJournal%5D)">Models for the study of tendinopathy.</a> Journal of Musculoskeletal Neuronal Interaction. 11 (2), 141-149 (2011).</li>
<li>de Mos, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Can+platelet-rich+plasma+enhance+tendon+repair%3F+A+cell+culture+study%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Sports+Medicine%22%5BJournal%5D)">Can platelet-rich plasma enhance tendon repair? A cell culture study.</a> American Journal of Sports Medicine. 36 (6), 1171-1178 (2008).</li>
<li>Scherb, M. B., Han, S. H., Courneya, J. P., Guyton, G. P., Schon, L. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+bupivacaine+on+cultured+tenocytes%5BTitle%5D)+AND+%22Orthopedics%22%5BJournal%5D)">Effect of bupivacaine on cultured tenocytes.</a> Orthopedics. 32 (1), 26(2009).</li>
<li>Wong, M. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+dexamethasone+on+cultured+human+tenocytes+and+its+reversibility+by+platelet-derived+growth+factor%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Bone+and+Joint+Surgery+American+Volume%22%5BJournal%5D)">Effect of dexamethasone on cultured human tenocytes and its reversibility by platelet-derived growth factor.</a> Journal of Bone and Joint Surgery American Volume. 85 (10), 1914-1920 (2003).</li>
<li>Tempfer, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+crystalline+glucocorticoid+triamcinolone+acetonide+on+cultered+human+supraspinatus+tendon+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Orthopaedics%22%5BJournal%5D)">Effects of crystalline glucocorticoid triamcinolone acetonide on cultered human supraspinatus tendon cells.</a> Acta Orthopaedics. 80 (3), 357-362 (2009).</li>
<li>Menon, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((New+insights+in+extracellular+matrix+remodeling+and+collagen+turnover+related+pathways+in+cultured+human+tenocytes+after+ciprofloxacin+administration%5BTitle%5D)+AND+%22Muscles+Ligaments+Tendons+J%22%5BJournal%5D)">New insights in extracellular matrix remodeling and collagen turnover related pathways in cultured human tenocytes after ciprofloxacin administration.</a> Muscles Ligaments Tendons J. 3 (3), 122-131 (2013).</li>
<li>Backman, L. J., Fong, G., Andersson, G., Scott, A., Danielson, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Substance+P+is+a+mechanoresponsive%2C+autocrine+regulator+of+human+tenocyte+proliferation%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Substance P is a mechanoresponsive, autocrine regulator of human tenocyte proliferation.</a> PLoS One. 6 (11), 27209(2011).</li>
<li>Backman, L. J., Eriksson, D. E., Danielson, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Substance+P+reduces+TNF-alpha-induced+apoptosis+in+human+tenocytes+through+NK-1+receptor+stimulation%5BTitle%5D)+AND+%22Britich+Journal+of+Sports+Medicine%22%5BJournal%5D)">Substance P reduces TNF-alpha-induced apoptosis in human tenocytes through NK-1 receptor stimulation.</a> Britich Journal of Sports Medicine. 48 (19), 1414-1420 (2014).</li>
<li>Rolf, C. G., Fu, B. S., Pau, A., Wang, W., Chan, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Increased+cell+proliferation+and+associated+expression+of+PDGFRbeta+causing+hypercellularity+in+patellar+tendinosis%5BTitle%5D)+AND+%22Rheumatology+%28Oxford%29%22%5BJournal%5D)">Increased cell proliferation and associated expression of PDGFRbeta causing hypercellularity in patellar tendinosis.</a> Rheumatology (Oxford). 40 (3), 256-261 (2001).</li>
<li>Hoppe, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tenocytes+of+chronic+rotator+cuff+tendon+tears+can+be+stimulated+by+platelet-released+growth+factors%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Shoulder+and+Elbow+Surgery%22%5BJournal%5D)">Tenocytes of chronic rotator cuff tendon tears can be stimulated by platelet-released growth factors.</a> Journal of Shoulder and Elbow Surgery. 22 (3), 340-349 (2013).</li>
<li>Schipper, O. N., Dunn, J. H., Ochiai, D. H., Donovan, J. S., Nirschl, R. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nirschl+surgical+technique+for+concomitant+lateral+and+medial+elbow+tendinosis%3A+a+retrospective+review+of+53+elbows+with+a+mean+follow-up+of+11.7+years%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Sports+Medicine%22%5BJournal%5D)">Nirschl surgical technique for concomitant lateral and medial elbow tendinosis: a retrospective review of 53 elbows with a mean follow-up of 11.7 years.</a> American Journal of Sports Medicine. 39 (5), 972-976 (2011).</li>
<li>Cook, J. L., Feller, J. A., Bonar, S. F., Khan, K. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Abnormal+tenocyte+morphology+is+more+prevalent+than+collagen+disruption+in+asymptomatic+athletes%27+patellar+tendons%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Orthopedic+Research%22%5BJournal%5D)">Abnormal tenocyte morphology is more prevalent than collagen disruption in asymptomatic athletes' patellar tendons.</a> Journal of Orthopedic Research. 22 (2), 334-338 (2004).</li>
<li>Yuan, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Creating+an+Animal+Model+of+Tendinopathy+by+Inducing+Chondrogenic+Differentiation+with+Kartogenin%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Creating an Animal Model of Tendinopathy by Inducing Chondrogenic Differentiation with Kartogenin.</a> PLoS One. 11 (2), 0148557(2016).</li>
<li>Lui, P. P., Maffulli, N., Rolf, C., Smith, R. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((What+are+the+validated+animal+models+for+tendinopathy%5BTitle%5D)+AND+%22Scandinavian+Journal+of+Medical+Scientific+Sports%22%5BJournal%5D)">What are the validated animal models for tendinopathy.</a> Scandinavian Journal of Medical Scientific Sports. 21 (1), 3-17 (2011).</li>
<li>Wilhelm, A. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/19700079">Lateral epicondylitis review and current concepts.</a> Journal of Hand Surgery American Volume. 34 (7), author reply 1359-1360 1359-1360 (2009).</li>
</ol>

Die Autoren haben nichts preisgeben.

Eine Reihe von früheren Studien berichteten wie erstelle ich chronische Tendinopathic Tiermodelle mit verschiedenen Verfahren wie Kollagenase oder Kartogenin Injektion, Laufband laufen und weitere26,27. Obwohl zahlreiche Studien vielversprechende therapeutische Effekte basierend auf diesen Tiermodellen zeigten, wäre Experimente mit menschlichen degenerativen Tenocyte entscheidend im Bereich der sehnenerkrankung, um die Wirksamkeit der Behandlung zu reproduzieren....

Sehnenerkrankung ist eine chronische, degenerative, Muskel-Skelett-Erkrankung, die in verschiedenen Teilen des Körpers entwickelt. Vor kurzem, ist die Zahl der Fälle von sehnenerkrankung in der entwickelten Welt aufgrund der zunehmenden Teilnahme an Freizeitsport und gestiegene Lebenserwartung1,2stark gestiegen. Die Ursache der sehnenerkrankung gilt als multifaktoriell und diese Ursachen sind Ischämie, Sauerstoff freie Radikale Verletzungen, ein Ungleichgewicht zwischen Vasokonstriktor und gefäßerweiternde innervierungen, internen Mikro-Tränen und Änderungen an Neuro-Verordnung3 ,4,5,6,7,8. Die meisten Behandlungen für sehnenerkrankung nur lindern die Symptome. Darüber hinaus Behandlungen ohne Geweberegeneration erfordern eine lange Zeit für die Rehabilitation und erzielen eine begrenzte Antwort von verletzten sehnen, die eine klinische Herausforderung für Ärzte9aufdrängt.
Die Unfähigkeit der aktuellen Behandlungsmöglichkeiten zusammen mit der mangelnden Fähigkeit der degenerativen Sehne zu heilen hat Blei Forscher, Interesse an der Erforschung alternativer Behandlungsstrategien zu nehmen. Vor kurzem neue Studien berichteten viele vielversprechende Ergebnisse für die Verbesserung der der heilenden Wirkung der sehnenerkrankung Spannglieder mit Wachstumsfaktoren, Stammzellen basierte Therapie und Gen-Therapie10,11,12.
Durch eine Literaturstudie, wir fanden, dass die beteiligten Studien in zwei Kategorien, basierend auf der Analyse von Materialien unterteilt werden können: Tiermodelle wie eine Ratte, eine Maus oder ein Kaninchen; und menschliche Modelle. Im Hinblick auf das Tiermodell, derzeit gibt es zwei beliebte Techniken führen zu generieren: chemische Induktion von Verletzungen oder mechanische Überlastung des Modells. Allerdings war jedes Tiermodell begrenzt, bei der Reproduktion der komplexe menschliche sehnenerkrankung Pathologie13,14.
Die meisten Zeitungen mit humanen Proben wurden histologisch untersucht oder die in-vitro- Experiment basiert auf einer gesunden menschlichen Tenocyte statt einer degenerativen Tenocyte15,16,17,18 , 19 , 20 , 21. nur ein paar Zeitungen berichteten, dass sie einen menschlichen degenerativen Tenocyte verwendet, aber sie nicht im Detail das Protokoll verwendet beschreiben, um die degenerativen Tenocyte aus der menschlichen22,23. In diesem Zusammenhang ist anzumerken, dass erfolgreiche Ergebnisse aus dem Tiermodell oder das gesunde Gewebe/Tenocyte nicht unbedingt voraussagen können, menschliche Wirksamkeit oder wirksame Dosierung weil Sehne Degeneration ein komplizierter Prozess ist und die Pathogenese ist noch nicht vollständig verstanden.
Gemeinsam, ist es notwendig, das standard-Protokoll für den Erhalt der degenerativen Tenocyte aus menschlichem Gewebe ohne Nebenwirkungen für den Spender zu beschreiben. Dieser Artikel beschreibt ein Protokoll darüber, wie die menschlichen degenerativen Tenocyte zu erwerben. Um das Protokoll zu überprüfen, wurden die geernteten Gewebe histologisch untersucht. Dann wurde die kultivierten Zellen als degenerative Tenocyte bestätigt, mit Immunocytochemistry (ICC), eine quantitative Real-Time-Polymerase-Kettenreaktion (qRT-PCR) und eine Rentabilität-Assay.

<table><tbody><tr><td>Skalpell</td><td>Kisanbio</td><td>KS-Q0306-15</td><td>Nr. 15</td></tr><tr><td>Mini-Klinge</td><td>Biber</td><td>374769</td><td></td></tr><tr><td>Dulbecco's modifiziertes Eagle's Medium (DMEM)</td><td>Gibco</td><td>11995065</td><td></td></tr><tr><td>PBS</td><td>Gibco</td><td>14190250</td><td></td></tr><tr><td>fötales Rinderserum (FBS)</td><td>Gibco</td><td>16000044</td><td></td></tr><tr><td>50 mM Ascorbinsäure-2-phosphat</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>A5960</td><td></td></tr><tr><td>Antibiotisch-Antimykotische Lösung</td><td>Gibco</td><td>15240062</td><td></td></tr><tr><td>4% Formaldehyd</td><td>Biolösung</td><td>BP031</td><td></td></tr><tr><td>Triton X-100&nbsp;</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>X100-100ml</td><td></td></tr><tr><td>BSA</td><td>Rdtech</td><td>C0082</td><td></td></tr><tr><td>TWEEN 20</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>P9416-100ml</td><td></td></tr><tr><td>MKX (C-5)</td><td>Santa Cruz Biotechnologie</td><td>sc-515878</td><td></td></tr><tr><td>Tenomodulin (N-14)</td><td>Santa Cruz Biotechnologie</td><td>sc-49325</td><td></td></tr><tr><td>Fluoreszenz-Eindeckmedium</td><td>DAKO</td><td>S3023</td><td></td></tr><tr><td>DAPI (4',6-Diamidino-2-phenylindole, Dihydrochlorid)</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>D1306</td><td></td></tr><tr><td>WST-1</td><td>Dojindo Molecular Technologies</td><td>CK04</td><td></td></tr><tr><td>BrdU Cell Proliferation Assay Kit</td><td>Cell Signaling Technology</td><td>#6813</td><td></td></tr><tr><td>TRIzol Reagenz</td><td>Invitrogen</td><td>15596018</td><td></td></tr><tr><td>iScript cDNA Synthesekit&nbsp;</td><td>Bio-Rad</td><td>170-8891</td><td></td></tr><tr><td>TaqMan Genexpression Master Mix</td><td>Angewandte Biosysteme</td><td>4369016</td><td></td></tr><tr><td>GAPDH</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>Hs02786624_g1</td><td></td></tr><tr><td>COL3A1</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>Hs00943809_m1</td><td></td></tr><tr><td>ACTA2</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>Hs00426835_g1</td><td></td></tr><tr><td>TAC1</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td></td><td></td>Hs00243225_m1</tr><tr><td>TACR1</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>Hs00185530_m1</td><td></td></tr><tr><td>PTGS2</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>Hs00153133_m1</td><td></td></tr><tr><td>ACTB</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>Hs99999903_m1</td><td></td></tr><tr><td>Zellsiebe (100 & Mikro; m)&nbsp;</td><td>Corning</td><td>352360</td><td></td></tr><tr><td>100-mm-Kulturschale</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>8188207</td><td></td></tr><tr><td>8-Well-Kammer-Objektträger</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>154534</td><td></td></tr><tr><td>96-Well-Mikrotiterplatten aus klarem Polystyrol mit flachem Boden TC-behandelte Mikrotiterplatten</td><td>Corning</td><td>3596</td><td></td></tr><tr><td>Nikon Eclipse 50i Mikroskop&nbsp;</td><td>Nikon</td><td></td><td></td></tr><tr><td>VERSA max Mikroplatten-Lesegerät&nbsp;</td><td>Molecular Devices</td><td></td><td></td></tr><tr><td>CFX96 Real-Time PCR Nachweissystem</td><td>Bio-Rad</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Formalinlösung, neutral gepuffert, 10%</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>HT501128</td><td></td></tr><tr><td>Paraffine</td><td>Leica Biosystems</td><td>3801340</td><td></td></tr><tr><td>Ethanol</td><td>JUNSEI CHEMICAL</td><td>90303-2185</td><td></td></tr><tr><td>Hämatoxylin</td><td>DAKO</td><td>CS70030-2</td><td></td></tr><tr><td>Eosin</td><td>DAKO</td><td>CS70130-2</td><td></td></tr><tr><td>Alcian blue</td><td>DAKO</td><td>AR16011-2</td><td></td></tr><tr><td>Zitronensäure</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>251275</td><td></td></tr><tr><td>Xylol</td><td>JUNSEI CHEMICAL</td><td>25165-0430</td><td></td></tr><tr><td>Endogene Peroxidasen</td><td>DAKO</td><td>S200380-2</td><td></td></tr><tr><td>Kanada Balsam</td><td>JUNSEI CHEMICAL</td><td>23255-1210</td><td></td></tr><tr><td>Mikrotom-Klinge</td><td>FEATHER</td><td>A35</td><td></td></tr><tr><td>Diaglas</td><td>SUPERIOR</td><td>1000612</td><td></td></tr><tr><td>Deckglas</td><td>Marienfeld-Superior</td><td>101050</td><td></td></tr><tr><td>VEGF</td><td>Santa cruz Biotechnologie</td><td>sc-7269</td><td></td></tr><tr><td>SPSS Software</td><td>IBM</td><td></td><td>Ver. 18.0</td></tr><tr><td>Mehrzweckzentrifuge</td><td>LABOGENE</td><td>1248R</td><td></td></tr></tbody></table>

ein protokoll der degenerativen tenocyte von menschen zu erwerben

A Protocol to Acquire the Degenerative Tenocyte from Humans

Sehnenerkrankung, eine schmerzhafte Erkrankung, die in Reaktion auf Degeneration der Sehne, entwickelt ist auf dem Vormarsch in der entwickelten Welt aufgrund steigender körperlicher Aktivität und längere Lebenserwartung. Trotz seiner zunehmenden Verbreitung die zugrunde liegende Pathogenese ist noch unklar, und die Behandlung ist in der Regel symptomatisch. Vor kurzem wurden zahlreiche therapeutische Optionen, einschließlich Wachstumsfaktoren, Stammzellen und Gentherapie, untersucht, in der Hoffnung auf Verbesserung der heilenden Potenz der degenerativen Sehne. Die meisten dieser Studien wurden jedoch nur auf Tiermodellen oder gesunde menschliche Tenocytes durchgeführt. Obwohl einige Studien mit pathologischen Tenocytes nach bestem Wissen und gewissen gibt es derzeit kein Protokoll beschreibt, wie menschlichen degenerativen Tenocytes zu erhalten. Das Ziel dieser Studie ist es, ein Standardprotokoll für den Erwerb der menschlichen degenerativen Tenocytes beschreiben. Zunächst war die Sehne Gewebe während der Operation eines Patienten mit seitlichen Epicondylitis geerntet. Dann wurden die Beinstrecker Carpi Radialis Brevis Sehne entsprechend zu strukturellen Veränderungen, die zum Zeitpunkt der Operation beobachtet Biopsie Proben entnommen. Aller dem geernteten sehnen erschien stumpf, grau, brüchig, und ödematös, was sie visuell unterscheidbar von den gesunden machte. Tenocytes wurden kultiviert und für Experimente verwendet. Unterdessen wurden die Hälfte der geernteten Gewebe histologisch untersucht, und es zeigte sich, dass sie die gleichen Hauptmerkmale der sehnenerkrankung (Angiofibroblastic Dysplasie oder Hyperplasie) geteilt. Eine Sekundäranalyse von Immunocytochemistry bestätigt, dass die kultivierten Zellen Tenocytes mit der Mehrheit der Zellen mit positiven Flecken für Mohawk und Tenomodulin Proteine. Die Eigenschaften der degenerativen Natur des Tenocytes wurden dann durch einen Vergleich der Zellen mit dem gesund-Steuerelement mit einer Verbreitung Assay oder qRT-PCR bestimmt. Die degenerativen Tenocyte angezeigt eine höhere Vermehrungsrate und ähnliche Gen Expressionsmuster von sehnenerkrankung, die vorherigen Berichte abgestimmt. Alles in allem könnte dieses neue Protokoll ein nützliches Werkzeug für zukünftige Studien der sehnenerkrankung bieten.

Histologische Analysen ergaben, dass das geerntete Gewebe von laterale Epicondylitis die Merkmale einer Tendinopathic Sehne hatte. H &amp; E Abschnitt sehnenerkrankung degenerative Sehne offenbart ein unorganisiert Kollagen-Bündel mit einem Verlust der Polarität und fine gerade, stark verpackt parallel Faser Strukturen. Histologische Zeichen der Degeneration wie höhere zellularität und vergrößerte Kerne ohne die typischen Spindel Form suggestive waren Proben üblich. Darüber hinaus Kollage...

In-vitro- Verwendung von degenerativen Tenocytes ist wichtig, wenn die Wirksamkeit der neuartigen Behandlung auf sehnenerkrankung untersucht. Jedoch verwenden die meisten Studien nur das Tiermodell oder eine gesunde Tenocyte. Wir schlagen das folgende Protokoll um menschlichen degenerativen Tenocytes während der Operation zu isolieren.

Ein Protokoll der degenerativen Tenocyte von Menschen zu erwerben

Tendinopathy, a painful condition that develops in response to tendon degeneration, is on the rise in the developed world due to increasing physical ...

Diese Methode kann helfen, wichtige Fragen zur Biologie der degenerativen Tenozyten beim Menschen zu beantworten, da nur wenige Studien die Isolierung und Kultur der degenerativen Tenozyten beim Menschen im Detail beschrieben haben. Der Hauptvorteil dieser Technik besteht darin, dass wir menschliche degenerative Tenozyten ohne zusätzliche Verletzungen des Patienten gewinnen können, da das degenerative Gewebe während der Standard-Epicondylitis-Operation erworben wird. Die Prozedur wird von Dr. Soo-Hong Han, Minjung Baek und Hyung Kyung Kim aus meiner dritten Stufe demonstriert.Um eine degenerative Tendocyten-Gewebeprobe zu entnehmen, verwenden Sie ein chirurgisches Skalpell mit der Nummer 15, um einen drei bis fünf Zentimeter langen Hautschnitt direkt anterior medial des Epicondylus lateralis und proximal auf Höhe des Gelenks vorzunehmen, um den lateralen Ellenbogen freizulegen und den Extensor carpi radialis longus visuell in der Extensoraponeurose-Schnittstelle zu lokalisieren. Mit dem Skalpell einen zwei bis drei Millimeter tiefen Spaltschnitt zwischen dem Extensor carpi radialis longus und der Extensoraponeurose an der Grenzfläche vornehmen. Nach der vorderen Retraktion des Exte

a-protocol-to-acquire-the-degenerative-tenocyte-from-humans

Research

Forschung

JoVE Journal

Medicine

Medizin

Hier präsentieren wir ein Protokoll für die direkte Umwandlung von murinen embryonalen Fibroblasten in voll funktionsfähige und stabile Trophoblasten-Stammzellen durch zehntägige Überexpression von Tfap2c, Gata3, Eomes und Ets2.

Protokoll für die direkte Umwandlung von murinen embryonalen Fibroblasten in Trophoblast Stammzellen

Dieses Manuskript beschreibt die Herstellung von mikrogewebetechnischen neuronalen Netzen: dreidimensionale mikrometergroße Konstrukte, die aus lang ausgerichteten axonalen Traktaten bestehen, die aggregierte neuronale Populationen umfassen, die in einem tubulären Hydrogel umhüllt sind. Diese lebenden Gerüste können als funktionelle Relais dienen, um neuronale Schaltkreise zu rekonstruieren oder zu modulieren oder als biofidelische Testbetten, die grau-weiße Materie Neuroanatomie nachahmen.

Anatomisch inspirierte dreidimensionale Mikro-Gewebe-konstruierte Neuronale Netze für Nervensystem-Rekonstruktion, Modulation und Modellierung

Wir stellen Ihnen hier ein Protokoll für die Differenzierung der menschlichen induzierten pluripotenten Stammzellen in jeder Somiten Derivat (Myotom, Sklerotom Dermatome und Syndetome) in chemisch definierten Bedingungen, die hat Anwendungen in zukünftigen Krankheit Modellierung und zellbasierte Therapien in der orthopädischen Chirurgie.

In vitro-Generation der Somiten Derivate aus menschlichen induzierten Zellen pluripotenten Stammzellen

Wir präsentieren Techniken zur Isolierung, Kultivierung, Charakterisierung und Differenzierung menschlicher Primärmuskelvorläuferzellen (hMPCs), die aus Skelettmuskelbiopsiegewebe gewonnen werden.  hMPCs, die durch diese Methoden gewonnen und charakterisiert werden, können anschließend verwendet werden, um Forschungsfragen im Zusammenhang mit menschlicher Myogenese und Skelettmuskelregeneration zu behandeln.

Isolation, Kultur, Charakterisierung und Differenzierung menschlicher Muskelprogenitorzellen aus dem Skelettmuskelbiopsieverfahren

Ein dreidimensionales uniaxiales mechanisches Stimulations-Bioreaktorsystem ist ein idealer Bioreaktor für tenogen-spezifische Differenzierung von Sehnenstammzellen und Neotendonbildung.

Anwendung eines dreidimensionalen uniaxialen mechanischen Stimulations-Bioreaktorsystems zur Induzieren tenogener Differenzierung von tendonabgeleiteten Stammzellen

Dieses Protokoll beschreibt die Umwandlung von Hautfibroblasten in Myoblasten und deren Differenzierung in Myotuben. Die Zelllinien stammen von Patienten mit neuromuskulären Störungen und können zur Untersuchung pathologischer Mechanismen und zur Erprobung therapeutischer Strategien verwendet werden.

Direkte Umprogrammierung menschlicher Fibroblasten in Myoblasten zur Untersuchung von Therapien für neuromuskuläre Störungen

Hier beschreiben wir ein Protokoll für die Transplantation und Verfolgung markierter Nervenzellen in menschliche Hirnorganoide.

Ein menschliches zerebrales Organoidmodell der neuronalen Zelltransplantation

Dieser Artikel beschreibt ein Verfahren zur Herstellung von iTenozyten durch die Erzeugung von iPSC-abgeleiteten mesenchymalen Stromazellen mit kombinierter Überexpression von Sklerose unter Verwendung eines lentiviralen Vektors und uniaxialer Streckung über einen 2D-Bioreaktor.

Generierung von induzierten pluripotenten Stammzell-abgeleiteten iTenozyten durch kombinierte Sklera-Überexpression und uniaxiale 2D-Spannung

Hier stellen wir ein assembloides Modellsystem vor, um die zelluläre Wechselwirkung zwischen dem tragenden Sehnenkerngewebe und einem extrinsischen Kompartiment mit Zellpopulationen nachzuahmen, die durch Krankheit und Verletzung aktiviert werden. Als wichtigen Anwendungsfall demonstrieren wir, wie das System eingesetzt werden kann, um die krankheitsrelevante Aktivierung von extrinsischen Endothelzellen zu untersuchen.

Entwicklung von Sehnen-Assembloiden zur Untersuchung zellulärer Wechselwirkungen bei Krankheit und Reparatur

Darin demonstrieren wir ein dreistufiges Organoidmodell (zweidimensionale [2D]-Expansion, 2D-Stimulation, dreidimensionale [3D]-Reifung), das ein vielversprechendes Werkzeug für die Sehnengrundlagenforschung und eine potenziell gerüstfreie Methode für das Tendon Tissue Engineering bietet.

Demonstration einer selbstorganisierten Zellblattkultur und manuelle Generierung eines 3D-Sehnen-/Ligamenten-ähnlichen Organoids unter Verwendung humaner dermaler Fibroblasten

Wir präsentieren ein optimiertes Protokoll für die Verarbeitung ganzer menschlicher Nieren zur Isolierung und Kultivierung primärer proximaler Tubulus-Epithelzellen und die Anwendung dieser Zellen in einer dreidimensionalen, mikrofluidischen, mikrophysiologischen Plattform zur Rekapitulation des proximalen Nierentubuli.

Isolierung primärer humaner proximaler Tubula-Epithelzellen und ihre Verwendung bei der Erstellung eines mikrophysiologischen Modells des proximalen Tubulus der Niere

Lernen Sie die Isolierung degenerativer menschlicher Tenozyten während der Epikondylitis-Chirurgie. Diese Methode ermöglicht die Gewinnung von Gewebe ohne zusätzliche Patientenverletzung für die Tendinopathie-Forschung.

Ein Protokoll der degenerativen Tenocyte von Menschen zu erwerben

Weitere Videos entdecken