Hyaluronsäure basierte Hydrogele für 3-dimensionale Kultur des Patienten abgeleitet Glioblastom-Zellen

Diese Methode kann helfen, wichtige Fragen zu Glioblastom-Tumoren zu beantworten und zu klären, wie die extrazelluläre Matrix die Therapieresistenz erleichtern kann. Diese Technik ermöglicht den modularen Aufbau anpassungsfähiger 3D-Zellkulturplattformen, die zur Kultivierung von Glioblastomzellen von Patienten in einer Umgebung verwendet werden können, die dem nativen Gehirn besser entspricht. Setzen Sie zunächst saubere, trockene Silikonkautschukformen in jede Vertiefung einer nicht mit Gewebekultur behandelten 12-Well-Platte ein und kleben Sie die Formen mit dem sauberen, stumpfen Ende einer Pipettenspitze an den Boden der Platte.

Nachdem Sie die Dichtung zwischen den Formen und den Vertiefungsböden überprüft haben, sammeln Sie die dissoziierten Gliomsphären aus einer Glioblastom-Zellkultur durch Zentrifugation und suspendieren Sie das Pellet wieder in einem Milliliter Zelldissoziationsenzym. Nach fünf Minuten bei Raumtemperatur wird das Röhrchen durch sanftes Klopfen gerührt und die enzymatische Reaktion mit vier Millilitern des vollständigen Mediums gestoppt. Zentrifugieren Sie die Zellen erneut und suspendieren Sie das Pellet erneut in einem Milliliter frischem Medium, bevor Sie die Zellen durch einen 70-Mikrometer-Filter abseihen.