Name: Eine High-Throughput-Plattform für das Screening von Salmonella spp. /Shigella spp. (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-11-07T14:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 55 s
Description: Erfahren Sie eine Hochdurchsatz-Plattform zum Screening von Salmonella und Shigella mittels Echtzeit-PCR und geführter Kultur. Diese Methode bietet hohe Spezifität und Sensitivität für die schnelle Pathogenerkennung.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

Diese Arbeit wurde von der Wissenschaft und Technologie-Programm von Zhuhai, China (Grant Nummer 20171009E030064), die Wissenschaft und Technologie-Programm von Guangdong, China (Grant Nummer 2015A020211004) und Wissenschaft und Technologie-Programm von General Administration unterstützt. der Quality Supervision, Inspektion und Quarantäne der Volksrepublik China (Grant Nummer 2016IK302, 2017IK224).

Das Protokoll folgt die Richtlinien der Humanforschung Ethikkommission von Zhuhai International Travel Healthcare Center. Bitte verwenden Sie sterile Standardbetrieb während des Experiments.
(1) Kultur Medienkomposition und Vorbereitung
<ol><li>Nährbouillon vorbereiten: Auflösen, 1 % Pepton, 0,3 % Rindfleisch-Extrakt, Natriumchlorid 0,5 %, 0,1 % Glukose in H2O, justieren pH 7,5 und Autoklaven in 121 ° C für 15 Minuten.</li>
	<li>Bereiten Sie Selenit Cystin Medium: auflösen 0,5 % Pepton, Wasserstoff Natriumselenit 0,4 % 0,4 % Laktose, 1 % Na2HCO30,001 % L-Cystin in H2O, pH-Wert auf 7,0 einstellen und für 5 min kochen.</li>
	<li>Vorbereiten der Xylose, Lysin, Deoxycholate Nährbodenplatte (XLD): auflösen 0,3 % Hefeextrakt, 0,5 % L-Lysin, 0.375 % Xylose, 0,75 % Laktose, 0,75 % Saccharose, 0,5 % Natrium-Chlorid, 0,008 % Phenol rot, 0,68 % Natriumthiosulfat, 0,08 % Ammonium ferric Citrat, Natrium 0,25 % Deoxycholate, 1,5 % Agar in H2O, und pH auf 7,4 einstellen. Dann für 5 min kochen Sie und gießen Sie sie in 90 mm Platten.</li>
	<li>Die Salmonellen chromogenen Nährbodenplatte Vorbereitung: Auflösen von 1,5 % Agar, 0,7 % Pepton und Hefe-Extrakt, 1,29 % selektive Reagenzien in H2O. Dann für 5 min kochen Sie und gießen Sie sie in 90 mm Platten.</li>
	<li>Vorbereiten die Nähragar Platte: auflösen, 1 % Pepton, 0,3 % Rindfleisch-Extrakt, 0,5 % Natrium-Chlorid, 1,5 % Agar in H2O, und passen Sie pH bis 7.3. Dann Autoklav in 121 ° C für 15 min und gießen Sie sie in 90 mm Platten.</li>
	<li>Vorbereiten die MacConkey-Agar (MAC)-Platte: auflösen 2 % Pepton, 1 % Laktose, Natriumchlorid 0,5 %, 0,5 % OX Galle Salz, 0,0025 % Neutral rot, 1,5 % Agar, 0,0001 % Kristallviolett in H2O, und pH-Wert auf 7,2 einstellen. Dann Autoklav in 115 ° C für 20 min und gießen Sie sie in 90 mm Platten.</li>
</ol>(2) Real-Time PCR
<ol><li>Entnahme von Proben<ol>
<li>Legen Sie eine anal Tupfer in der Patientin Anus 3-5 cm tief, und drehen Sie ihn um 360°.</li>
		<li>Setzen Sie den analen Tupfer in eine sterile Sammelröhrchen. Mark Probe-ID.</li>
		<li>Senden Sie die Probe so schnell wie möglich ins Labor. Hinweis: Proben konnten bei 4 ° C nicht mehr als 24 Stunden gelagert werden.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Voranreicherung<ol>
<li>3 mL Nährstoff Bouillon in jeder Probe in dem Sammelrohr hinzugeben.</li>
		<li>Bei 36 ° C für 6 Stunden in einem Inkubator inkubieren.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Probe mischen (optional)<ol>
<li>Sammeln Sie 100 µL jeder Voranreicherung Kultur und ein 1,5 mL-Tube untermischen Sie 8-10 Proben 1 Probe, gibt es mehr als 10 Proben.</li>
		<li>Markieren Sie richtig.</li>
	</ol>
</li>
	<li>DNA-Extraktion<ol>
<li>Zentrifugieren der Voranreicherung Kultur 800 X g für 2 min erlauben große Partikel, sich niederzulassen, und Übertragung der Überstand auf eine neue Röhre und Zentrifuge bei 12.000 x g für 5 min. verwerfen des Überstands durch Absaugen.</li>
		<li>Fügen Sie 100 µL DNA-Extraktion-Lösung (0,01 M pH 8.0 Tris-EDTA, 0,01 % Nonidet P 40 (NP40)) zum Pellet. 1 min. kräftig vortexen.</li>
		<li>Kochen Sie bei 100 ° C für 5 min auf ein Trockenbad.</li>
		<li>Zentrifuge bei 12.000 x g für 5 min. sammeln des Überstands mit eine neue Röhre, die die Vorlage für die nachfolgenden Echtzeit-PCR-Analyse werden.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Real-Time PCR<ol>
<li>Richten Sie das Reaktionsgemisch als folgen: für jede Probe hinzufügen 12,5 µL 2 x Reaktionsgemisch, 0,4 µM jeweils Fibel, 0,2 µM pro Sonde (Sequenzen in Tabelle 1)27, 5 µL der Vorlage in Schritt 2.4.4 vorbereitet und DdH2O um insgesamt bis zu 25 µL hinzuzufügen Volumen.</li>
		<li>Der Radsport Setupprogramm wie folgt: 95 ° C für 3 min, gefolgt von 40 Zyklen von 95 ° C für 15 s, 55 ° C für 30 s, 72 ° C für 34 S. sammeln fluoreszierende Signale aus 6-Carboxy-Fluorescein (FAM) und Hexachlorofluorescein (HEX) Kanäle bei der Dehnung Schritt (72 ° C) automatisch durch die fluoreszierenden Echtzeit-PCR-Maschine.</li>
		<li>Führen Sie Real-Time PCR auf einer fluoreszierenden Echtzeit-PCR-Maschine gemäß den Anweisungen des Gerätes.</li>
		<li>Gehen Sie direkt zu Schritt 4 und negative Berichte, wenn negative Ergebnisse, auf die FAM/HEX-Kanäle, was bedeutet auftreten, dass Proben sind negativ für Salmonella SPP /Shigella spp.</li>
		<li>Gehen Sie zu Schritt 3.1 oder 3.2, wenn positive Ergebnisse auftreten auf die HEX und/oder FAM Kanäle, was bedeutet, dass die Probe bzw. für Salmonella SPP und/oder Shigella spp., positiv sein kann. Hinweis: Wenn Probe mischen im Schritt 2.3 durchgeführt wurde, sollte Real-Time PCR auf einzelne Proben, die einerseits positive gebildet durchgeführt werden, die echte positive Probe auf dem Bildschirm.</li>
	</ol>
</li>
</ol>(3) geführte Kultur
<ol><li>
Salmonella spp. PCR positiven Probe<ol>
<li>Selektive Kultur in medium<ol>
<li>Fügen Sie 100 µL Voranreicherung Kultur in 5 mL Medium Selenit Cystin in einem Reagenzglas. Bei 36 ° C für 18-24 h in einem Inkubator inkubieren.</li>
		</ol>
</li>
		<li>Trennung von Kultur auf Platte<ol>
<li>Eine Schleife der Kultur mit einer Mikro-Schleife zu sammeln und auf XLD Teller oder Salmonellen chromogenen Nährbodenplatte verteilt. Bei 36 ° C für 18-24 h in einem Inkubator inkubieren.</li>
		</ol>
</li>
		<li>Biochemische Identifizierung<ol>
<li>Wählen Sie verdächtige Kolonie auf XLD-Teller (rosa Kolonie mit/ohne dunkle Herz, dunkle Kolonie, gelbe Kolonie mit/ohne dunkle Herz) oder Salmonellen chromogenen Nährbodenplatte (lila oder Prunosus Kolonie, glatt und rund) (Abbildung 2).</li>
			<li>Thema verdächtige Kolonie für biochemische Identifikation auf automatisierte mikrobielle Identifikations-System gemäß den Anweisungen des Gerätes.</li>
		</ol>
</li>
		<li>Serologischen Charakterisierung<ol>
<li>O Antigen Charakterisierung<ol>
<li>Geben Sie einen Tropfen des O Antigen polyvalent Sera in eine saubere Folie.</li>
				<li>Eine Schleife der Kolonie mit einem Mikro-Schleife und Schleifen im Sera zu sammeln.</li>
				<li>Gehen Sie zu 3.1.4.1.4 Schritt, wenn es wie fließenden Sand aussieht, was bedeutet, dass die Kolonie reaktiv auf die Sera (Abbildung 3). Fahren Sie andernfalls mit Schritt 3.1.4.1.5.</li>
				<li>Verwenden Sie O Antigen monovalente Seren, wiederholen Sie die Schritte 3.1.4.1.1, 3.1.4.1.3 bis das O Antigen gekennzeichnet ist.</li>
				<li>Verwenden Sie Vi Sera 3.1.4.1.1, 3.1.4.1.3 Schritte wiederholen. Diese Vi Sera reaktive Kolonien in einem Rohr zu sammeln und kochen bei 100 ° C für 5 min in ein Trockenbad. Zentrifuge bei 12.000 x g für 5 min. sammeln die Pellets und wiederholen Sie die Schritte 3.1.4.1.1, 3.1.4.1.4, bis O-spezifisches Antigen gekennzeichnet ist.</li>
			</ol>
</li>
			<li>H-Antigen-Charakterisierung<ol>
<li>Geben Sie einen Tropfen des H Antigen polyvalent Sera in eine saubere Folie.</li>
				<li>Eine Schleife der Kolonie mit einem Mikro-Schleife und Schleifen im Sera zu sammeln.</li>
				<li>Gehen Sie zu 3.1.4.2.4 Schritt, wenn es wie fließenden Sand aussieht, was bedeutet, dass die Kolonie der Sera reaktiv ist.</li>
				<li>Verwenden Sie H Antigen monovalente Seren, wiederholen Sie die Schritte 3.1.4.2.1, 3.1.4.2.3 bis H-spezifisches Antigen gekennzeichnet ist. Hinweis: Manchmal kann Serum Induktion benötigt, um die zweite Phase H-Antigen zu charakterisieren. Wenn ja, sollten die folgenden optionalen Schritte durchgeführt werden.</li>
				<li>(Optional) Geben Sie einen Tropfen des spezifischen H Antigen Sera auf Nähragar Teller. Warten Sie, bis alle Seren absorbiert werden.</li>
				<li>(Optional) Sammeln Sie eine Schleife der Kolonie mit einem Mikro-Schleife und die Ausbreitung auf den Teller, wo bestimmte H Antigen Sera absorbiert werden. Bei 36 ° C für 18-24 h in einem Inkubator inkubieren.</li>
				<li>(Optional) Verwenden Sie H Antigen monovalente Seren, wiederholen Sie die Schritte 3.1.4.2.1, 3.1.4.2.3 bis zweite Phase H Antigen gekennzeichnet ist.</li>
				<li>Gehen Sie zu Schritt 4.</li>
			</ol>
</li>
		</ol>
</li>
	</ol>
</li>
	<li>
Shigella spp. PCR positiven Probe<ol>
<li>Trennung von Kultur auf Platte<ol>
<li>Eine Schleife der Voranreicherung Kultur mit einer Mikro-Schleife zu sammeln und auf einem XLD Teller oder MAC Platte verteilt. Bei 36 ° C für 18-24 h in einem Inkubator inkubieren.</li>
		</ol>
</li>
		<li>Biochemische Identifizierung<ol>
<li>Sammeln Sie verdächtige Kolonie auf XLD Platte (glatt, rund, transparent und rote Kolonie) oder MAC Platte (glatt, rund, transparent und farblos Kolonie mit 2-3 mm im Durchmesser; Shigella Sonnei kann größer sein und schalten Licht rosa wie die Dehnung der Inkubationszeit) (Abbildung 4).</li>
			<li>Thema verdächtige Kolonie für biochemische Identifikation auf automatisierte mikrobielle Identifikations-System gemäß den Anweisungen des Gerätes.</li>
		</ol>
</li>
		<li>Serologischen Charakterisierung<ol>
<li>Geben Sie einen Tropfen des Shigella spp. polyvalent Sera in eine saubere Folie.</li>
			<li>Eine Schleife der Kolonie mit einem Mikro-Schleife und Schleifen im Sera zu sammeln.</li>
			<li>Gehe zu 3.2.3.4 Schritt, wenn es wie fließenden Sand aussieht, was bedeutet, dass die Kolonie der Sera reaktiv ist.</li>
			<li>Verwenden Sie Shigella spp. monovalente Seren 3.2.3.1 zu 3.2.3.3 Schritte wiederholen, bis bestimmte Shigella spp. geprägt ist.</li>
			<li>Gehen Sie zu Schritt 4.</li>
		</ol>
</li>
	</ol>
</li>
</ol>(4) Bericht
<ol><li>Positive oder negative Berichte nach den oben genannten Ergebnissen.</li>
</ol>

<ol><li>Roy, S. L., Scallan, E., Beach, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+rate+of+acute+gastrointestinal+illness+in+developed+countries%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Water+and+Health%22%5BJournal%5D)">The rate of acute gastrointestinal illness in developed countries.</a> Journal of Water and Health. 4, Suppl 2 31-69 (2006).</li>
<li>Wilking, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Acute+gastrointestinal+illness+in+adults+in+Germany%3A+a+population-based+telephone+survey%5BTitle%5D)+AND+%22Epidemiology+and+Infection%22%5BJournal%5D)">Acute gastrointestinal illness in adults in Germany: a population-based telephone survey.</a> Epidemiology and Infection. 141 (11), 2365-2375 (2013).</li>
<li>Friesema, I. H. M., Lugnér, A. K., van Duynhoven, Y. T. H. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Costs+of+gastroenteritis+in+the+Netherlands%2C+with+special+attention+for+severe+cases%5BTitle%5D)+AND+%22European+Journal+of+Clinical+Microbiology+%26+Infectious+Diseases%22%5BJournal%5D)">Costs of gastroenteritis in the Netherlands, with special attention for severe cases.</a> European Journal of Clinical Microbiology & Infectious Diseases. 31 (8), 1895-1900 (2012).</li>
<li>Henson, S. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Estimation+of+the+costs+of+acute+gastrointestinal+illness+in+British+Columbia%2C+Canada%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Food+Microbiology%22%5BJournal%5D)">Estimation of the costs of acute gastrointestinal illness in British Columbia, Canada.</a> International Journal of Food Microbiology. 127 (1-2), 43-52 (2008).</li>
<li>Okhuysen, P. C., Jiang, Z. D., Carlin, L., Forbes, C., DuPont, H. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Post-diarrhea+chronic+intestinal+symptoms+and+irritable+bowel+syndrome+in+North+American+travelers+to+Mexico%5BTitle%5D)+AND+%22The+American+Journal+of+Gastroenterology%22%5BJournal%5D)">Post-diarrhea chronic intestinal symptoms and irritable bowel syndrome in North American travelers to Mexico.</a> The American Journal of Gastroenterology. 99 (9), 1774-1778 (2004).</li>
<li>Wongboot, W., Okada, K., Chantaroj, S., Kamjumphol, W., Hamada, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Simultaneous+detection+and+quantification+of+19+diarrhea-related+pathogens+with+a+quantitative+real-time+PCR+panel+assay%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Microbiological+Methods%22%5BJournal%5D)">Simultaneous detection and quantification of 19 diarrhea-related pathogens with a quantitative real-time PCR panel assay.</a> Journal of Microbiological Methods. 151, 76-82 (2018).</li>
<li>Van Lint, P., De Witte, E., Ursi, J. P., Van Herendael, B., Van Schaeren, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+screening+algorithm+for+diagnosing+bacterial+gastroenteritis+by+real-time+PCR+in+combination+with+guided+culture%5BTitle%5D)+AND+%22Diagnostic+Microbiology+and+Infectious+Disease%22%5BJournal%5D)">A screening algorithm for diagnosing bacterial gastroenteritis by real-time PCR in combination with guided culture.</a> Diagnostic Microbiology and Infectious Disease. 85 (2), 255-259 (2016).</li>
<li>Liu, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Use+of+quantitative+molecular+diagnostic+methods+to+identify+causes+of+diarrhoea+in+children%3A+a+reanalysis+of+the+GEMS+case-control+study%5BTitle%5D)+AND+%22Lancet%22%5BJournal%5D)">Use of quantitative molecular diagnostic methods to identify causes of diarrhoea in children: a reanalysis of the GEMS case-control study.</a> Lancet. 388 (10051), 1291-1301 (2016).</li>
<li>Wang, S. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Surveillance+of+shigellosis+by+real-time+PCR+suggests+underestimation+of+shigellosis+prevalence+by+culture-based+methods+in+a+population+of+rural+China%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Infection%22%5BJournal%5D)">Surveillance of shigellosis by real-time PCR suggests underestimation of shigellosis prevalence by culture-based methods in a population of rural China.</a> Journal of Infection. 61 (6), 471-475 (2010).</li>
<li>Wikswo, M. E., Hall, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Outbreaks+of+acute+gastroenteritis+transmitted+by+person-to-person+contact--United+States%2C+2009-2010%5BTitle%5D)+AND+%22MMWR+Surveillance+Summaries%22%5BJournal%5D)">Outbreaks of acute gastroenteritis transmitted by person-to-person contact--United States, 2009-2010.</a> MMWR Surveillance Summaries. 61 (9), 1-12 (2012).</li>
<li>Shen, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+12+Gastrointestinal+Pathogens+Spectrum+of+Acute+Infectious+Diarrhea+in+a+Sentinel+Hospital%2C+Shenzhen%2C+China%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Microbiology%22%5BJournal%5D)">The 12 Gastrointestinal Pathogens Spectrum of Acute Infectious Diarrhea in a Sentinel Hospital, Shenzhen, China.</a> Frontiers in Microbiology. 7, 1926(2016).</li>
<li>Tariq, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Molecular+profiling+of+antimicrobial+resistance+and+integron+association+of+multidrug-resistant+clinical+isolates+of+Shigella+species+from+Faisalabad%2C+Pakistan%5BTitle%5D)+AND+%22Canadian+Journal+of+Microbiology%22%5BJournal%5D)">Molecular profiling of antimicrobial resistance and integron association of multidrug-resistant clinical isolates of Shigella species from Faisalabad, Pakistan.</a> Canadian Journal of Microbiology. 58 (9), 1047-1054 (2012).</li>
<li>Ferrari, R. G., Panzenhagen, P. H. N., Conte-Junior, C. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Phenotypic+and+Genotypic+Eligible+Methods+for+Salmonella+Typhimurium+Source+Tracking%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Microbiology%22%5BJournal%5D)">Phenotypic and Genotypic Eligible Methods for Salmonella Typhimurium Source Tracking.</a> Frontiers in Microbiology. 8, 2587(2017).</li>
<li>Oliver, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+viable+but+nonculturable+state+in+bacteria%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Microbiology%22%5BJournal%5D)">The viable but nonculturable state in bacteria.</a> The Journal of Microbiology. 43, Spec No 93-100 (2005).</li>
<li>Rintala, A., Munukka, E., Weintraub, A., Ullberg, M., Eerola, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluation+of+a+multiplex+real-time+PCR+kit+Amplidiag%28R%29+Bacterial+GE+in+the+detection+of+bacterial+pathogens+from+stool+samples%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Microbiological+Methods%22%5BJournal%5D)">Evaluation of a multiplex real-time PCR kit Amplidiag(R) Bacterial GE in the detection of bacterial pathogens from stool samples.</a> Journal of Microbiological Methods. 128, 61-65 (2016).</li>
<li>Wohlwend, N., Tiermann, S., Risch, L., Risch, M., Bodmer, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluation+of+a+Multiplex+Real-Time+PCR+Assay+for+Detecting+Major+Bacterial+Enteric+Pathogens+in+Fecal+Specimens%3A+Intestinal+Inflammation+and+Bacterial+Load+Are+Correlated+in+Campylobacter+Infections%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Clinical+Microbiology%22%5BJournal%5D)">Evaluation of a Multiplex Real-Time PCR Assay for Detecting Major Bacterial Enteric Pathogens in Fecal Specimens: Intestinal Inflammation and Bacterial Load Are Correlated in Campylobacter Infections.</a> Journal of Clinical Microbiology. 54 (9), 2262-2266 (2016).</li>
<li>Van Lint, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluation+of+a+real-time+multiplex+PCR+for+the+simultaneous+detection+of+Campylobacter+jejuni%2C+Salmonella+spp.%2C+Shigella+spp.%2FEIEC%2C+and+Yersinia+enterocolitica+in+fecal+samples%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+Journal+of+Clinical+Microbiology+Infect+Dis%22%5BJournal%5D)">Evaluation of a real-time multiplex PCR for the simultaneous detection of Campylobacter jejuni, Salmonella spp., Shigella spp./EIEC, and Yersinia enterocolitica in fecal samples.</a> Eur Journal of Clinical Microbiology Infect Dis. 34 (3), 535-542 (2015).</li>
<li>Kamkamidze, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rapid+Identification+Of+The+Etiological+Factors+Causing+Diarrheal+Diseases%5BTitle%5D)+AND+%22Georgian+Medical+News%22%5BJournal%5D)">Rapid Identification Of The Etiological Factors Causing Diarrheal Diseases.</a> Georgian Medical News. (258), 89-92 (2016).</li>
<li>Li, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Establishment+and+Application+of+a+Visual+DNA+Microarray+for+the+Detection+of+Food-borne+Pathogens%5BTitle%5D)+AND+%22Analytical+Sciences%22%5BJournal%5D)">Establishment and Application of a Visual DNA Microarray for the Detection of Food-borne Pathogens.</a> Analytical Sciences. 32 (2), 215-218 (2016).</li>
<li>Zhuang, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Detection+of+Salmonella+spp.+by+a+loop-mediated+isothermal+amplification+%28LAMP%29+method+targeting+bcfD+gene%5BTitle%5D)+AND+%22Letters+in+Applied+Microbiology%22%5BJournal%5D)">Detection of Salmonella spp. by a loop-mediated isothermal amplification (LAMP) method targeting bcfD gene.</a> Letters in Applied Microbiology. 59 (6), 658-664 (2014).</li>
<li>Shi, X. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rapid+simultaneous+detection+of+Salmonella+and+Shigella+using+modified+molecular+beacons+and+real-time+PCR%5BTitle%5D)+AND+%22Zhonghua+Liu+Xing+Bing+Xue+Za+Zhi%22%5BJournal%5D)">Rapid simultaneous detection of Salmonella and Shigella using modified molecular beacons and real-time PCR.</a> Zhonghua Liu Xing Bing Xue Za Zhi. 27 (12), 1053-1056 (2006).</li>
<li>Mo, Q. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Preparation+of+a+96-microwell+plate+DNA+diagnostic+chip+for+detection+of+foodborne+bacteria+and+its+application+in+an+incident+of+food+poisoning%5BTitle%5D)+AND+%22Nan+Fang+Yi+Ke+Da+Xue+Xue+Bao%22%5BJournal%5D)">Preparation of a 96-microwell plate DNA diagnostic chip for detection of foodborne bacteria and its application in an incident of food poisoning.</a> Nan Fang Yi Ke Da Xue Xue Bao. 30 (3), 417-421 (2010).</li>
<li>Wang, H. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Probe-free+and+sensitive+detection+of+diarrhea-causing+pathogens+using+RT-PCR+combined+high+resolution+melting+analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Biologicals%22%5BJournal%5D)">Probe-free and sensitive detection of diarrhea-causing pathogens using RT-PCR combined high resolution melting analysis.</a> Biologicals. 44 (5), 360-366 (2016).</li>
<li>Sun, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rapid+simultaneous+screening+of+seven+clinically+important+enteric+pathogens+using+a+magnetic+bead+based+DNA+microarray%5BTitle%5D)+AND+%22World+Journal+of+Microbiology+and+Biotechnology%22%5BJournal%5D)">Rapid simultaneous screening of seven clinically important enteric pathogens using a magnetic bead based DNA microarray.</a> World Journal of Microbiology and Biotechnology. 27 (1), 163-169 (2011).</li>
<li>Qi, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Multiplex+PCR+assay+for+rapid+detection+of+five+important+pathogenic+vibrios%5BTitle%5D)+AND+%22Chinese+Journal+of+health+laboratory+technology%22%5BJournal%5D)">Multiplex PCR assay for rapid detection of five important pathogenic vibrios.</a> Chinese Journal of health laboratory technology. (24), 3497-3500 (2014).</li>
<li>Blanco, G., Diaz de Tuesta, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Culture-+and+molecular-based+detection+of+swine-adapted+Salmonella+shed+by+avian+scavengers%5BTitle%5D)+AND+%22Science+of+the+Total+Environment%22%5BJournal%5D)">Culture- and molecular-based detection of swine-adapted Salmonella shed by avian scavengers.</a> Science of the Total Environment. 634, 1513-1518 (2018).</li>
<li>Tang, X. J., Yang, Z., Chen, X. B., Tian, W. F., Tu, C. N., Wang, H. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Verification+and+large+scale+clinical+evaluation+of+a+national+standard+protocol+for+Salmonella.spp.%2FShigella.spp.+screening+using+real-time+PCR+combined+with+guided+culture%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Microbiological+Methods%22%5BJournal%5D)">Verification and large scale clinical evaluation of a national standard protocol for Salmonella.spp./Shigella.spp. screening using real-time PCR combined with guided culture.</a> Journal of Microbiological Methods. 145, 14-19 (2018).</li>
<li>Dekker, D. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Drinking+water+from+dug+wells+in+rural+ghana--salmonella+contamination%2C+environmental+factors%2C+and+genotypes%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Environmental+Research+and+Public+Health%22%5BJournal%5D)">Drinking water from dug wells in rural ghana--salmonella contamination, environmental factors, and genotypes.</a> International Journal of Environmental Research and Public Health. 12 (4), 3535-3546 (2015).</li>
<li>Gargano, J. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mortality+from+selected+diseases+that+can+be+transmitted+by+water+-+United+States%2C+2003-2009%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Water+and+Health%22%5BJournal%5D)">Mortality from selected diseases that can be transmitted by water - United States, 2003-2009.</a> Journal of Water and Health. 15 (3), 438-450 (2017).</li>
<li>Kumar, R., Surendran, P. K., Thampuran, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluation+of+culture%2C+ELISA+and+PCR+assays+for+the+detection+of+Salmonella+in+seafood%5BTitle%5D)+AND+%22Letters+in+Applied+Microbiology%22%5BJournal%5D)">Evaluation of culture, ELISA and PCR assays for the detection of Salmonella in seafood.</a> Letters in Applied Microbiology. 46 (2), 221-226 (2008).</li>
<li>Herrera-Leon, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Blind+comparison+of+traditional+serotyping+with+three+multiplex+PCRs+for+the+identification+of+Salmonella+serotypes%5BTitle%5D)+AND+%22Research+in+Microbiology%22%5BJournal%5D)">Blind comparison of traditional serotyping with three multiplex PCRs for the identification of Salmonella serotypes.</a> Research in Microbiology. 158 (2), 122-127 (2007).</li>
<li>Cunningham, S. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Three-hour+molecular+detection+of+Campylobacter%2C+Salmonella%2C+Yersinia%2C+and+Shigella+species+in+feces+with+accuracy+as+high+as+that+of+culture%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Clinical+Microbiology%22%5BJournal%5D)">Three-hour molecular detection of Campylobacter, Salmonella, Yersinia, and Shigella species in feces with accuracy as high as that of culture.</a> Journal of Clinical Microbiology. 48 (8), 2929-2933 (2010).</li>
<li>Eriksson, E., Aspan, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+culture%2C+ELISA+and+PCR+techniques+for+salmonella+detection+in+faecal+samples+for+cattle%2C+pig+and+poultry%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Veterinary+Research%22%5BJournal%5D)">Comparison of culture, ELISA and PCR techniques for salmonella detection in faecal samples for cattle, pig and poultry.</a> BMC Veterinary Research. 3, 21(2007).</li>
<li>Dutta, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sensitivity+and+performance+characteristics+of+a+direct+PCR+with+stool+samples+in+comparison+to+conventional+techniques+for+diagnosis+of+Shigella+and+enteroinvasive+Escherichia+coli+infection+in+children+with+acute+diarrhoea+in+Calcutta%2C+India%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Medical+Microbiology%22%5BJournal%5D)">Sensitivity and performance characteristics of a direct PCR with stool samples in comparison to conventional techniques for diagnosis of Shigella and enteroinvasive Escherichia coli infection in children with acute diarrhoea in Calcutta, India.</a> Journal of Medical Microbiology. 50 (8), 667-674 (2001).</li>
</ol>

Die Autoren haben nichts preisgeben.

Seit Salmonella SPP /Shigella spp. sind oft verbunden mit Lebensmittelvergiftung und fäkal-orale Übertragung von akuter Gastroenteritis28,29 und die Routine-Methode ist entweder arbeitsintensiv und zeitaufwändig 7, beschreiben wir eine Hochdurchsatz-Plattform für Salmonella SPP /Shigella spp. Screening mittels Real-Time PCR kombiniert mit geführten Kultur.
Es gibt mehrere Schr...

Durchfall ist immer noch ein häufiges Gesundheitsproblem mit einer hohen Inzidenz bewerten weltweit1,2. Obwohl die Sterblichkeit relativ niedrig ist, einige Patienten zeigen verschiedene Symptome wochenlang (z. B. lose und wässrige Stühle, dringend auf die Toilette gehen), die machen die sozioökonomischen Auswirkungen sehr hoch3,4. Noch gravierender ist, können einige Patienten sogar Reizdarm-Syndrom entwickeln, bleibt unbehandelt5. Es gibt verschiedene Arten von Bakterien, Viren und Parasiten, die Durchfall6verursachen können. Salmonella SPP /Shigella spp. gehören zu den häufigsten Bakterien für die Übertragung von akuter Gastroenteritis7,8,9,10,11. Daher haben viele Landkreise veröffentlicht, Gesetze oder Verordnungen für regelmäßige Salmonella SPP /Shigella spp. screening unter Menschen, die Nahrung und Wasser umgehen würden. Zum Beispiel haben die chinesische Regierung erließ Gesetze für obligatorische Salmonella SPP /Shigella spp. screening jährlich.
Der Gold-Standard-Methode für Salmonella SPP /Shigella spp. Erkennung ist Bakterienkultur. Durch Bakterienkultur und aufeinander folgenden biochemische Identifizierung und serologischen Charakterisierung identifizieren wir die Spezies von Bakterien, die das Krankheitsmanagement Ausbruch und antimikrobielle profiling zur Unterstützung der Behandlung von Patienten erleichtert 12. es könnte auch helfen, die Quelle der Infektion während der Salmonella SPP verfolgen /Shigella spp. Ausbruch13. Diese Methode ist jedoch arbeitsintensiv (erfordern manuelle Bedienung) und zeitaufwändig (wobei mehrere Tage), vor allem für das Testen einer großen Anzahl von Proben7. Darüber hinaus lebensfähig aber nicht kultivierbarer (VBNC) Salmonella SPP /Shigella spp.möglicherweise gibt es in einigen Stuhlproben14. Angesichts dieser Nachteile haben viele Labors versucht, neue Techniken zum Nachweis von Salmonella SPP entwickeln /Shigella spp.15,16,17,18 , 19 , 20 , 21 , 22 , 23 , 24 , 25. all diese Methoden verwenden nuklearen saure Verstärkung Test (NAAT), unter denen die Polymerase-Kettenreaktion (PCR) die häufigste ist. Eine wichtige Einschränkung dieser NAAT basierte Methoden ist, dass tote Bakterien, auch bakterielle Verunreinigungen enthält unvollständige genomischer DNA, positive Ergebnisse26, zeigen konnte, die vor allem die genaue Diagnose der Krankheit beeinflussen könnten. Blanco Et Al. zeigten, dass molekulare Tests sehr empfindlich, nicht nur für tragfähige Salmonellen in Kulturen, sondern auch mit teilweise Genomen und tot oder nicht lebensfähig Bakterien aus vergangenen Infektionen oder Kontamination26ist. Daher sollten neuer Technologien entwickelt werden.
Wir hier eine neuartige Methode, verbindet die NAAT Methode und Kultivierung basiert. Wie in Abbildung 1dargestellt, diese neue Methode gilt Real-Time PCR erste screening und positive Proben werden für die Bakterienkultur und Identifikation gesendet.

<table><tbody><tr><td>Tris</td><td>Sigma</td><td>10708976001</td><td></td></tr><tr><td>EDTA</td><td>Sigma</td><td>798681</td><td></td></tr><tr><td>NP40</td><td>Sigma</td><td>11332473001</td><td></td></tr><tr><td>ddH2O</td><td>Takara</td><td>9012</td><td></td></tr><tr><td>PrimeSTAR HS (Premix)</td><td>Takara</td><td>R040Q</td><td></td></tr><tr><td>Nährbrühe</td><td>LandBridge</td><td>CM106</td><td></td></tr><tr><td>Nähr-Agar</td><td>LandBridge</td><td>CM107</td><td></td></tr><tr><td>Selenit Cystin Medium</td><td>LandBridge</td><td>CM225</td><td></td></tr><tr><td>XLD</td><td>LandBridge</td><td>CM219</td><td></td></tr><tr><td>MAC&nbsp;</td><td>LandBridge</td><td>CM908</td><td></td></tr><tr><td>Salmonellen chromogener Agar</td><td>CHROMagar</td><td>SA130</td><td></td></tr><tr><td>Salmonellen diagnostisches Serum</td><td>Tianrun</td><td>SAL60</td><td></td></tr><tr><td>Shigella diagnostisches Serum</td><td>Tianrun</td><td>SHI54</td><td></td></tr><tr><td>Analabstrich (Auffangröhrchen plus)</td><td>Huachenyang</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Objektträger</td><td>Mingsheng</td><td>7102</td><td></td></tr><tr><td>Mikroschleife</td><td>Weierkang</td><td>W511</td><td></td></tr><tr><td>Inkubator</td><td>Jinghong</td><td>DNP-9082</td><td></td></tr><tr><td>Autoklav</td><td>AUL</td><td>SS-325</td><td></td></tr><tr><td>Trockenbad</td><td>Jinghong</td><td>KB-20</td><td></td></tr><tr><td>automatisiertes mikrobielles Identifikationssystem</td><td>bioM&eacute; rieux</td><td>VITEK2</td><td>ein anderes gleichwertiges System könnte verwendet werden</td></tr><tr><td>, eine fluoreszierende Echtzeit-PCR-Maschine</td><td>ThermoFisher</td><td>ABI7500</td><td>eine andere gleichwertige Maschine könnte verwendet werden</td></tr></tbody></table>

eine high-throughput-plattform für das screening von salmonella spp. /shigella spp.

A High-throughput Platform for the Screening of Salmonella spp./Shigella spp.

Fäkal-orale Übertragung von akuter Gastroenteritis tritt von Zeit zu Zeit, vor allem, wenn Menschen, die Nahrung und Wasser behandelt von Salmonella spp./Shigella SPP infiziert sind Die Goldstandard-Methode zum Nachweis von Salmonella spp./Shigella SPP ist direkte Kultur, aber das ist arbeitsintensiv und zeitaufwändig. Hier beschreiben wir eine Hochdurchsatz-Plattform für Salmonella spp./Shigella spp., screening, mittels Real-Time Polymerase-Kettenreaktion (PCR) kombiniert mit geführten Kultur. Es gibt zwei wichtige Phasen: Real-Time PCR und die geführte Kultur. Für die erste Stufe (Real-Time PCR) Wir erklären jeden Schritt der Methode: Sammlung, Voranreicherung, DNA-Extraktion und Real-Time PCR zu probieren. Wenn das Real-Time PCR-Ergebnis positiv ist, dann die zweite Stufe (geführte Kultur erfolgt): selektive Kultur, biochemische Identifizierung und serologischen Charakterisierung. Wir zeigen auch repräsentative Ergebnisse daraus generiert. Das hier beschriebene Protokoll wäre eine wertvolle Plattform für die schnelle, konkrete, sensible und Hochdurchsatz-Screening von Salmonella spp. /Shigella spp.

Das Protokoll wurde für das Screening von Salmonella spp. angewendet /Shigella spp. in anal Hocker Beispiele von Menschen, die Nahrung und Wasser umgehen würden.
In der Real-Time PCR-Schritt wie in Abbildung 5A, gab es eine erfolgreiche Verstärkung im HEX-Kanal, was bedeutete, dass die gemischte Probe positiv für Salmonella SPP war. Dann wurde eine weitere...

Salmonella SPP /Shigella spp. sind häufige Erreger Durchfall zugeschrieben. Hier beschreiben wir eine Hochdurchsatz-Plattform für das Screening von Salmonella spp. /Shigella spp., mittels Real-Time PCR kombiniert mit geführten Kultur.

Eine High-Throughput-Plattform für das Screening von Salmonella spp. /Shigella spp.

Fecal-oral transmission of acute gastroenteritis occurs from time to time, especially when people who handled food and water are infected by Salmonella ...

Diese Methode bietet eine Plattform mit hohem Durchsatz für das Screening von Salmonellen und Shigella. Der Hauptvorteil dieser Technik ist Wiederholung, spezifisch, empfindlich und hoher Durchsatz. Diese Technik kombiniert NAAT schnelle Methode und Kultur, in der Echtzeit-PCR-Screening wurde zuerst angewendet, und dann positive wurde für Bakterienkultur und Identifizierung gesendet.Obwohl sich diese Methode auf Salmonellen- und Shigella-Screening konzentriert, kann sie auch auf andere Krankheitserreger wie Vibrios, Staphylococcus, E.Coli und et cetera angewendet werden. Die visuelle Demonstration dieser Methode ist von entscheidender Bedeutung, da die Auswahl der richtigen Kolonie aufgrund der Hintergrundflora in Proben schwierig ist. Zunächst drei Milliliter Nährstoffbrühe zu jeder Probe hinzufügen.Dann inkubieren Sie die Proben bei 36 Grad Celsius für sechs Stunden. Danach zentrifugieren Sie die Voranreicherungskultur bei 800 g für zwei Minuten. Dann übertragen Sie den Überstand auf ein neues Rohr und zentrifugieren Sie ihn wieder für fünf Minuten bei 12.000 g.Nach dem Wegwerfen des Überstandes 100 Mikroliter DNA-Extraktionslösung in das Pellet geben. Dann wirbeln Sie die Röhre

a-high-throughput-platform-for-screening-salmonella-sppshigella

Research

Forschung

JoVE Journal

Immunology and Infection

Immunologie und Infektion

Ein Verfahren zur Flüssig-Kultivierung und die Abgabe...

High-Throughput-Screening und Biosensorik mit Fluorescent C. elegans Die Stämme

Wir beschreiben eine niedrige Kosten, hohe Durchsatz-Verfahren zum Screening von Pilzen Endoglucanaseaktivität...

High Throughput Screening von Fungal Endoglucanaseaktivität in Escherichia coli</em

Quelle: Yang, Z., et al. Eine Hochdurchsatzplattform für die Screening von Salmonella-Arten /Shigella-Arten . J. Vis. Exp. (2018)Dieses Video demonstriert die selektive Anreicherung und Identifikation von Salmonellen mit Xyloselysin-Desoxycholat (XLD) und chromogenem Agar. Selenitbrühe fördert das Wachstum von Salmonellen , während XLD-Agar durch die Produktion von Schwefelwasserstoff schwarzzentrierte Kolonien offenbart. Chromogener Agar bestätigt die Identität durch enzymvermittelte...

Selektive Anreicherung und Identifikation von Salmonellenarten mit Xyloselysin-Desoxycholat und chromogenem Agar

Eine Hochdurchsatz-Assay in vitro Phänotyp Salmonellen oder andere bakterielle Verein, Invasion und Replikation in Fresszellen mit hoher Durchsatzleistung entwickelt. Die Methode wurde eingesetzt, um Salmonellen Gen-Knockout-Mutanten-Stämme für ihre Verstrickungen in der Wirt-Pathogen-Interaktionen zu bewerten.

Hochdurchsatz-Assay zum Phänotyp Salmonella enterica Typhimurium Association, Invasion und Replikation in Makrophagen

Das übergeordnete Ziel dieses Protokolls ist es, funktionale Nanosensoren für die Portable, kostengünstig, zu synthetisieren und schnelle Erkennung von gezielt pathogene Bakterien durch eine Kombination von magnetischen Entspannung und Fluoreszenz Emission Modalitäten.

Foodborne Krankheitserreger Screening mit Magneto-fluoreszierende Nanosensor: Schnellnachweis von E. Coli O157: H7

Hier beschreiben wir eine Protokoll, die ist ein anpassungsfähiges, ganze Host, High-Content-Screening-Tool, das genutzt werden kann, um Wirt-Pathogen Interaktionen zu untersuchen und für die Wirkstoffforschung verwendet werden.

Ein High-Throughput, High-Content, Liquid-basierter C. Elegans Pathosystem

Hier präsentieren wir ein Protokoll zur Messung der Shigellacidal Aktivität der Antikörper im Serum. Serum mit Bakterien und exogene Ergänzung, inkubiert, vermischt und das Reaktionsgemisch auf Agarplatten überzogen ist. Lebensfähige Bakterien bilden Kolonien, die gezählt werden, einen automatisierten Kolonie Enumerator verwenden und die bakterizide Titer bestimmt.

Ein High-Throughput- Shigella-spezifischen bakterizide Assay

Loop-vermittelte isotherme Amplifikation (LAMP) ist ein isothermer Nukleinsäure-Amplifikationstest (iNAAT), der ein breites Interesse am Nachweisvon Erreger geweckt hat. Hier präsentieren wir ein multilaboriertes Salmonella LAMP-Protokoll als schnelle, zuverlässige und robuste Methode zum Screening von Salmonellen in Tierfutter und zur Bestätigung mutmaßlicher Salmonellen aus der Kulturisolierung.

Loop-vermittelte isotherme Amplifikation zum Screening von Salmonellen in Tierfutter und Bestätigung von Salmonellen aus der Kulturisolierung

Darmmikroben können die Gesundheit ihres Wirts über spezifische oder konservierte Mechanismen positiv oder negativ beeinflussen. Caenorhabditis elegans ist eine bequeme Plattform, um nach solchen Mikroben zu suchen. Das vorliegende Protokoll beschreibt das Hochdurchsatz-Screening von 48 Bakterienisolaten auf Auswirkungen auf die Nematoden-Stressresistenz, die als Proxy für die Gesundheit von Würmern verwendet werden.

Hochdurchsatz-Screening mikrobieller Isolate mit Auswirkungen auf die Gesundheit von Caenorhabditis elegans

Hier stellen wir das Prinzip, den Aufbau und die Anleitung des intelligenten Hochdurchsatz-Antimikrobiell-Sensitivitätstest-/Phagen-Screening-Systems vor. Die Anwendung wird am Beispiel von Salmonellen , die aus Geflügel in Shandong, China, isoliert wurden, veranschaulicht. Der Lar-Index wird berechnet und seine Bedeutung für die Bewertung antimikrobieller Resistenzen wird umfassend diskutiert.

Anwendung des intelligenten Hochdurchsatz-Antimikrobiell-Sensitivitätstest-/Phagen-Screening-Systems und des Lar-Index der antimikrobiellen Resistenz

Dieses Protokoll bietet einen standardisierten Hochdurchsatz-Screening-Workflow für industrielle Mikroorganismen. Dabei wird eine mutierte Bibliothek mittels ARTP-Mutagenese erstellt, ein positives Tröpfchenscreening mit automatisierter Mikrofluidik durchgeführt und anschließend die Ergebnisse überprüft. Die Zuverlässigkeit des Workflows wurde durch das Screening von Hochleistungs-B . coagulans-Stämmen bestätigt.

Hochdurchsatz-Screening von L-Milchsäure-hyperproduzierenden Bacillus-Coagulans-Mutanten mittels einer automatisierten tropfen-mikrofluidischen Plattform

Erfahren Sie eine Hochdurchsatz-Plattform zum Screening von Salmonella und Shigella mittels Echtzeit-PCR und geführter Kultur. Diese Methode bietet hohe Spezifität und Sensitivität für die schnelle Pathogenerkennung.

Eine High-Throughput-Plattform für das Screening von Salmonella spp. /Shigella spp.

Weitere Videos entdecken