Erhöhte Plus Labyrinth Test in Kombination mit Video Tracking-Software um die angstlösende Wirkung von exogenen ketogene Ergänzungen zu untersuchen

Hier präsentieren wir Ihnen ein Protokoll zur Änderung des Angst von Nagetier Tiermodellen untersucht. Die erhöhten plus Labyrinth (EPM) Test, zusammen mit einem Video tracking-Software bietet eine zuverlässige Methode, um die Wirkung der verschiedenen möglichen anxiolytische Behandlungen in präklinischen Labor Szenarien zu dokumentieren.

Das erhöhte Plus-Labyrinth ist eine Methode, um die Wirkung verschiedener potenziell angstlösender Behandlungen auf Labor-Nagetiermodelle im Vergleich zu anderen Methoden humaner zu dokumentieren. Der Hauptvorteil dieser Methode ist, dass sich die instinktive Neigung des Nagers zu dunklen und geschlossenen Räumen sowie die unkonditionierte Höhenangst und die Vermeidung von Freiräumen stützt. Collin Park, ein Mitarbeiter aus meinem Labor, wird helfen, das Verfahren zu demonstrieren.

Einige Tage vor dem Testen, behandeln Sie die Tiere, indem Sie sie am Oberkörper pflücken und sie für eine Minute halten, um sie an den Experimentator zu akklimatisieren. Messen Sie dann das Körpergewicht der Tiere, bevor Sie mit Behandlungen beginnen, um die Dosierungsberechnung für die Behandlung zu bestimmen. Als nächstes, machen Sie die Tiere mit der intragastrischen Gavage-Methode mit Wasser durch Gavage für fünf Tage vor Keton-Supplementierung vertraut.

Für den Angsttest verwenden Sie das erhöhte Plus-Labyrinth oder EPM-Gerät, ein plus geformtes Gerät mit vier Armen mit zwei offenen und zwei geschlossenen. Beleuchten Sie das EPM-Gerät, indem Sie indirekte Beleuchtung von der Decke aus verwenden, anstatt es direkt zu beleuchten. Stellen Sie sicher, dass alle vier Arme ähnlich beleuchtet sind.

Schließen Sie den Installationsschlüssel der Bewegungsverfolgungssoftware an einen USB 2.0-Anschluss an, und installieren Sie die Software. Fixieren Sie dann die Kamera über dem Versuchsbereich, und stellen Sie sicher, dass sie während der Dauer des Experiments unbeweglich bleibt. Richten Sie schließlich ein neues Experiment im Bewegungsverfolgungssoftwaresystem mithilfe der Bedienungsanleitung ein.

Legen Sie das Tier in den Versuchsbereich. Starten Sie dann den Datenerfassungsprozess, indem Sie die Starttaste auf dem Zeitbedienfeld drücken. Sammeln Sie im Testraum die EPM-Daten auf zwei Arten, manuell und mit der Software.

Die geblendeten Beobachter sind durch einen Vorhang getrennt. Warten Sie, bis der Tracking-Prozess aufgezeichnet wird, oder drücken Sie die Stopp-Taste auf dem Zeitbedienfeld. Entfernen Sie dann das Tier aus dem Versuchsgebiet.

Um schließlich auf das Analysetool zuzugreifen, drücken Sie die Analysetaste in der Versuchsassistentenleiste. Wählen Sie Versuche und Zeitintervalle aus, um einen Bericht zu analysieren und zu generieren. Beginnen Sie, indem Sie die Ratten in ihrem Hauskäfig 30 Minuten vor Beginn des Experiments in den Versuchsraum überführen.

Platzieren Sie eine Ratte an der Kreuzung der vier Arme des EPM mit Blick auf den offenen Arm gegenüber dem Experimentator. Führen Sie die Video-Tracking-Software aus und zeichnen Sie das Verhalten des Tieres fünf Minuten lang manuell auf. Wenn das Tier dann vom EPM fällt, nehmen Sie es auf und legen Sie es wieder an den gleichen Punkt der EPM, wo es abgefallen ist.

Schließen Sie die Verhaltensdaten dieses Tieres aus der Analyse aus. Beenden Sie am Ende des fünfminütigen Tests die Video-Tracking-Software. Entfernen Sie das Tier aus dem EPM, und legen Sie es wieder auf den heimischen Käfig.

Reinigen Sie schließlich das EPM mit einem Desinfektionsmittel, gefolgt von Leitungswasser. Trocknen Sie das Gerät mit Papiertüchern. Nach chronischer Fütterung verbrachten Ratten in der KSMCT-Gruppe deutlich mehr Zeit in den offenen Armen als die Kontrollgruppe.

Die KS-Gruppe verbrachte deutlich mehr Zeit im Zentrum als die Kontrollgruppe. Und weniger Zeit wird in geschlossenen Armen in den LKE, KS, KSMCT Gruppen im Vergleich zur Kontrolle verbracht. Ratten der KS- und KSMCT-Gruppen legten deutlich längere Strecken in den offenen Armen zurück.

Während die Ratten in den LKE-, KS- und KSMCT-Gruppen deutlich weniger Distanz in den geschlossenen Armen zeigten als die Kontrollgruppe. Darüber hinaus war die Zeit, die in den offenen Armen verbracht wurde, nach sieben Tagen oraler Gavage in der KE-Gruppe größer, ging aber im Zentrum für die KE-, KS- und KSMCT-Gruppen zurück. Auch die Zahl der Einträge in die geschlossenen Arme war nach sieben Tagen Verwaltung in den KE- und KS-Gruppen deutlich geringer.

Es ist sehr wichtig, alle Ratten auf dem Gerät in einem konsistenten Herrenhaus an der Kreuzung weg vom Experimentator zu platzieren. EPM-Assay auf Nagetiere ist eine geeignete und empfindliche Methode, um die Wirkung verschiedener Behandlungen zu untersuchen, die Gehirnbereiche beeinflussen, die an der angstlösenden Wirkung und den Wirkmechanismen beteiligt sind.