Name: Linken Atrial Stenose induzierten pulmonalen venösen Arterialization und Gruppe 2 pulmonale Hypertonie in der Ratte (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-11-18T14:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 34 s
Description: Lernen Sie die chirurgische Technik der linken Vorhofstenose bei Ratten zur Induktion pulmonaler venöser Arterialisierung und pulmonaler Hypertonie vom Typ 2. Dieses Modell ermöglicht die Untersuchung der Pathophysiologie und Mechanismen dieser häufigen Erkrankung.

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Die Autoren erkennen die Mitacs-Japan Society für das Sommerprogramm Promotion of Science (JSPS). Ping Yu Xiong wurde unterstützt durch die Finanzierung von Mitacs-JSPS Summer Program der Jikei University School of Medicine zu besuchen. Dr. Minamisawa ist zum Teil durch das Ministerium für Bildung, Kultur, Sport, Wissenschaft und Technologie von Japan (S.M.), das MEXT-Supported-Programm für die strategische Forschungsgemeinschaft an privaten Universitäten (S.M.), das Fahrzeug Racing Gedenk unterstützt Stiftung (S.M.) und The Jikei Universität Graduate Research Fund (S.M.) mit finanzieller Unterstützung für dieses Projekt. Dr. Archer wird teilweise vom US-National Institute of Health (NIH) Zuschüsse NIH 1R01HL113003-01A1 (S.L.A) und NIH 2R01HL071115-08 (S.L.A), Canada Foundation for Innovation, Tier 1 Canada Research Chair in mitochondrialen Dynamik und translationale unterstützt. Medizin (S.L.A), der William J. Henderson-Stiftung, das kanadische vaskuläre Netzwerk und die Königin Herz-Lungen-Einheit (QCPU).
Die Autoren erkennen Herrn Tadashi Kokubo, Chef der fotografische Dienstleistungen von der akademischen Informationszentrum Jikei University School of Medicine, für die Dreharbeiten für des Videos.

Die LAS experimentelle Protokoll ist der Jikei Universität Schule von Medizin Tier Pflege Ausschuss, die Universitätsforschung und Ethik-Kommission (Protokoll #2015-118) genehmigt worden.
1. präoperative Vorbereitung
<ol><li>Bieten Sie nach der Ankunft in der Tierstation 5 Wochen alten männliche Sprague-Dawley Ratten zwischen 150 bis 200 g mit 1 Woche in ihr neues Zuhause vor der Operation zu akklimatisieren.</li>
	<li>Bereiten Sie die folgende Ausrüstung vor der Operation durch Autoklavieren: (1) ein kleines Tier Beatmungsgerät, (2) eine Narkose-Maschine, (3) eine Intubation Kit (bestehend aus ein paar Gefäßklemme Zange, ein Zunge-Vakuumpumpe und ein 18 G-Angiocatheter), (4) chirurgische Instrumente (die enthalten Sie ein paar gebogene Pinzetten, ein paar geraden Zange, eine Nadel Treiber, eine Truhe Aufrollvorrichtung, Schere, ein 5: 0 Monofile Faden, eine Clip-Applikator, mittelgroßen bis großen Clips, und eine Thoraxdrainage 23 G).</li>
	<li>Haben Sie sterilen Wattestäbchen und Gaze bereit, sich mit Blutungen zu beschäftigen.</li>
	<li>Verwenden Sie ein Heizkissen, um die tierischen Körpertemperatur um 37 ° C während der Operation zu halten.</li>
</ol>(2) Anästhesie und Endotracheale Intubation
<ol><li>Die Ratte in eine Induktion-Kammer mit 5 % Isofluran gemischt mit 2 L/min Raumluft zu betäuben.</li>
	<li>Rasieren Sie vor Intubation die Ratte Brusthaar mit einem Haar Rasierer zu und wenden Sie Haarentfernungs-Creme um feines Haar zu entfernen.</li>
	<li>Überprüfen Sie das Pedale Reflex um erfolgreiche Narkose vor Intubation zu bestätigen.</li>
	<li>Haken Sie die vorderen Zähne mit einer Schnur und sichern Sie die Zeichenfolge mit zwei Stiften.</li>
	<li>Öffnen Sie die Ratte in den Mund mit der Gefäßklemme Zange und legen Sie die Zunge Depressor in den Mund.</li>
	<li>Heben Sie die Zunge Depressor um die Stimmlippen zu visualisieren. Hinweis: Es ist hilfreich, um ein starkes Licht über den Kopfbereich der Ratte zu visualisieren die Stimmlippen zu glänzen.</li>
	<li>Einfügen Sie 18 G Angiocatheter als einen endotracheal Schlauch in die Luftröhre und anschließend verbinden Sie schnell, den Katheter mit der Atemschutzmaske.</li>
	<li>Legen Sie das Tidalvolumen, 10 µL pro Gramm mit einer Atemfrequenz von 100 Atemzüge pro Minute.</li>
	<li>Pflegen Sie Anästhesie mit 2 % Isofluran mit 2 L/min Raumluft vermischt.</li>
</ol>3. Vorbereitung der Operationsstelle
<ol><li>Vorbereiten der Operationsstelle mit abwechselnden Peelings von Chlorhexidin und Alkohol X3.</li>
	<li>Buprenorphin geben 0,01 mg/kg subkutan.</li>
	<li>Die Ratte mit einem sterilen Tuch abdecken.</li>
	<li>Überprüfen Sie das Pedale Reflex um eine erfolgreiche Intubation und Wartung der Narkose zu bestätigen.</li>
</ol>4. linke Atrial Stenose Operation
<ol><li>Markieren Sie den Einschnitt Standort 2 cm unterhalb der Ratte linke Achselhöhle mit einer Regel.</li>
	<li>Machen Sie eine 2 cm links seitliche Brust Wand Schnitt mit der Schere.</li>
	<li>Trennen Sie die Zwischenrippenmuskeln zwischen der vierten und der fünften Rippe, mit der geraden und gebogenen Pinzette, bis zum Eintritt in die Brusthöhle.</li>
	<li>Legen Sie die Truhe Aufrollvorrichtung in der Brusthöhle. Weiterhin die geraden und gebogenen Pinzette verwenden, trennen die Intercostalneuralgie Muskel um eine direkte Visualisierung der Thymus und das Herz zu erhalten.</li>
	<li>Heben Sie die Thymusdrüse mit ein paar geraden Zange. Entfernen Sie die Thymusdrüse, die das Herz mit der Schere zu bedecken. Vermeiden Sie schneiden oder stossen in jeder großen Blutgefäßen.</li>
	<li>Übergeben Sie sorgfältig ein 5: 0 monofilen Nahtmaterial durch die Oberfläche des linken Ventrikels, direkt unterhalb der linken atrial Appendage. Vermeiden Sie die Nadel durch den großen Koronararterien vorbei.</li>
	<li>Nachdem die Naht wurde platzieren und es gibt keine bedeutende Blutung, Knoten Sie einen losen.</li>
	<li>Die Naht Thread hochziehen und nach vorne, um das Herz aus der Brust heben.</li>
	<li>Sobald das Herz aus der Brust gehoben wird, schnell anwenden eines mittelgroßen bis großen Clips in den linken Vorhof, knapp oberhalb der Mitralklappe. Hinweis: Der Clip ist halb geschlossen, mit der Spitze des Clips kneifen den linken Vorhof, linke atrial Stenose verursacht.</li>
	<li>Schnell die Herzen in der Brust zurück. Sicherzustellen, dass das Herz nicht außerhalb der Brust länger als 30 s.</li>
	<li>Entfernen Sie das Aufenthalt Nahtmaterial verwendet, um das Herz zu heben.</li>
	<li>Schließen Sie die Brust mit einer 5-0 Monofile Naht, mit einem einfachen Muster unterbrochen.</li>
	<li>Einen 23 G Brust Schlauch befestigt, eine 10 mL Spritze in die Brust, und dann fahren Sie mit dem Schließen der Wand Brustmuskel und Haut mit einfachen unterbrochenen Nähten.</li>
	<li>Ziehen Sie Luft, Blut und Pleuraerguss über die eingelegte Thoraxdrainage, mit angehängten 10 cc Spritze, und dann ziehen Sie den Schlauch.</li>
	<li>Schließen Sie die Hautschicht mit einer 5-0 Monofile Naht, mit einem einfachen Muster unterbrochen.</li>
	<li>Buprenorphin geben 0,01 mg/kg subkutan.</li>
	<li>Schalten Sie die Isofluran.</li>
	<li>Trennen Sie die Atemschutzmaske, nachdem Spontanatmung beobachtet wird.</li>
	<li>Halten Sie die Ratte intubiert und lassen Sie es auf das Heizkissen zu erholen, bis er aufwacht.</li>
	<li>Sicher Extubate beobachtet die Ratte nach einem oder mehreren der folgenden Anzeichen ist/sind: die Ratte setzt sich in Bewegung seine vier Glieder, es gewinnt seine aufrichtenden Reflex, es gewinnt seine Würgereflex oder es zeigt spontane Entleerung.</li>
</ol>5. postoperative Pflege
<ol><li>Alle 8-12 h, geben Buprenorphin 0,01 mg/kg subkutan. Carprofen 5 mg/kg ist subkutan gegeben auf einer täglichen Basis für 2 Tage und dann, je nach Bedarf, wenn die Ratte nicht gut bewegen ist und sieht aus wie es ist, in Schmerzen.</li>
	<li>Geben Sie 5 mL normale Kochsalzlösung subkutan direkt nach der Operation, wie die Ratte Schwierigkeiten beim Trinken aus dem Wasser Zapfen, unmittelbar postoperativ haben.</li>
</ol>6. Bestätigung für den Erfolg der linken Atrial Stenose mit Echokardiographie
<ol><li>Durchführen einer transthorakalen Echokardiographie 2 Wochen nach der Operation die LV Zufluss Geschwindigkeit zu bestimmen.</li>
	<li>Die Ratte nach der in Abschnitt 1 beschriebenen Schritte zu betäuben.</li>
	<li>Pflegen Sie nach Induktion der Anästhesie Anästhesie mit einem Prüfkopf mit 2 % Isofluran mit 2 L/min Raumluft vermischt.</li>
	<li>Rasieren Sie die Ratte Brustwand mit einem Haar Rasierer zu und verwenden Sie Haarentfernungs-Creme zu, um alle verbleibenden Haare zu entfernen.</li>
	<li>Legen Sie die Ultraschallsonde an der Spitze des Herzens, die rund um die fünfte Intercostalneuralgie Raum auf der linken Seite der Brust ist. Bewegen Sie die Sonde in dieser Region, bis man ein guter Vierkammer-Blick erhält.</li>
	<li>Messen Sie die LV Zufluss Geschwindigkeit mit dem pulsed-Wave Doppler-Modus knapp oberhalb der Mitralklappe Annulus.</li>
	<li>Eine LV Zufluss Geschwindigkeit größer als 2,0 m/s ist für die Entwicklung der moderaten pulmonalen Hypertonie bei 8-10 Wochen nach LAS Chirurgie erforderlich.</li>
</ol>(7) Sham-Betrieb
<ol><li>Außer den Clip (Schritt 4,9) Anwendung, alle Schritte oben, um Alter abgestimmt, Sham betriebene Kontrolle (SOC) Ratten zu erstellen.</li>
</ol>

<ol><li>McGuire, L. B., Nolan, T. B., Reeve, R., Dammann Jr, J. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cor+Triatriatum+as+a+Problem+of+Adult+Heart+Disease%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Cor Triatriatum as a Problem of Adult Heart Disease.</a> Circulation. 31, 263-272 (1965).</li>
<li>Strange, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pulmonary+hypertension%3A+prevalence+and+mortality+in+the+Armadale+echocardiography+cohort%5BTitle%5D)+AND+%22Heart%22%5BJournal%5D)">Pulmonary hypertension: prevalence and mortality in the Armadale echocardiography cohort.</a> Heart. 98 (24), 1805-1811 (2012).</li>
<li>Moreira, E. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Prevalence+of+Pulmonary+Hypertension+in+the+General+Population%3A+The+Rotterdam+Study%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+ONE%22%5BJournal%5D)">Prevalence of Pulmonary Hypertension in the General Population: The Rotterdam Study.</a> PLoS ONE. 10 (6), e0130072(2015).</li>
<li>Wijeratne, D. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Increasing+Incidence+and+Prevalence+of+World+Health+Organization+Groups+1+to+4+Pulmonary+Hypertension%3A+A+Population-Based+Cohort+Study+in+Ontario%2C+Canada%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%3A+Cardiovascular+Quality+and+Outcomes%22%5BJournal%5D)">Increasing Incidence and Prevalence of World Health Organization Groups 1 to 4 Pulmonary Hypertension: A Population-Based Cohort Study in Ontario, Canada.</a> Circulation: Cardiovascular Quality and Outcomes. 11 (2), (2018).</li>
<li>Briongos Figuero, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Predictors+of+persistent+pulmonary+hypertension+after+mitral+valve+replacement%5BTitle%5D)+AND+%22Heart+and+Vessels%22%5BJournal%5D)">Predictors of persistent pulmonary hypertension after mitral valve replacement.</a> Heart and Vessels. 31 (7), 1091-1099 (2016).</li>
<li>Jiang, B. H., Tardif, J. C., Shi, Y., Dupuis, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bosentan+does+not+improve+pulmonary+hypertension+and+lung+remodeling+in+heart+failure%5BTitle%5D)+AND+%22European+Respiratory+Society%22%5BJournal%5D)">Bosentan does not improve pulmonary hypertension and lung remodeling in heart failure.</a> European Respiratory Society. 37 (3), 578-586 (2011).</li>
<li>Dayeh, N. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Echocardiographic+validation+of+pulmonary+hypertension+due+to+heart+failure+with+reduced+ejection+fraction+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Scientific+Reports%22%5BJournal%5D)">Echocardiographic validation of pulmonary hypertension due to heart failure with reduced ejection fraction in mice.</a> Scientific Reports. 8, (2018).</li>
<li>Yin, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sildenafil+preserves+lung+endothelial+function+and+prevents+pulmonary+vascular+remodeling+in+a+rat+model+of+diastolic+heart+failure%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%3A+Heart+Failure%22%5BJournal%5D)">Sildenafil preserves lung endothelial function and prevents pulmonary vascular remodeling in a rat model of diastolic heart failure.</a> Circulation: Heart Failure. 4 (2), 198-206 (2011).</li>
<li>Wang, Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Effects+and+Mechanism+of+Atorvastatin+on+Pulmonary+Hypertension+Due+to+Left+Heart+Disease%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+ONE%22%5BJournal%5D)">The Effects and Mechanism of Atorvastatin on Pulmonary Hypertension Due to Left Heart Disease.</a> PLoS ONE. 11 (7), e0157171-e0157171 (2016).</li>
<li>Hunt, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pulmonary+veins+in+the+normal+lung+and+pulmonary+hypertension+due+to+left+heart+disease%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Physiology+-+Lung+Cellular+and+Molecular+Physiology%22%5BJournal%5D)">Pulmonary veins in the normal lung and pulmonary hypertension due to left heart disease.</a> American Journal of Physiology - Lung Cellular and Molecular Physiology. 305 (10), L725-L736 (2013).</li>
<li>Fujimoto, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pulmonary+hypertension+due+to+left+heart+disease+causes+intrapulmonary+venous+arterialization+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Thoracic+and+Cardiovascular+Surgery%22%5BJournal%5D)">Pulmonary hypertension due to left heart disease causes intrapulmonary venous arterialization in rats.</a> The Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 154 (5), 1742-1753 (2017).</li>
<li>Katz, M. G., Fargnoli, A. S., Hajjar, R. J., Hadri, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pulmonary+hypertension+arising+from+left+heart+disease+causes+intrapulmonary+venous+arterialization+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Thoracic+and+Cardiovascular+Surgery%22%5BJournal%5D)">Pulmonary hypertension arising from left heart disease causes intrapulmonary venous arterialization in rats.</a> The Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 155 (1), 281-282 (2018).</li>
<li>Alsoufi, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Not+a+Cinderella+story%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Thoracic+and+Cardiovascular+Surgery%22%5BJournal%5D)">Not a Cinderella story.</a> The Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 155 (1), 282-284 (2018).</li>
<li>Kato, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pulmonary+vein+stenosis+and+the+pathophysiology+of+%26%2334%3Bupstream%26%2334%3B+pulmonary+veins%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Thoracic+and+Cardiovascular+Surgery%22%5BJournal%5D)">Pulmonary vein stenosis and the pathophysiology of &#34;upstream&#34; pulmonary veins.</a> The Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 148 (1), 245-253 (2014).</li>
</ol>

Die Autoren haben nichts preisgeben.

Die LAS-Ratte ist eine neuartige Gruppe 2-PH-Modell, das bereits erhebliches Interesse von den Forschern in Feld12,13erhalten hat. Im Vergleich zu den beiden bestehenden Gruppe 2 Modellen, nämlich die Pulmonalvene Stenose (PVS) Modell14, mit Ferkel und die Supracoronary Aorten Streifenbildung (SAB) Ratte Modell8,verfügt9,10, die LAS Rattenmodell ü...

Der Zweck dieses Artikels ist es, die schrittweise Anleitung zur Ausführung der LAS-Operation bei Ratten zu demonstrieren. Chirurgisch induzierten LAS genau imitiert MS und cor Triatriatum bei Menschen, die die Schaffung einer mechanischen Obstruktion in den linken Vorhof1beinhalten. Obstruktion des linken Ventrikels (LV) Zuflusses oft führt zu einer Staus des venösen Lungenkreislauf und Patienten entwickeln nach und nach PH. Der Weltgesundheitsorganisation stuft PH durch linke Herz-Kreislauferkrankungen als Gruppe 2, welche ist die am weitesten verbreitete Gruppe von PH2,3,4. Die Diagnose des pH-Wertes bei Patienten mit linken Herzkrankheiten zugeordnet ist größer als Sie einen siebenfachen Anstieg der 1-Jahres standardisierte Sterblichkeit4. Derzeit gibt es keine zugelassene Therapie für Gruppe 2 PH neben der Behandlung der zugrunde liegenden links Herz-Kreislauferkrankungen (z.B.chirurgisch ersetzen die Herzklappenprothese Mitralklappe). Allerdings löst auch effektive Mitralklappenersatz PH nicht vollständig in bis zur Hälfte der Patienten mit MS5. Diese anhaltende PH ist wegen ungünstigen pulmonalen vaskulären Umbauarbeiten, die schlecht verstanden wird. Tiermodelle sind daher wichtig für unser Verständnis der zugrunde liegenden molekularen Mechanismen der negativen pulmonalen vaskulären Umgestaltung in Gruppe 2 PH.
Gibt es ein paar Tiermodellen der Gruppe 2 pH koronare Ligatur6,7 und quer Aorten Streifenbildung8,9,10 bei Nagern sind die am häufigsten verwendeten Gruppe 2 PH Tiermodelle. Der Hauptnachteil dieser Modelle ist die Einbeziehung der LV, wodurch das Ergebnis der Gruppe 2 PH Studien schwer zu interpretieren. Im Gegensatz dazu bleibt die LV im LAS-Modell erhalten. Darüber hinaus ist das LAS Modell klinisch relevant, weil es in der langsamen und progressiven Entwicklung des pH-Wertes über ein 10-Wochen Zeitraum11Ergebnisse. Beim Menschen MS gilt als bedeutende wenn transmitralen Doppler Strömungsgeschwindigkeit größer als 2,0 m/s11, und wir verwenden auch diese Zahl als ein Cut-off um festzustellen, ob die LAS-Operation signifikante Stenose hervorgebracht hat. Darüber hinaus, obwohl die LAS-Modell leichter oder mittelschwerer PH erzeugt, zeigt es charakteristische histologische Veränderungen, ähnlich wie bei menschlichen Patienten, nämlich die Entwicklung der Intrapulmonale venöse Arterialization11. Das LAS Rattenmodell ist eine neuartige und klinisch relevante Gruppe 2-PH-Modell mit erhaltenen LV-Funktion. Es eignet sich für die Erforschung der Pathophysiologie der anhaltenden pulmonalen vaskulären Umbau, Identifizierung von molekularen Zielstrukturen und Erprobung neuartige Therapien für Gruppe 2 PH.

<table><tbody><tr><td>5:0 Prolene Suture</td><td>Johnson & Ltd. Johnson - Ethicon</td><td>8725H</td><td>Polypropylen-Naht mit HEMO-SEAL-Technologie</td></tr><tr><td>Anästhesiegerät</td><td>Wakenyaku Co., Ltd.</td><td>BRTK-100A</td><td>Luftpumpe und Anästhesiemaschine</td></tr><tr><td>Angiokatheter-Führungsdraht</td><td>Selbstgemachter</td><td></td><td>10 cm Führungsdraht auf eine 1 cc Spritze geklebt&nbsp;</td></tr><tr><td>Brust-Retraktor</td><td>Natsume Seisakusho Co., Ltd.</td><td>F-2</td><td></td></tr><tr><td>Thoraxdrainage 23G</td><td>Selbstgemachte</td><td></td><td>10 cc Spritze, die an einer 23G Nadel befestigt ist, plus Kunststoffschlauch</td></tr><tr><td>Gebogene Pinzette</td><td>Natsume Seisakusho Co., Ltd.</td><td>A-14</td><td></td></tr><tr><td>Heizkissen</td><td>Vivaria</td><td>MP-916-NV</td><td>Halten Sie die Körpertemperatur bei 37 Grad Celsius</td></tr><tr><td>Horizon Ligating Clips</td><td>Teleflex</td><td>REF 003200</td><td>Größe Medium-Large</td></tr><tr><td>Horizon Manual-Load Ligating Clip Applier Für mittlere bis große Größe Horizon</td><td>Teleflex REF</td><td>337085</td><td>Ligation Clips Abgewinkelter Kiefer, (20cm)</td></tr><tr><td>Nadelhalter</td><td>Natsume Seisakusho Co., Ltd.</td><td>MC-40</td><td></td></tr><tr><td>Nagetier-Atemschutzmaske</td><td>CWE Inc</td><td>SAR-830/P</td><td>Beatmungsgerät für Kleintiere</td></tr><tr><td>Schere</td><td>Natsume Seisakusho Co., Ltd.</td><td>B-12</td><td>Gerade Schere ideal mit runden Spitzen</td></tr><tr><td>Gerade Pinzette</td><td>Natsume Seisakusho Co., Ltd.</td><td>A-7</td><td></td></tr><tr><td>Zungenspatel</td><td>Uchida Yoko Co., Ltd.</td><td>8-615-2417</td><td>Verwenden Sie das breite Ende</td></tr></tbody></table>

linken atrial stenose induzierten pulmonalen venösen arterialization und gruppe 2 pulmonale hypertonie in der ratte

Left Atrial Stenosis Induced Pulmonary Venous Arterialization and Group 2 Pulmonary Hypertension in Rat

Der Mechanismus der Mitralklappen-Stenose-induzierten pulmonalen venösen Arterialization und Gruppe 2 pulmonale Hypertonie (PH) ist unklar. Es gibt kein Nagetier Modell der Gruppe 2 PH durch Mitralklappen-Stenose (MS), um die Untersuchung von Krankheitsmechanismen und mögliche therapeutische Strategien zu erleichtern. Wir präsentieren eine neuartige Rattenmodell der pulmonalen venösen Staus-induzierten pulmonalen venösen Arterialization und Gruppe 2 PH verursacht durch linken atrial Stenose (LAS). LAS wird erreicht durch Verengung der linken Vorhofs mit einem halbgeschlossenen Titan-Clip. Nach der Operation LAS eine Ratte Modell mit einer transmitralen Zufluss Geschwindigkeit größer als oder gleich 2,0 m/s auf Echokardiographie allmählich entwickelt pulmonalen venösen Arterialization und Gruppe 2 PH über einen Zeitraum von 8 - 10 Wochen. In diesem Protokoll bieten wir die schrittweise Anleitung wie man die LAS-Operation durchzuführen. Das vorgestellte LAS Rattenmodell MS beim Menschen imitiert und eignet sich für das Studium der zugrunde liegenden molekularen Mechanismen der pulmonalen venösen Arterialization und für die präklinische Bewertung von Therapien für Gruppe 2 PH.

Die Wirksamkeit der LAS ist mit Echokardiographie, 2 Wochen postoperativ bestätigt. Ratten mit einer LV Zufluss Geschwindigkeit größer als 2,0 m/s, gemessen mit einem vier-Kammer-Blick, gelten als signifikante Stenose (Abbildung 1) entwickelt haben und moderaten PH und pulmonalen venösen Arterialization 8-10 Wochen nach LAS Chirurgie zuverlässig zu entwickeln.
Zehn Wochen nach LAS Chirurgie, zeigen ...

Linken atrial Stenose (LAS) ist eine neuartige chirurgische Technik verwendet für die Untersuchung Gruppe 2 pulmonale Hypertonie (PH) und Mechanismen der pulmonalen venösen Arterialization. Hier präsentieren wir ein Protokoll, um den linken Vorhof mit einem Titan-Clip verursachen pulmonalen venösen Arterialization und moderieren PH in eine Ratte zu verengen.

Linken Atrial Stenose induzierten pulmonalen venösen Arterialization und Gruppe 2 pulmonale Hypertonie in der Ratte

The mechanism of mitral stenosis-induced pulmonary venous arterialization and group 2 pulmonary hypertension (PH) is unclear. There is no rodent model of ...

Vielen Dank, dass Sie sich unsere Videos angeschaut haben. Ich bin Susumu Minamisawa von der Jikei University School of Medicine Tokyo, Japan. Unsere Möglichkeit auf tierische pulmonale Hypertonie aufgrund von Rattenherzerkrankungen, die als Gruppe Zwei pulmonale Hypertonie klassifiziert ist.Die Weltgesundheitsorganisation klassifiziert die pulmonale Hypertonie in fünf Gruppen. Die linke Vorhofflendenoseratte ist eine tierische Modellgruppe zwei pulmonale Hypertonie, die die am weitesten verbreitete Form der pulmonalen Hypertonie ist und derzeit gibt es keine zugelassenen Therapien für diese Gruppe von pulmonaler Hypertonie. In diesen Videos zeigen wir schritt für Schritt, wie man eine linke Vorhofstenose-Operation bei Ratten durchführt.Chirurgisch erstellte rechte Vorhoffdnose imitiert Mitralstenose beim Menschen. Wenn wir es verwenden, um die Möglichkeit und unter der Gruppe zwei pulmonale Hypertonie zu studieren. Fangen wir an.Bereiten Sie die folgenden Geräte vor der Operation, ein kleines Tier-Beatmungsgerät und eine Anästhesie-Maschine. Ein Inkubationsset besteht aus einem Paar Hämostatzangen, einem Zungendepressivum und einem Angiokatheter mit 18 Gauge. Zu den chirurgischen Instrumenten gehören ein Paar gekrümmte Zangen, ein Paar gerade Zangen, ein Nadeltreiber, ein Brustretraktor, eine Schere, eine 5-0 Monofilament-Naht, ein Clip-Applikator, ein mittelgroßer Clip und ein 23 Gauge Brustrohr.Anästhetisieren Sie die Ratte in einer Induktionskammer mit fünf Prozent Isofluran gemischt mit zwei Metern pro Minute Raumluft. Vor der Intubation rasieren Sie die Brusthaare. Tragen Sie Haarentfernungscreme auf, um feines Haar zu entfernen, das nicht vom Rasierer entfernt wird.Haken Sie die Vorderzähne mit einer Schnur und befestigen Sie die Saiten an Stiften. Nachdem die Schnur gesichert ist, öffnen Sie den Mund mit der Hämostzange und legen Sie den Zungendepressivum in den Mund. Heben Sie den Zungendrucker an, um den Stimmakkord zu visualisieren.Setzen Sie den 18 Gauge Angio-Katheter als Endotrachealrohr in die Luftröhre ein und schließen Sie den Katheter schnell an das Beatmungsgerät an. Stellen Sie das Gezeitenvolumen auf 10 Mikroliter pro Gramm mit einer Atemfrequenz von 100 Atemzügen pro Minute ein. Halten Sie die Anästhesie mit zwei Prozent Isofluran gemischt mit zwei Metern pro Minute Raumluft.Sterilisieren Sie die chirurgische Stelle mit abwechselnden Peelings von Chlorhexidin und Alkohol. Geben Sie Buprenorphin 01 Milligramm pro Kilogramm subkutan. Bedecken Sie die Ratte mit einem sterilen Vorhang.Überprüfen Sie den Pedalreflex, um eine erfolgreiche Anästhesie vor der Operation zu bestätigen. Markieren Sie die Einschnittstelle zwei Zentimeter unterhalb der Achselhöhle. Machen Sie einen zwei Zentimeter linken seitlichen Brustwandschnitt mit einer Schere.Trennen Sie vorsichtig den interkostalen Muskel zwischen der vierten und fünften Rippe mit einer geraden und gekrümmten Zange, bis sie in die Brusthöhle eintritt. Setzen Sie den Brustretraktor in die Brusthöhle ein. Verwenden Sie etwas Kraft, um den Brustretraktor zu öffnen, um die vierte und fünfte Rippe um etwa einen Zentimeter auseinander zu teilen.Heben Sie den Thymus mit einem Paar gerader Zange an. Entfernen Sie vorsichtig den Thymus, der das Herz mit einer Schere bedeckt. Führen Sie vorsichtig eine 5-0 Monofilament-Naht durch die Oberfläche des linken Ventrikels direkt unterhalb des linken Vorhofanhängs.Es sollte darauf geachtet werden, dass die Nadel nicht durch die Hauptherzkranzgefäße geführt wird. Nachdem die Naht an Ort und Stelle ist und es keine signifikante Blutung enden krawatte einen lockeren Knoten. Ziehen Sie den Nahtfaden nach oben und nach vorne, um das Herz aus der Brust zu heben.Sobald das Herz außerhalb der Brust angehoben wird, tragen Sie schnell einen mittelgroßen Clip auf das linke Atrium direkt über der Mitralklappe auf. Entfernen Sie vorsichtig die Aufenthaltsnaht verwendet, um das Herz zu heben. Schließen Sie die Brust mit einer 5-0 Monofilament-Naht mit einem einfachen unterbrochenen Muster.Legen Sie ein 23 Gauge Brustrohr, das an einer 10cc Spritze befestigt ist, in die Brusthöhle ein. Und dann fahren Sie mit dem Schließen der Brust. Zeichnen Sie luft-, blut- und pleurae Erguss in der Nähe des eingelegten Brustrohrs mit der angeschlossenen 10cc Spritze heraus.Und dann ziehen Sie die Röhre, wenn nichts herauskommt. Schließen Sie den Hautbereich mit 5-0 Monofilament-Nähte mit einem einfachen unterbrochenen Muster. Entfernen Sie den chirurgischen Vorhang.Geben Sie Buprenorphin 01 Milligramm pro Kilogramm subkutan. Schalten Sie das Isofluran aus. Graben Sie die Ratte, wenn sie aufwacht.Zwei Wochen nach der Op-Nutzung echo-Kardiographie, um den Erfolg der linken Vorhofstenose-Operation zu bestätigen. Die Wirksamkeit der linken Vorhofflnose wird mit Hilfe der Echokardiographie zwei Wochen nach op. Ratten mit einer Linken Ventrikelzuflussgeschwindigkeit von mehr als zwei Metern pro Sekunde, gemessen auf vier Kammeransichten, gelten als eine signifikante Stenose.10 Wochen nach der vorblichen Stenose-Operation zeigen die Ratten in der LAS-Gruppe linke Vorhofvergrößerung, Lungenverstopfung, rechte Ventrikeldrucküberlastung und erhöhte Lungenvenenströmung im Vergleich zu den Ratten in der scheinbetriebenen Gruppe. Darüber hinaus gibt es eine signifikante Zunahme des rechtsventrikulären systolischen Drucks in der linken Vorhofstenosegruppe im Vergleich zur scheinbetriebenen Gruppe. Der systolische Druck der linken Ventrikel bleibt jedoch in beiden Gruppen gleich.Die histologische Untersuchung des langen Querschnitts, der mit elastischem Van Gieson gefärbt ist, zeigt eine erhöhte Lungenarterienarterien- und Lungenvenenkrankheit. Eine erhöhte pulmonale venöse Dimension der linken Vorhofstenosegruppe im Vergleich zur scheinbetriebenen Gruppe war eher ein glatter Muskel, der in der Färbung wirkt, zeigt eine erhöhte Anzahl glatter Muskelzellen in der Lungenarterie und die Lungenvene der linken Vorhofstenosegruppe im Vergleich zur Kontrollgruppe. Ich hoffe, Sie haben es genossen, dieses Video zu sehen.Obwohl die Operation relativ einfach ist, sollte bei der Anwendung der Naht auf die linke Herzkammer genommen werden, um zu vermeiden, die wichtigsten Herzkranzgefäße zu treffen. Beim Heben des Herzens ziehen Sie die Naht nach oben zum Kopf der Ratte, so dass die linke Atrium seine Laufstruktur klar visualisiert werden kann. Durch die Anwendung des Clips auf das linke Atrium sollte die Dichtheit des Clips ausreichen, um eine signifikante linke Vorhoffllose zu verursachen, aber nicht zu eng, um akute Spulenödeme und rechte Herzinsuffizienz zu induzieren.Vielen Dank, dass Sie sich dieses Video angeschaut haben. Und viel Glück mit Ihrem Experiment.

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Pulmonale arterielle Hypertonie (PAH) ist eine Erkrankung der Lungenarteriolen, die zu deren Obliteration und der Entwicklung eines rechtsventrikulären Versagens führt. Nagetiermodelle der PAH sind entscheidend für das Verständnis der Pathophysiologie der PAH. Hier zeigen wir die hämodynamische Charakterisierung mit Rechtsherzkatheterisierung und Echokardiographie bei Maus und Ratte.

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Dieses Protokoll beschreibt ein chirurgisches Verfahren zur Erstellung eines Modells für flussinduzierte pulmonale arterielle Hypertonie (PAH) bei Ratten und die Verfahren zur Analyse der wichtigsten hämodynamischen und histologischen Endpunkte in diesem Modell.

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Das vorliegende Protokoll beschreibt einen chirurgischen Eingriff zur Entfernung von aufsteigender Aortenbande in einem Rattenmodell der pulmonalen Hypertonie aufgrund einer Erkrankung des linken Herzens. Diese Technik untersucht endogene Mechanismen des umgekehrten Remodells im Lungenkreislauf und im rechten Herzen und informiert so über Strategien zur Umkehrung der pulmonalen Hypertonie und / oder der rechtsventrikulären Dysfunktion.

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Linken Atrial Stenose induzierten pulmonalen venösen Arterialization und Gruppe 2 pulmonale Hypertonie in der Ratte

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