Name: Einsatz von Biochip mikrofluidischen Technologie zur Erkennung Serum Allergen-spezifische Immunglobulin E (sIgE) (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2019-04-21T14:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 10 s
Description: Erfahren Sie die mikrofluidische Biochip-Technologie zur Erkennung von serum-spezifischem Immunglobulin E bei Allergiediagnosen. Diese kostengünstige Methode erfordert weniger Serum und ermöglicht eine schnelle Schulung neuer Anwender.

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Die Autoren danken Professor Mei Jiang für ihre Hilfe bei der statistischen Auswertung und Herr Hammer Tsui bei der Erstellung des Manuskripts. Diese Studie wurde unterstützt durch das Guangzhou Science and Technology Foundation (201804020043) und die National Natural Science Foundation of China (NSFC 81572063 und NSFC 81802076). Die Finanzierung stimmten mit Studiendesign, Datenanalyse, Manuskript Vorbereitung und Entscheidung zu veröffentlichen. Keine anderen Mittel wurde für diese Studie aufgenommen.

Diese Studie und die Verwendung von humanem Serumproben wurden von der Ethikkommission der erste Affiliated Hospital von Guangzhou Medical University (GYYY-2016-73) genehmigt. Alle Teilnehmer haben ihr schriftliche Einverständnis gegeben, selbständig oder durch ihre Eltern (bei Kindern).
1. grundlegende Informationen der Study group
Hinweis: Die Allergie-Informations-Repository von der State Key Labor von Atemwegserkrankungen (Luft-SKLRD) ist eine große Serumbank innerhalb des Guangzhou Institut of Respiratory Krankenhauses (GIRH) gegründet. In den letzten zehn Jahren initiiert, hat die Luft-SKLRD bereits begonnen zu sammeln und speichern Serumproben von Patienten mit allergischen Erkrankungen, zusammen mit ihre klinische Informationen (Tabelle 1)4,5. Die vorliegende Studie wurde mit Seren aus der Luft-SKLRD durchgeführt.
<ol><li>Suchen Sie in der Luft-SKLRD Datenbank für Sera von Januar 2015 bis Juni 2018 gesammelt und wählen Sie die Patienten mit allergischen Erkrankungen, die empfindlich auf die häufigen Allergenen in der Region gefunden wurden.</li>
	<li>Sicherstellen Sie, dass alle ausgewählte Patienten allergisch bedingte Krankheiten wie Heuschnupfen und Asthma, allergische Dermatitis oder Urtikaria, und enthält das Serum der Patienten mehrere Serum Allergen-spezifische Immunglobulin E (sIgE) Sensibilisierungen der häufigen Allergenen in dieser Region von System 1 erkannt.</li>
	<li>Patienten mit unvollständigen medizinischen Aufzeichnungen, die verlorenen zu verfolgen, wer sich weigert, Einwilligung hinsichtlich der Verwendung ihrer Serumproben für wissenschaftliche Zwecke, die mit einer festgestellten Immunschwäche, die derzeit auf Immuntherapie ausschließen oder immunmodulatorische Agenten oder diejenigen gefunden, um parasitäre Infektionen haben.</li>
	<li>Stellen Sie sicher, dass keine Behandlung oder ein Medikament Rezept vor der Serum-Sammlung gegeben wurde, um Interferenzen mit der Laborbefunde zu minimieren. Alle Serumproben, die nicht die Kriterien erfüllen, wurden abgelehnt.</li>
</ol>2. Studie fließen und Messungen von Interesse
Hinweis: Das mikrofluidischen System braucht 100 µL Serum zur Bestimmung 19 Allergene. Venöses Blut (5 mL) wurde von jedem Patienten mit einem Blut-Vakuumbehälter mit trennenden Gel gesammelt. Nach Zentrifugation für 10 min bei 1000 X g, war die obere Schicht zu Testzwecken gesammelt. Nicht verwendete Serum wurde bei-80 ° c gelagert. Vor der Prüfung, das Serum bei Raumtemperatur für 30 min gehalten wurde und wurde mit einem Vortex-Mixer erschüttert. Wiederholte Frost-Tau-Zyklen wurden vermieden.
<ol><li>In erster Linie testen die Serumproben für sIgEs auf ganze Allergene Dermatophagoides Pteronyssinus (d1), Dermatophagoides Farinae (d2), Blomia Tropicalis (d201), Katze Dander (e1), Hund Hautschuppen (e5), Bermudagras (g2), Timothy grass) G6), Schaben (i6), Aspergillus Fumigatus (m3), Candida Albicans (m5), Ambrosia (w1), Eiweiß (f1), Milch (f2), Weizen (f4), Erdnuss (f13), Sojabohne (f14), Mandel (f20), Krabben (f23) und Garnelen (f24). Folgen Sie den Anweisungen in Abschnitt 3. Hinweis: sIgE Bestimmung erfolgte mit der Allergen-spezifischen IgE Assay kit (siehe die Tabelle der Materialien) und gemessen durch ein Chemilumineszenz-Analyzer.</li>
	<li>Wählen Sie nach dem Zufallsprinzip drei Proben aus den Reihen der Proben mit genügend Serum (mindestens 900 µL) für eine Reproduzierbarkeit-Studie. Halten alle Bedingungen unverändert, die drei Sera für Allergen-sIgEs an 9 aufeinander folgenden Tagen täglich messen (d. h. insgesamt 100 x 9 = 900 µL Serum).</li>
</ol>(3) Teilautomatisierung Testverfahren des mikrofluidischen Systems
Hinweis: Das System 2 ist die Integration der automatischen mikrofluidischen Technologie, Protein Microarray Kaltlicht-Analyse, parallele IgE Analyse und Image-Processing-Technologie. Das Prüfprotokoll gliedert sich in vier Teile: Vorbereitung der Ausrüstung, Probenbeladung, Inkubation und Messung.
<ol><li>
Vorbereitung der Ausrüstung
	<ol>
<li>Schalten Sie den PC und die Analyzer macht. Hinweis: Der ein-/Ausschalter ist auf der linken Seite der Basis.</li>
		<li>Starten Sie das LabIT-Programm auf dem PC. Wenn die Dunklen Rahmen Warnungsfenster sich öffnet, klicken Sie auf "OK" , um die Dichtheitsprüfungausgeführt. Danach klicken Sie auf die Center-Logo um die Betriebsschnittstelle zu öffnen. Hinweis: Das System erinnert den Benutzer Dichtheitsprüfung ausgeführt, wenn im Standby-für mehr als 24 h Modus.</li>
		<li>Überprüfen Sie die Reaktion Temp und CCD (Charge – Coupled Device) Temp an der unteren rechten Ecke des Bildschirms. Die Reaktion Temp sollte 37 ° C ± 1 ° C in ca. 10 Minuten steigen, und die CCD-Temp sollte fallen-15 ° C ± 1 ° C.</li>
		<li>Die Dichtheitsprüfung ausgeführt, nachdem die CCD-Temp-15 ° C gesunken ± 1 ° C. Stellen Sie bevor Sie die Dichtheitsprüfung ausführen sicher, es gibt keine anderen Gegenstände im Inneren des Gerätes und schließen Sie die Tür. Klicken Sie auf Extras | Systemtest | Dichtheitsprüfung. Öffnen Sie die Tür nicht während der Prüfung. Wenn der Test abgeschlossen ist, wird das Berichtsfenster angezeigt.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
Probenaufnahme
	<ol>
<li>Den entsprechenden Reagensbehälter auf der Patrone mikrofluidischen 620 µL Waschpuffer, 120 µL blocking-Puffer, 60 µL Konjugate A und B, 60 µL Substrat A und B und 100 µL Serum Proben hinzufügen.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
Inkubation
	<ol>
<li>Klicken Sie auf Cartridge ID, verwenden Sie den Barcode-Scanner zu scannen die Seriennummer der Patrone, die Proben-ID eingeben, setzen Sie die Patrone in den Analysator und schließen Sie die Tür, und klicken Sie auf Analyzer und führen Sie , um die Analyse zu starten.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
Messung
	<ol>
<li>Nach der Messung die Ergebnisse statistischer Software (z. B. Excel) exportieren. Hinweis: Nach 30 min Inkubation der Analyzer automatisch führt die Messung und das Ergebnis berichtet.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
Abschaltung des Analyzers
	<ol>
<li>Entfernen Sie für die routinemäßige Wartung, nach Beendigung des Tests die Patrone und wischen Sie des Analyzer interne Heizung Eisen und Elektromagneten leicht mit 75 % Alkohol. Hinweis: Nicht drücken Sie stark oder schütteln Sie der Elektromagnet.</li>
		<li>Schließen Sie das Fenster LabIT. Die Temperatur-monitoring-Fenster öffnet sich. Es wird automatisch geschlossen, wenn der CCD auf den Schutzmodus 5 ° C erwärmt. Bis dahin wird es sicher zu schalten Sie den Analyzer und PC sein. Hinweis: Schließen Sie nicht manuell die Temperaturüberwachung Fenster, bevor die CCD-Temp auf 5 ° C gestiegen ist, und schalten Sie die Kraft der Analysator noch der PC nicht beim CCD Aufwärmen.</li>
	</ol>
</li>
</ol>4. Definition der sIgE Reaktivität
Hinweis: Für ein unverdünntes Serum-Probe ist die Reichweite des Systems 2 0,21 – 100 IU/mL.
<ol><li>Basierend auf den Schwellenwert von 0,35 IU/mL, betrachten Sie ein sIgE-Niveau mehr als 0,35 IU/mL positiv6,7sein. Bewerten Sie die Reaktivität der sIgE-Tests als8: Klasse 1 (≥0.35 und < 0,70 IU/mL), Klasse 2 (≥0.70 und < 3,50 IU/mL), Klasse 3 (≥3.50 und < 17,50 IU/mL), Klasse 4 (≥17.50 und < 50,00 IU/mL), Klasse 5 (≥50.00 und < 100,00 IU/mL) , und Klasse 6 (≥100.00 IU/mL).</li>
</ol>5. statistische Analyse
<ol><li>Verwenden Sie ein Histogramm zeigen die positive Rate der 19 Allergene (Abbildung 1) und Levey Jennings-Kurve um die Wiederholbarkeit der Detection System (Abbildung 2)9zeigen.</li>
	<li>Wählen Sie die drei häufigsten Inhalat Allergene und Lebensmittel-Allergene (insgesamt sechs Allergene) und vergleichen Sie die Ergebnisse, die ich System 1, seine klinische diagnostische Leistung10,11zu bewerten. Gehören Sie die Konkordanz-Rate, Empfindlichkeit, Spezifität, positiven und negativen prädiktiven Werte und die Fläche unter der Empfänger Betrieb Merkmal (ROC)-Kurve (AUC) als die Bewertungskriterien.</li>
	<li>Gelten Sie Spearman Korrelation Analyse12 um Korrelationen zwischen den beiden Systemen zu beschreiben und Kappa-Wert für Konsistenz. Kategorisieren den Kappa-Wert als fast perfekt (0,8-1,0), erhebliche (0,6-0,8), mäßig (0,4 – 0,6), Fair (0,2 – 0,4) oder Arm (< 0,2)13. Verwenden Sie SPSS 23,0 und MedCalc 11.0 statistische Analyse und definieren P < 0,05 als statistische Signifikanz.</li>
</ol>

<ol><li>Kamble, S., Bharmal, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Incremental+Direct+Expenditure+of+Treating+Asthma+in+the+United+States%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Asthma+Research%22%5BJournal%5D)">Incremental Direct Expenditure of Treating Asthma in the United States.</a> Journal of Asthma Research. 46 (1), 73-80 (2009).</li>
<li>Paganelli, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Specific+IgE+antibodies+in+the+diagnosis+of+atopic+disease.+Clinical+evaluation+of+a+new+in+vitro+test+system%2C+UniCAP%2C+in+six+European+allergy+clinics%5BTitle%5D)+AND+%22Allergy%22%5BJournal%5D)">Specific IgE antibodies in the diagnosis of atopic disease. Clinical evaluation of a new in vitro test system, UniCAP, in six European allergy clinics.</a> Allergy. 53 (8), 763-768 (1998).</li>
<li>Wang, J., Godbold, J. H., Sampson, H. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Correlation+of+serum+allergy+%28ige%29+tests+performed+by+different+assay+systems%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Allergy+and+Clinical+Immunology%22%5BJournal%5D)">Correlation of serum allergy (ige) tests performed by different assay systems.</a> Journal of Allergy and Clinical Immunology. 121 (5), 1219-1224 (2008).</li>
<li>Sun, B., Zheng, P., Wei, N., Huang, H., Zeng, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Co-sensitization+to+silkworm+moth+%28Bombyx+mori%29+and+9+inhalant+allergens+among+allergic+patients+in+Guangzhou%2C+Southern+China%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+ONE%22%5BJournal%5D)">Co-sensitization to silkworm moth (Bombyx mori) and 9 inhalant allergens among allergic patients in Guangzhou, Southern China.</a> PLoS ONE. 9 (5), e94776(2014).</li>
<li>Zeng, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Component-Resolved+Diagnostic+Study+of+Dermatophagoides+Pteronyssinus+Major+Allergen+Molecules+in+a+Southern+Chinese+Cohort%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Investigational+Allergology+%26+Clinical+Immunology%22%5BJournal%5D)">Component-Resolved Diagnostic Study of Dermatophagoides Pteronyssinus Major Allergen Molecules in a Southern Chinese Cohort.</a> Journal of Investigational Allergology & Clinical Immunology. 25 (5), 343-351 (2015).</li>
<li>Luo, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((grass+pollen+allergens+and+components+detected+in+a+southern+Chinese+cohort+of+patients+with+allergic+rhinitis+and%2For+asthma%5BTitle%5D)+AND+%22Molecular+Immunology%22%5BJournal%5D)">grass pollen allergens and components detected in a southern Chinese cohort of patients with allergic rhinitis and/or asthma.</a> Molecular Immunology. 78 (2016), 105-112 (2016).</li>
<li>Zeng, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Longitudinal+profiles+of+serum+specific+IgE+and+IgG4+to+Dermatophagoides+pteronyssinus+allergen+and+its+major+components+during+allergen+immunotherapy+in+a+cohort+of+southern+Chinese+children%5BTitle%5D)+AND+%22Molecular+Immunology%22%5BJournal%5D)">Longitudinal profiles of serum specific IgE and IgG4 to Dermatophagoides pteronyssinus allergen and its major components during allergen immunotherapy in a cohort of southern Chinese children.</a> Molecular Immunology. 74 (2016), 1-9 (2016).</li>
<li>Lee, J. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Specific+IgE+measurement+using+AdvanSure%28R%29+system%3A+comparison+of+detection+performance+with+ImmunoCAP%28R%29+system+in+Korean+allergy+patients%5BTitle%5D)+AND+%22Clinica+Chimica+Acta%22%5BJournal%5D)">Specific IgE measurement using AdvanSure(R) system: comparison of detection performance with ImmunoCAP(R) system in Korean allergy patients.</a> Clinica Chimica Acta. (9-10), 914-919 (2012).</li>
<li>Eckels, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quality+control%2C+analysis+and+secure+sharing+of+Luminex%28R%29+immunoassay+data+using+the+open+source+LabKey+Server+platform%5BTitle%5D)+AND+%22Bmc+Bioinformatics%22%5BJournal%5D)">Quality control, analysis and secure sharing of Luminex(R) immunoassay data using the open source LabKey Server platform.</a> Bmc Bioinformatics. 14 (1), 145(2013).</li>
<li>Bland, J. M., Altman, D. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Statistical+methods+for+assessing+agreement+between+two+methods+of+clinical+measurement%5BTitle%5D)+AND+%22Lancet%22%5BJournal%5D)">Statistical methods for assessing agreement between two methods of clinical measurement.</a> Lancet. 327 (8476), 307-310 (1986).</li>
<li>Carletta, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Assessing+Agreement+on+Classification+Tasks%3A+The+Kappa+Statistic%5BTitle%5D)+AND+%22Computational+Linguistics%22%5BJournal%5D)">Assessing Agreement on Classification Tasks: The Kappa Statistic.</a> Computational Linguistics. 22 (2), 249-254 (1996).</li>
<li>Shyur, S. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Determination+of+multiple+allergen-specific+IgE+by+microfluidic+immunoassay+cartridge+in+clinical+settings%5BTitle%5D)+AND+%22Pediatric+Allergy+and+Immunology%22%5BJournal%5D)">Determination of multiple allergen-specific IgE by microfluidic immunoassay cartridge in clinical settings.</a> Pediatric Allergy and Immunology. 21, 623-633 (2010).</li>
<li>Cesana, B. M., Antonelli, P., Gallazzi, E., Marino, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+measurement+methods%3A+an+endless+application+of+wrong+statistical+methods%5BTitle%5D)+AND+%22Intensive+Care+Medicine%22%5BJournal%5D)">Comparison of measurement methods: an endless application of wrong statistical methods.</a> Intensive Care Medicine. 37 (6), 1038-1040 (2011).</li>
<li>Park, K. H., Lee, J., Sim, D. W., Lee, S. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+Singleplex+Specific+IgE+Detection+Immunoassays%3A+ImmunoCAP+Phadia+250+and+Immulite+2000+3gAllergy%5BTitle%5D)+AND+%22Annals+of+Laboratory+Medicine%22%5BJournal%5D)">Comparison of Singleplex Specific IgE Detection Immunoassays: ImmunoCAP Phadia 250 and Immulite 2000 3gAllergy.</a> Annals of Laboratory Medicine. 38 (1), 23-31 (2018).</li>
<li>Teppo, H., Revonta, M., Haahtela, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Allergic+rhinitis+and+asthma+have+generally+good+outcome+and+little+effect+on+quality+of+life+-+a+20-year+follow-up%5BTitle%5D)+AND+%22Allergy%22%5BJournal%5D)">Allergic rhinitis and asthma have generally good outcome and little effect on quality of life - a 20-year follow-up.</a> Allergy. 66 (8), 1123-1125 (2011).</li>
<li>Fischer, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Prevalence+of+type+I+sensitization+to+alpha-gal+in+forest+service+employees+and+hunters%5BTitle%5D)+AND+%22Allergy%22%5BJournal%5D)">Prevalence of type I sensitization to alpha-gal in forest service employees and hunters.</a> Allergy. 72 (10), 1540-1547 (2017).</li>
<li>Li, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+multicentre+study+assessing+the+prevalence+of+sensitizations+in+patients+with+asthma+and%2For+rhinitis+in+China%5BTitle%5D)+AND+%22Allergy%22%5BJournal%5D)">A multicentre study assessing the prevalence of sensitizations in patients with asthma and/or rhinitis in China.</a> Allergy. 64 (7), 1083-1092 (2009).</li>
<li>Ahlstedt, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Understanding+the+usefulness+of+specific+IgE+blood+tests+in+allergy%5BTitle%5D)+AND+%22Clinical+%26+Experimental+Allergy%22%5BJournal%5D)">Understanding the usefulness of specific IgE blood tests in allergy.</a> Clinical & Experimental Allergy. 32 (1), 11-16 (2002).</li>
<li>Wood, R. A., Segall, N., Ahlstedt, S., Williams, P. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Accuracy+of+IgE+antibody+laboratory+results%5BTitle%5D)+AND+%22Annals+of+Allergy+Asthma+%26+Immunology%22%5BJournal%5D)">Accuracy of IgE antibody laboratory results.</a> Annals of Allergy Asthma & Immunology. 100 (2), 288-289 (2008).</li>
<li>Aberer, W., Kränke, B., Hager, A., Wick, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vitro+allergy+testing+needs+better+standardization--test+results+from+different+laboratories+lack+comparability+mostly+due+to+missing+effective+standards%5BTitle%5D)+AND+%22International+Archives+of+Allergy+%26+Immunology%22%5BJournal%5D)">In vitro allergy testing needs better standardization--test results from different laboratories lack comparability mostly due to missing effective standards.</a> International Archives of Allergy & Immunology. 108 (1), 82-88 (1995).</li>
</ol>

Die Autoren haben nichts preisgeben.

Ähnlich den Ergebnissen von vielen anderen Studien15,16,17, die Ergebnisse aus dem mikrofluidischen System basierend auf Seren von 293 allergischen Patienten zeigte, dass Haus Hausstaubmilben (einschließlich D. Pteronyssinus, D. Farinae, und B. Tropicalis) sind die wichtigsten Inhalat Allergene führt zu allergischen Erkrankungen im Süden Chinas, während für Lebensmittel, Milch, Erdnuss, Garnelen und K...

Die Prävalenz von Allergien hat in den letzten Jahrzehnten stetig zugenommen und 20-30 % der Weltbevölkerung1betrifft. Identifikation der auslösenden Allergene hat wichtige Bedeutung bei der Bewältigung von Krankheiten. In China da registrierte in-vivo Hauttests Prick nicht in dem Land stehen, in-vitro-Bestimmung des Serum-spezifischen IgE das wichtigste ist und häufig verwendetes Werkzeug für Typ-I-Allergie diagnostiziert2. Dies ist vergleichbar mit Praktiken in der westlichen Welt, aber obwohl ImmunoCAP System (System 1), ein Fluoreszenz-Enzym-linked Immunosorbentprobe Grundsystem, als der Goldstandard für in-vitro-Allergie Diagnose3wahrgenommen wird, ist seine Verwendung in China sehr begrenzt aufgrund zu seiner Ausrüstung und Reagenz Höchstkurs. Ein neues alternative Allergie-Diagnose-System mit einem hohen Preis-Leistungs-Verhältnis ist daher dringend erforderlich.
Das BioIC System (System 2) ist ein mikrofluidischen Patrone-basiertes System basiert auf dem Prinzip der Chemilumineszenz für Multiplex-Assays der Serum-spezifischen IgE. Mit einer Größe von 7 cm x 4 cm, besteht die mikrofluidischen Patrone aus drei Schichten aus Spritzguss-Kunststoff. Der obere Teil ist 3 mm starkem transparentem Polycarbonat, das guten Stabilität während der thermischen Montageprozesse trägt. Zusammen mit der 3 mm dicken Bodenschicht besteht aus einem Copolymer aus Acrylnitril, Butadien und Styrol (ABS) sandwiches es 0,5 mm starken Mittelschicht aus Silikon-Kautschuk. In der Farbe Schwarz bietet, die mittlere Schicht niedriger Hintergrund während der Chemilumineszenz-Detektion. Auf der Oberseite der Silica-Gel wird eine dünne Schicht aus Nitrozellulose-Membran (NC-Membran) gesprüht, an der Position entsprechend der Reaktionszone, wodurch das Auffinden verschiedener Allergene Proteine. Der Zweck dieser Studie ist es, die klinische Leistung des mikrofluidischen Systems zur gemultiplexten Bestimmung der Allergen-spezifischen IgE im Serum zu bewerten.

<table><tbody><tr><td>Agnitio BioIC Analysator</td><td>Agnitio Wissenschaft & Wissenschaft Technologie (Taiwan, China)</td> <td>BA-G2000</td><td></td></tr><tr><td>BioIC Allergen-spezifisches IgE-Nachweiskit</td><td>Agnitio Wissenschaft & Technologie (Taiwan, China)</td><td>DR17A12</td><td></td></tr><tr><td>BioIC Cartrideg Platzierungsplatte</td><td>Agnitio Science & Technologie (Taiwan, China)</td> <td>T20SET</td><td></td></tr><tr><td>BioIC Reagenzienspender</td><td>Agnitio Wissenschaft & Technologie (Taiwan, China)</td> <td>DS-1</td><td></td></tr><tr><td>Bild zweidimensionale Barcode-Maschine</td><td>Agnitio Science & Technologie(Taiwan, China)</td><td>NLS-HR200</td><td></td></tr><tr><td>Softwarepaket, LabIT</td><td>Agnitio Science & Technologie (Taiwan, China)</td><td>Version 2.4.12</td><td></td></tr><tr><td>VORTEX-5 Vortex-Mischer</td><td>Haimen Kylinbell Lab Lastruments Co., Ltd.</td><td>VORTEX-5</td><td></td></tr></tbody></table>

einsatz von biochip mikrofluidischen technologie zur erkennung serum allergen-spezifische immunglobulin e (sige)

Application of Biochip Microfluidic Technology to Detect Serum Allergen-specific Immunoglobulin E (sIgE)

Allergische Erkrankungen ist häufig bei Erwachsenen und Kindern. Identifikation der auslösenden Allergene ist bedeutsam in Disease-Management und Prävention. Jedoch fehlt einem spezifischen Immunglobulin E (IgE)-Mess-System mit einem hohen Preis-Leistungs-Verhältnis in der Volksrepublik China, vor allem in den Krankenhäusern der Grundversorgung. Dieses Whitepaper beschreibt Verfahren der Grundsatz und Betrieb mit einem mikrofluidischen Chemilumineszenz Patrone-basierten System, um Allergen-spezifischen IgE im Serum zu erkennen. Die Ergebnisse wurden verglichen mit denen von ImmunoCAP (System 1), der Industrie-Standard und die Reproduzierbarkeit des Systems zu erkennen, Patienten zu häufigen Allergenen sensibilisiert wird ausgewertet. Die Ergebnisse zeigten, dass im Vergleich mit ImmunoCAP (System 1), das BioIC System (System 2) gute Präzision und Feingefühl bei der Aufdeckung von Serum-spezifischen IgE gegen verschiedene Inhalat und Lebensmittel-Allergene, aber mit deutlich niedrigeren Kosten hat. Es dient als eine gute Alternative zum System 1 in Krankenhäusern der Grundversorgung in der Volksrepublik China, die geringere finanzielle Erschwinglichkeit haben.

Positive Sätze für 19 gemeinsame Allergene Die Ergebnisse auf 293 Sera sind in Abbildung 3dargestellt. Unter den Schnüffelstoffen Allergene, D. Farinae hatte die höchste positive Rate (80.89 %, 273/293), gefolgt von D. Pteronyssinus (78,84 %, 231/293). Unter den Lebensmittel-Allergene, Krabbe hat die höchste positive Rate (20,48 %, 60/293), gefolgt von 13,65 % (40/293) für Garnelen. Die Gesamt-positive-Rate von S...

Dieser Beitrag stellt ein Protokoll zum Nachweis von Serum-spezifische Immunglobulin E mit einem mikrofluidischen Patrone-basierte Chemilumineszenz-System und die Bewertung der Nützlichkeit Allergie Diagnosen.

Einsatz von Biochip mikrofluidischen Technologie zur Erkennung Serum Allergen-spezifische Immunglobulin E (sIgE)

Allergic disease is common in both adults and children. Identification of the causative allergens is significant in disease management and prevention. ...

Das mikrofluidische Technologiesystem für Biochips ist ein mikrofluidischer Abschnitt auf Kartuschenbasis, der das Chemilumineszenzprinzip für die SerumspeifIGE verwendet. Im Vergleich zu anderen Nachweismethoden haben die bioIC-Systeme die Vorteile, kostengünstig zu sein und weniger Serum zum Nachweis von Serum IGE zu benötigen. Die Implikationen dieser Technik sind in der Lage, Allergieerkrankungen wie Rhinitis und Asthma zu diagnostieren, weil viele dieser Patienten für gängige nachweisbare Allergene sensibilisiert sind.Obwohl diese Methode Einen Einblick in Atemallergien geben kann, kann sie auch auf andere Situationen wie Lebensmittel- und Hautallergien angewendet werden. Da diese Technik einfacher zu bedienen ist und eine abgesenkte Methode für die Bedienerschulung hat, können Personen, die neu im System sind, lernen, sie schnell zu verwenden. Eine lebhafte Demonstration dieser Angelegenheit ist von entscheidender Bedeutung, da die bestimmt, ob der Test erfolgreich ist und eine geschickte manuelle Bedienung erfordert.Um Serumproben auf Serum-Immunglobulin-E-Antikörper gegen ganze Allergene zu testen, wählen Sie nach dem Zufallsprinzip drei Proben mit mindestens 900 Mikroliter

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Forschung

JoVE Journal

Medicine

Medizin

Das Video zeigt einen zellbasierten Assay zum Nachweis von Anti-Aquaporin-4-Immunglobulin G unter Verwendung eines Biochips, der untransfizierte Zellen und transfizierte Zellen enthält, die Aquaporin-4 exprimieren. Diese Methode findet Anwendung bei der Diagnose von Störungen des Neuromyelitis-optica-Spektrums, was durch eine starke grüne Fluoreszenz auf dem Biochip bestätigt wird.

Ein Assay zum Nachweis von Serum-Anti-Aquaporin-4-Immunglobulin G

Dieses Video zeigt den Elektrochemilumineszenz-Nachweis von Insel-Autoantikörpern in menschlichem Serum. Die Antikörper im Serum überbrücken das Ruthenium-konjugierte Antigen mit dem biotinylierten Capture-Antigen und bilden Komplexe, die durch Elektrochemilumineszenzmessungen nachgewiesen werden.

Nachweis von humanen Insel-Autoantikörpern mittels eines Elektrochemilumineszenz-Assays

Dieses Video demonstriert ein Protokoll zum Nachweis von serumspezifischem Immunglobulin E unter Verwendung eines mikrofluidischen Kartuschen-basierten Chemilumineszenzsystems. Serum-IgEs interagieren mit unterschiedlichen Allergenen, die in der Reaktionszone der Kartusche immobilisiert sind, die anschließend mit Peroxidase-konjugierten Anti-IgE-Antikörpern und einem chemilumineszierenden Substrat nachgewiesen werden, was den gleichzeitigen Nachweis mehrerer allergenspezifischer IgE ermöglicht.

Ein mikrofluidisches kartuschenbasiertes Detektionssystem für allergenspezifisches Immunglobulin E

In diesem Artikel präsentieren wir ein Mikrofluidik-Chip für Einzelzellanalyse. Es ermöglicht die Quantifizierung der intrazellulären Proteine, Enzyme, Cofaktoren und zweiten Boten mittels Fluoreszenzassays oder Immunoassays.

Eine mikrofluidische Chip für die vielseitige chemische Analyse von Einzelzellen

Das vorgeschlagene Arbeits beurteilt die diagnostische Potential der direkten und verstärkten Oberflächenplasmonresonanz-Bildgebung (SPRi) Assays, insbesondere für den Nachweis von rekombinantem Human-Wachstumshormon in Stachelhumanserum, durch Vergleichen SPRi führt direkt mit im Handel erhältlichen Enzym-linked Immunosorbent Assay (ELISA) kit.

Vergleichende Analyse von Human Growth Hormone im Serum Mit SPRi, Nano-SPRi und ELISA-Assays

Wir beschreiben hier eine Methode zur Erzeugung anpassbarer Antigen-Microarrays, die für den gleichzeitigen Nachweis von Serum-IgG- und IgM-Autoantikörpern von Menschen und Mäusen verwendet werden können. Diese Arrays ermöglichen den quantitativen Hochdurchsatznachweis von Antikörpern gegen beliebige Antigene oder Epitope von Interesse.

Generation of Two-color Antigen-Mikroarrays für den gleichzeitigen Nachweis von IgG und IgM-Autoantikörper

Diese Arbeit beschreibt ein Protokoll, das einen komponentenaufgelösten Ansatz verwendet, um Sensibilisierung für Gräserpollenallergene in einer Kohorte von Patienten aus Südchina mit allergischer Rhinitis und / oder Asthma zu untersuchen.

Ein komponenten-aufgelöster diagnostischer Ansatz für eine Studie auf Gras-Pollen-Allergenen in chinesischen Südländer mit allergischer Rhinitis und / oder Asthma

Hier präsentierten wir die Methoden, um menschliche Insel-Autoantikörper mit Electrochemiluminescence (ECL) Assays erkennen. Das Protokoll verwendet, um vorherzusagen, Typ 1 Diabetes, kann erweitert werden, um Autoantikörper für andere Autoimmunerkrankungen zu erkennen.

Electrochemiluminescence-Assays für menschliche Insel-Autoantikörper

Diese Arbeit zeigt das Potenzial der gedruckten Glycan Array (PGA) Technologie für die Analyse von zirkulierenden Antikörper Anti-Kohlenhydrat bei Kleintieren.

Gedruckte Glycan Array: Eine sensible Technik für die Analyse des Repertoires der zirkulierenden Antikörper Anti-Kohlenhydrat in Kleintiere

In diesem Artikel beschreiben wir ein Protokoll zur Charakterisierung von T-abhängigen und T-unabhängige Immunglobulin (Ig) Isotype Antworten bei Mäusen mittels ELISA. Diese Methode verwendet, allein oder in Kombination mit Flow Cytometry wird erlauben Forschern, Unterschiede in der B-Zell-vermittelten Ig Isotype Antworten bei Mäusen nach T-abhängigen und T-unabhängige Antigen-Immunisierung zu identifizieren.

Charakterisierung der Thymus-abhängig und Thymus-unabhängige Immunglobulin Isotype Antworten bei Mäusen mit Enzym-linked Immunosorbentprobe Assay

Zellbasierte Assays ist eine weit verbreitete Methode zur Erkennung von Serum Anti-Aquaporin-4 Immunglobulin G. Diese Methode könnte auf klinische Diagnose und wissenschaftlichen Forschungen der Neuromyelitis-optisches Spektrum-Störungen angewendet werden.

Humanem Serum Anti-Aquaporin-4 Immunglobulin G Erkennung durch zellbasierte Assays

Erfahren Sie die mikrofluidische Biochip-Technologie zur Erkennung von serum-spezifischem Immunglobulin E bei Allergiediagnosen. Diese kostengünstige Methode erfordert weniger Serum und ermöglicht eine schnelle Schulung neuer Anwender.

Einsatz von Biochip mikrofluidischen Technologie zur Erkennung Serum Allergen-spezifische Immunglobulin E (sIgE)

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