Flow Cytometric Analysis of Mitochondrial Reactive Oxygen Species in Murine Hematopoietic Stem and Progenitor Cells and MLL-AF9 Driven Leukemia

Reaktive Sauerstoffspezies oder ROS sind hochreaktive Sauerstoffspezies, die von Zellen produziert werden und ihr Verhalten beeinflussen. Obwohl überschüssiges ROS kann auch weit verbreitete zelluläre Verwüstung verursachen, und in schweren Fällen, Zelltod. Daher ist die Aufrechterhaltung der ROS-Homöostase von grundlegender Bedeutung für die Zellfunktion und das Überleben.

Das hier vorgestellte Protokoll konzentriert sich auf die Messung einer bestimmten Art von ROS, die von Mitochondrien erzeugt wird, hauptsächlich als metabolisches Nebenprodukt in lebenden, normalen oder gesunden hämatopoetischen Stamm- und Vorläuferzellpopulationen sowie in Leukämiezellen aus dem Mausmodell von Blutkrebs, akuter myeloischer Leukämie oder AML. Dieses Protokoll kann auch verwendet werden, um zu bewerten, wie genetische Manipulation, wie Gen-Deletion oder Überexpression, mitochondriale ROS in mehreren gesunden und bösartigen hämatopoetischen Populationen beeinflusst. Und als Ergebnis, potenziell geben aufschlussreiche Informationen über Redux Zustand und möglicherweise den Stoffwechsel der Zellen.