Name: Invasive hämodynamische Beurteilung des rechten ventrikulären Systems und Hypoxie-induzierte pulmonale arterielle Hypertonie bei Mäusen (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2019-10-24T13:30:00.000+00:00
Duration: 4 min 54 s
Description: Lernen Sie die invasive hämodynamische Beurteilung des rechten Ventrikels und der Pulmonalarterie bei Mäusen durch offene Thoraxchirurgie. Diese Methode ermöglicht die gleichzeitige Messung von RVP und PAP für PAH-Forschung.

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Diese Forschung wird unterstützt durch das Postgraduate Education and Teaching Reform Project des Peking Union Medical College (10023-2016-002-03), den Fuwai Hospital Youth Fund (2018-F09) und den Director Fund of Beijing Key Laboratory of Pre-Clinical Research and Evaluation für kardiovaskuläre Implantatmaterialien (2018-PT2-ZR05).

Das Tierprotokoll wurde vom Institutional Animal Care and Use Committee am Fuwai Hospital, Chinese Academy of Medical Science, Peking Union Medical College (NO.0000287) überprüft und genehmigt. Die Versuchstiere wurden nach den Richtlinien des Tierschutzes in China untergebracht und gefüttert.
HINWEIS: Acht- bis 12 Wochen alte männliche C57BL-Mäuse wurden in einer Umgebung mit einem 12 h dunklen / 12 h Lichtzyklus untergebracht. Die PAH-Mäuse wurden 4 Wochen lang unter einer Sauerstoffkonzentration von 10 % untergebracht, die von einer sauerstoffgesteuerten Hypoxiekammer gehalten wurde, um pulmonale Hypertonie zu induzieren, und Kontrollmäuse wurden in Raumluft (21% Sauerstoff) unter identischen Bedingungen untergebracht. RVP- und PAP-Messungen wurden am Ende der 4 Wochen Hypoxie-Herausforderung durchgeführt.
1. Präoperative Zubereitung
<ol><li>Den Druckwandlerkatheter (Größe: 1 Fr) in 0,9% Kochsaline bei Raumtemperatur mindestens 30 min vor dem hämodynamischen Experiment einweichen.</li>
	<li>2,2,2-Tribromoethanol-Lösung mit 0,22 m Filter filtern und im 4-Grad-Kühlschrank lagern.</li>
	<li>Bereiten Sie gereinigte Operationswerkzeuge und Zubehör wie Handschuhe für die Operation vor.</li>
	<li>Bereiten Sie 10 ml 1,0% Verdauungsenzymlösung für die Katheterreinigung vor.</li>
	<li>Schließen Sie den Druckaufnehmerkatheter an ein Druckvolumensystem an.</li>
	<li>Kalibrieren Sie den Druckaufnehmer, bevor Sie Druckmessungen für jede Maus erhalten.<ol>
<li>Drehen Sie den Kalibrierknopf auf 0 mmHg und 25 mmHg, um ein Verifikationsdrucksignal an die Datenerfassungssoftware zu senden und die Kalibrierungseinstellung in der Software zu konfigurieren.</li>
		<li>Drehen Sie den Knopf auf Transducer und stellen Sie den Balance-Regler auf Null Baseline ein.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Richten Sie ein Standard-Stereomikroskop und einen temperaturgeregelten Operationstisch für Kleintiere für die Erhaltung der Körpertemperatur während der Operation ein.</li>
	<li>Richten Sie ein Lichtbeleuchtungssystem für die Mikrochirurgie ein, um genügend Licht über den Operationsbereich zu bringen.</li>
</ol>2. Open-Chest-Chirurgie und hämodynamische Messung
<ol><li>Anästhesisieren Sie Mäuse mit 250 mg/kg 2,2,2-Tribromoethanol mittels intraperitonealer Injektion( i.p.). Falls erforderlich, wiederholen Sie während des Eingriffs zusätzliche Dosen bei 1/3 bis 1/2 der ursprünglichen Dosis.</li>
	<li>Entfernen Sie Brust- und Halsfell mit einem Rasierer und Haarentfernung Lotion (Abbildung 1A, 2A).</li>
	<li>Sichern Sie jede Maus in der Supine-Position auf einem temperaturgeregelten Operationstisch für Kleintiere, um die Körpertemperatur (37 °C) während der Operation aufrechtzuerhalten.</li>
	<li>Reinigen Sie die chirurgische Stelle mit 70% Ethanal.</li>
	<li>Sobald die Anästhesie in Kraft ist, bestätigen Sie eine ausreichende Anästhesieinduktion mit einer Zehenprise.</li>
	<li>Machen Sie einen Mittellinienschnitt auf der Nackenhaut (Abbildung 1A).</li>
	<li>Sezieren Sie den Skelettmuskel mit gekrümmten Zangen und belichten Sie die Luftröhre (Abbildung 1B, 1C).</li>
	<li>Intubation durch den Mund mit einem modifizierten 22 G intravenösen Mantelkatheter durchführen. Bestätigen Sie, dass sich der Schlauch mit Zangen in der Luftröhre befindet (Abbildung 1D).</li>
	<li>Schließen Sie die Schläuche an ein kleines Tierbeatmungsgerät an. Berechnen und einstellen Sie die Atmungsrate und das Gezeitenvolumen basierend auf dem Körpergewicht gemäß der Beatmungsanleitung10. Legen Sie z. B. die Atmungsrate auf 133/min und das Gezeitenvolumen auf 180 l für eine 30 g Maus auf der Grundlage der beschriebenen Berechnung fest.</li>
	<li>Sichern Sie die Schläuche für die Belüftung mit Klebeband.</li>
	<li>Bestätigen Sie eine ausreichende Anästhesieinduktion mit einer Zehenprise.</li>
	<li>Machen Sie einen Mittellinienschnitt auf der Brusthaut und sezieren Sie vorsichtig die Brustmuskeln mit einem Kauterienwerkzeug (Abbildung 2B, 2C).</li>
	<li>Schneiden Sie das Brustbein mit einer Schere über die Mitte und belichten Sie die Brusthöhle (Abbildung 2D).</li>
	<li>Verhindern Sie Blutungen mit dem Kauteriewerkzeug während der Operation in der offenen Brust.</li>
	<li>Belichten Sie den rechten Ventrikel mit Retraktoren (Abbildung 2E).</li>
	<li>Setzen Sie den kochliniengetränkten Druckwandlerkatheter durch einen kleinen Tunnel, der mit einer 25 G Nadel erstellt wurde, in den rechten Ventrikel ein, um RVP zu messen (Abbildung 2F und Abbildung 3A, 3C).</li>
	<li>Halten Sie das Katheterkabel und kreuzen Sie die Lungenklappe koaxial mit der Lungenarterie. Beobachten Sie die Druckwellenform und erhalten Sie ein stabiles PAP-Signal (Abbildung 3B, 3D).</li>
	<li>Zeichnen Sie hämodynamische Daten mit dem Datenerfassungssystem und der Software auf.</li>
	<li>Nach den letzten Messungen, einschläfern Mäuse human durch i.p. Injektion einer Überschussdosis von 2,2,2-Tribromethanol-Lösung.</li>
	<li>Entfernen Sie den Katheter vorsichtig aus dem rechten Herzsystem und legen Sie es in eine 1 ml Spritze mit 1% Verdauungsenzymlösung.</li>
	<li>Verwenden Sie destilliertes Wasser, um den Katheter kontinuierlich sorgfältig zu spülen und in der Originalverpackung aufzubewahren.</li>
</ol>3. Datenanalyse für Hämodynamik
HINWEIS: Die hämodynamischen Daten wurden mit Hilfe der Analysesoftware11 (Materialtabelle) aufgezeichnet und analysiert.
<ol><li>Wählen Sie für jede Maus mindestens 10 kontinuierliche und stabile Taktzyklen ohne Rauschen aus, um die durchschnittlichen Daten der RVP- oder PAP-Daten für jeden Parameter zu erhalten.</li>
	<li>Verwenden Sie Student es t-test, um die normalen Luftkontroll- und Hypoxiegruppen zu vergleichen. HINWEIS: p < 0,05 wurde als statistisch signifikant angesehen. Die Daten werden als mittelwerter SD dargestellt.</li>
</ol>

<ol><li>Humbert, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Advances+in+therapeutic+interventions+for+patients+with+pulmonary+arterial+hypertension%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Advances in therapeutic interventions for patients with pulmonary arterial hypertension.</a> Circulation. 130 (24), 2189-2208 (2014).</li>
<li>Chatterjee, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Swan-Ganz+catheters%3A+past%2C+present%2C+and+future%3A+a+viewpoint%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">The Swan-Ganz catheters: past, present, and future: a viewpoint.</a> Circulation. 119 (1), 147-152 (2009).</li>
<li>Adamson, P. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((CHAMPION+trial+rationale+and+design%3A+the+long-term+safety+and+clinical+efficacy+of+a+wireless+pulmonary+artery+pressure+monitoring+system%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Cardiac+Failure%22%5BJournal%5D)">CHAMPION trial rationale and design: the long-term safety and clinical efficacy of a wireless pulmonary artery pressure monitoring system.</a> Journal of Cardiac Failure. 17 (1), 3-10 (2011).</li>
<li>Abraham, W. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Wireless+pulmonary+artery+haemodynamic+monitoring+in+chronic+heart+failure%3A+a+randomised+controlled+trial%5BTitle%5D)+AND+%22The+Lancet%22%5BJournal%5D)">Wireless pulmonary artery haemodynamic monitoring in chronic heart failure: a randomised controlled trial.</a> The Lancet. 377 (9766), 658-666 (2011).</li>
<li>Adamson, P. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Wireless+pulmonary+artery+pressure+monitoring+guides+management+to+reduce+decompensation+in+heart+failure+with+preserved+ejection+fraction%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%3A+Heart+Failure%22%5BJournal%5D)">Wireless pulmonary artery pressure monitoring guides management to reduce decompensation in heart failure with preserved ejection fraction.</a> Circulation: Heart Failure. 7 (6), 935-944 (2014).</li>
<li>Shatat, M. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Endothelial+Kruppel-like+Factor+4+modulates+pulmonary+arterial+hypertension%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Respiratory+Cell+and+Molecular+Biology%22%5BJournal%5D)">Endothelial Kruppel-like Factor 4 modulates pulmonary arterial hypertension.</a> American Journal of Respiratory Cell and Molecular Biology. 50 (3), 647-653 (2014).</li>
<li>SPR-1000 Mouse Pressure Catheter. , Available from: 
 <a target="_blank" href="https://millar.com/products/research/pressure/single-pressure-no-lumen/spr-1000">https://millar.com/products/research/pressure/single-pressure-no-lumen/spr-1000</a> (2019).</li>
<li>Tabima, D. M., Hacker, T. A., Chesler, N. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Measuring+right+ventricular+function+in+the+normal+and+hypertensive+mouse+hearts+using+admittance-derived+pressure-volume+loops%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Physiology+Heart+and+Circulatory+Physiology%22%5BJournal%5D)">Measuring right ventricular function in the normal and hypertensive mouse hearts using admittance-derived pressure-volume loops.</a> American Journal of Physiology Heart and Circulatory Physiology. 299 (6), 2069-2075 (2010).</li>
<li>Skuli, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Endothelial+deletion+of+hypoxia-inducible+factor-2alpha+%28HIF-2alpha%29+alters+vascular+function+and+tumor+angiogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22Blood%22%5BJournal%5D)">Endothelial deletion of hypoxia-inducible factor-2alpha (HIF-2alpha) alters vascular function and tumor angiogenesis.</a> Blood. 114 (2), 469-477 (2009).</li>
<li>Harvard Inspira Advanced Safety Ventilator User's Manual. , Available from: 
 <a target="_blank" href="http://www.harvardapparatus.com/media/harvard/pdf/Inspira_557058_9.pdf.">http://www.harvardapparatus.com/media/harvard/pdf/Inspira_557058_9.pdf.</a> (2019).</li>
<li>LabChart. , Available from: 
 <a target="_blank" href="https://www.adinstruments.com/products/labchart?creative=290739105773_keyword=labchart_matchtype=e_network=g_device=_gclid=CjwKCAjwxrzoBRBBEiwAbtX1n42I2S06KmccVncUHkmExU8KKOXXREyzx8bvTrxYMSze-ooE0atcbRoCliwQAvD_BwE">https://www.adinstruments.com/products/labchart?creative=290739105773_keyword=labchart_matchtype=e_network=g_device=_gclid=CjwKCAjwxrzoBRBBEiwAbtX1n42I2S06KmccVncUHkmExU8KKOXXREyzx8bvTrxYMSze-ooE0atcbRoCliwQAvD_BwE</a> (2019).</li>
<li>Marius, M. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Definitions+and+diagnosis+of+pulmonary+hypertension%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+the+American+College+of+Cardiology%22%5BJournal%5D)">Definitions and diagnosis of pulmonary hypertension.</a> Journal of the American College of Cardiology. 62 (25), 42-50 (2013).</li>
<li>Ciuclan, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+novel+murine+model+of+severe+pulmonary+arterial+hypertension%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Respiratory+and+Critical+Care+Medicine%22%5BJournal%5D)">A novel murine model of severe pulmonary arterial hypertension.</a> American Journal of Respiratory and Critical Care Medicine. 184 (10), 1171-1182 (2011).</li>
<li>Brown, R. H., Walters, D. M., Greenberg, R. S., Mitzner, W. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+method+of+endotracheal+intubation+and+pulmonary+functional+assessment+for+repeated+studies+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Applied+Physiology%22%5BJournal%5D)">A method of endotracheal intubation and pulmonary functional assessment for repeated studies in mice.</a> Journal of Applied Physiology. 87 (6), 2362-2365 (1999).</li>
<li>Chen, W. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Right+ventricular+systolic+pressure+measurements+in+combination+with+harvest+of+lung+and+immune+tissue+samples+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Right ventricular systolic pressure measurements in combination with harvest of lung and immune tissue samples in mice.</a> Journal of Visualized Experiments. (71), 50023(2013).</li>
<li>Ma, Z., Mao, L., Rajagopal, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hemodynamic+characterization+of+rodent+models+of+pulmonary+arterial+hypertension%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Hemodynamic characterization of rodent models of pulmonary arterial hypertension.</a> Journal of Visualized Experiments. (110), 53335(2016).</li>
<li>Chen, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Berberine+attenuates+hypoxia-induced+pulmonary+arterial+hypertension+via+bone+morphogenetic+protein+and+transforming+growth+factor-%CE%B2+signaling%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Cellular+Physiology%22%5BJournal%5D)">Berberine attenuates hypoxia-induced pulmonary arterial hypertension via bone morphogenetic protein and transforming growth factor-β signaling.</a> Journal of Cellular Physiology. , (2019).</li>
<li>Bueno-Beti, C., Hadri, L., Hajjar, R. J., Sassi, Y. The Sugen 5416/Hypoxia mouse model of pulmonary arterial hypertension. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aBueno-Beti%2C+C+%22Experimental+Models+of+Cardiovascular+Diseases.+Methods+in+Molecular+Biology.+vol+1816%22">Experimental Models of Cardiovascular Diseases. Methods in Molecular Biology. vol 1816</a>. Ishikawa, K. , Humana Press. New York, NY. (2018).</li>
</ol>

Die Autoren haben nichts zu verraten.

Die Trachealintubation ist der erste wichtige Schritt für Operationen in der offenen Brust. Die klassische Methode der Trachealintubation für Kleintiere, wie Ratten oder Mäuse, beinhaltet die Herstellung eines T-förmigen Schnitts auf der Luftröhre und das direkte Einsetzen von Y-Typ-Trachealschläuchen in die Luftröhre. In der Praxis stellen wir fest, dass diese Methode während der Bedienung nicht einfach ist. Der Y-Typ Trachealschlauch ist zu groß für Kleine Tiere und bildet einen Winkel mit der Luftröhre. Daher ist es s...

Pulmonale arterielle Hypertonie (PAH) ist eine chronische und schwere kardiopulmonale Erkrankung mit Erhöhung des Lungenarteriendrucks (PAP) und des rechtsventrikulären Drucks (RVP), die durch Zellproliferation und Fibrose kleiner Lungenarterien verursacht wird. 1. Lungenarterienkatheter, auch Swan-Ganz Katheter2genannt, werden häufig bei der klinischen Überwachung von RVP und PAP eingesetzt. Darüber hinaus wurde ein drahtloses PAP-Überwachungssystem klinischeingesetzt 3,4,5. Um die Krankheit für die Studie an Mäusen zu imitieren, wird eine hypoxische Umgebung verwendet, um menschliche klinische Manifestationen von PAH6zu simulieren. Bei der Bewertung von PAP bei Tieren sind große Tiere relativ einfach mit Derpulenarterienkathetern zu überwachen, die die gleiche Technik wie bei menschlichen Probanden verwenden, aber Kleintiere wie Ratten und Mäuse sind aufgrund ihrer geringen Körpergröße schwer zu beurteilen. Die hämodynamische Messung des rechten ventrikulären Systems bei Mäusen ist mit einem ultrakleinen 1 Fr Katheter7möglich. Eine Methode zur Messung von RVP und PAP bei Mäusen wurde in der Literatur8,9berichtet, aber die Methode fehlt eine detaillierte Beschreibung. RVP und PAP sind aufgrund der anatomischen Unterschiede zwischen dem linken und rechten Herzsystem schwieriger zu messen als linksventrikulärer Druck.
Um sowohl PAP- als auch RVP-Parameter in der gleichen Maus zu erhalten, beschreiben wir einen operationsbasierten Ansatz für operationenbasierte Messungen des rechten Herzens, seine Validierung mit gesunden und PAH-Mäusen und wie man die Erzeugung künstlicher Daten während der komplizierten offenen Brust vermeidet. chirurgie. Obwohl diese Technik am besten von einem gut ausgebildeten Chirurgen durchgeführt wird, hat sie den Vorteil, PAP und RVP in der gleichen Maus beurteilen zu können.

<table><tbody><tr><td>2,2,2-Tribromethanol</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>T48402-5G</td><td>Für die Anästhesie</td></tr><tr><td>Temperaturregler für Tiere</td><td>Physitemp Instruments, Inc.</td><td>TCAT-2LV</td><td>Zur Temperaturregelung</td></tr><tr><td>Präparierzange</td><td>Fine Science Tools, Inc.</td><td>11274-20</td><td>Für die Chirurgie</td></tr><tr><td>Gemini Cautery System</td><td>Gemini</td><td>GEM 5917</td><td>Für die</td></tr><tr><td>Chirurgie Intravenöser Katheter (22G)</td><td>BD Angiocath</td><td>381123</td><td>Für die Intubation</td></tr><tr><td>LabChart 7.3</td><td>ADInstruments</td><td></td><td>Für die Datenanalyse</td></tr><tr><td>Lichtbeleuchtungssystem</td><td>Olympus</td><td></td><td>Für die</td></tr><tr><td>Chirurgie Mikro-Tip Katheter</td><td>Millar Instruments, Houston, TX</td><td>SPR-1000</td><td>Für die Druckmessung</td></tr><tr><td>Millar Druck-Volumen-Systeme</td><td>Millar Instruments, Houston, TX</td><td>MVPS-300</td><td>Für die Druckmessung</td></tr><tr><td>O2-Controller und Hypoxiekammer</td><td>Biospherix</td><td>ProOx 110</td><td>Für chronische Hypoxie</td></tr><tr><td>PowerLab Datenerfassungssystem</td><td>ADInstruments</td><td>PowerLab 16/30</td><td>Für die Datenaufzeichnung</td></tr><tr><td>Schere</td><td>Fine Science Tools, Inc.</td><td>14084-08</td><td>Für die Chirurgie</td></tr><tr><td>Beatmungsgerät für Kleintiere</td><td>Harvard Apparatus</td><td>Mini-Vent 845</td><td>Für die Chirurgie</td></tr><tr><td>Stereomikroskop</td><td>Olympus</td><td>SZ61</td><td>Für</td></tr><tr><td>die Chirurgie Tape</td><td>3M</td><td></td><td>Für die Chirurgie</td></tr><tr><td>Terg-a-zyme-Enzym</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>Z273287-1EA</td><td>Für die Katheterreinigung</td></tr></tbody></table>

invasive hämodynamische beurteilung des rechten ventrikulären systems und hypoxie-induzierte pulmonale arterielle hypertonie bei mäusen

Invasive Hemodynamic Assessment for the Right Ventricular System and Hypoxia-Induced Pulmonary Arterial Hypertension in Mice

Pulmonale arterielle Hypertonie (PAH) ist eine chronische und schwere Herz-Lungen-Erkrankung. Mäuse sind ein beliebtes Tiermodell, das verwendet wird, um diese Krankheit zu imitieren. Die Bewertung des rechtsventrikulären Drucks (RVP) und des Lungenarteriendrucks (PAP) bleibt jedoch bei Mäusen technisch anspruchsvoll. RVP und PAP sind aufgrund der anatomischen Unterschiede zwischen dem linken und rechten Herzsystem schwieriger zu messen als linksventrikulärer Druck. In diesem Beitrag beschreiben wir eine stabile hämodynamische Messmethode des rechten Herzens und deren Validierung mit gesunden und PAH-Mäusen. Diese Methode basiert auf einer Operation in der offenen Brust und einer mechanischen Beatmungsunterstützung. Es ist ein kompliziertes Verfahren im Vergleich zu geschlossenen Brust-Verfahren. Während für diese Operation ein gut ausgebildeter Chirurg benötigt wird, besteht der Vorteil dieses Verfahrens darin, dass es sowohl RVP- als auch PAP-Parameter gleichzeitig erzeugen kann, so dass es ein bevorzugtes Verfahren für die Bewertung von PAH-Modellen ist.

Der Druckwandlerkatheter wurde durch einen um eine 25 G Nadel erweiterten Tunnel in den rechten Ventrikel(Abbildung 3A) eingeführt und eine typische RVP-Wellenform (Abbildung 3C) erhalten. Der Katheter wurde kontinuierlich eingestellt und langsam weiterentwickelt und in der gleichen Achse wie die Lungenarterie beim Durchlaufen der Lungenklappe gehalten (Abbildung 3B). Wenn der Druck...

Hier stellen wir ein Protokoll zur Durchführung einer invasiven hämodynamischen Beurteilung der rechten Herzkammer und der Lungenarterie bei Mäusen unter Verwendung eines Ansatzes für eine Operation in der offenen Brust vor.

Invasive hämodynamische Beurteilung des rechten ventrikulären Systems und Hypoxie-induzierte pulmonale arterielle Hypertonie bei Mäusen

Pulmonary arterial hypertension (PAH) is a chronic and severe cardiopulmonary disorder. Mice are a popular animal model used to mimic this disease. ...

Dieses Protokoll ist eine auf offener Brustchirurgie basierende hämodynamische Bewertung und es ist nützlich für die rechte ventrikuläre und pulmonale Arteriendruckbewertung bei Kleintieren wie Mäusen. Der Vorteil dieses Verfahrens ist, dass es sowohl VP- als auch PAP-Parameter gleichzeitig generieren kann. Daher ist es für DieAuswertungen von PAH-Modellen vorzuziehen.Beginnen Sie mit der Einrichtung der Ausrüstung für die Chirurgie. Den Druckmessumformerkatheter mindestens 30 Minuten vor dem hämodynamischen Experiment in 0,9% Kochatin bei Raumtemperatur einweichen. Schließen Sie dann den Katheter an ein Druckvolumensystem an.Kalibrieren Sie den Druckaufnehmer, indem Sie den Kalibrierknopf auf Null und 25 Millimeter Quecksilber drehen, um ein Verifikationsdrucksignal an die Datenerfassungssoftware zu senden, und konfigurieren Sie dann die Kalibrierungseinstellung. Drehen Sie den Knopf auf den Messumformer, und stellen Sie das Ausgleichsventil auf Null Basislinie ein. Richten Sie ein Standard-Stereomikroskop, einen temperaturgeregelten Operationstisch für Kleintiere und ein Lichtbeleuchtungssystem für die Mikrochirurgie ein.Sobald die Maus richtig anästhesisiert ist, entfernen Sie die Brust und HalsFell mit einem Rasierer und Haarentfernung Lotion. Sichern Sie die Maus in der Supine-Position auf dem temperaturgeregelten OP-Tisch. Nachdem Sie sichergestellt haben, dass die Anästhesie wirksam ist, machen Sie einen Mittellinienschnitt auf der Halshaut.Sezieren Sie den Skelettmuskel mit gekrümmten Zangen und belichten Sie die Luftröhre. Führen Sie eine Intubation durch den Mund mit einem 22 Gauge intravenösen Mantelkatheter durch, der bestätigt, dass sich der Schlauch in der Luftröhre mit Zangen befindet. Schließen Sie die Schläuche an ein kleines Tierbeatmungsgerät an und sichern Sie ihn zur Belüftung mit Klebeband.Dann machen Sie einen Mittellinienschnitt auf der Brusthaut und sezieren Sie vorsichtig den Brustmuskel mit einem Kauteriewerkzeug. Schneiden Sie das Brustbein mit einer Schere über die Mitte, und setzen Sie die Brusthöhle aus. Achten Sie darauf, Blutungen mit dem Kauteriewerkzeug zu verhindern.Setzen Sie den rechten Ventrikel mit Retraktoren aus, und legen Sie dann den mit Kochlinie getränkten Druckwandlerkatheter durch einen kleinen Tunnel ein, der mit einer 25-Spur-Nadel in den rechten Ventrikel erstellt wurde, um den rechten Venendruck (RVP) zu messen. Halten Sie das Katheterkabel und kreuzen Sie die Lungenklappe koaxial mit der Lungenarterie. Beobachten Sie die Druckwellenform und erhalten Sie einen stabilen Lungenarteriendruck oder PAP-Signal.Zeichnen Sie als Nächstes die hämodynamischen Daten mithilfe der Datenerfassungssoftware auf. Entfernen Sie den Katheter vorsichtig aus dem rechten Herzsystem und legen Sie ihn in eine Ein-Milliliter-Spritze mit 1%Verdauungsenzymlösung. Dieses Protokoll wurde erfolgreich verwendet, um RVP- und PAP-Wellenformen bei Mäusen zu erhalten, indem ein Druckwandlerkatheter in den rechten Ventrikel und die Lungenarterie eingesetzt wurde.Um die Erzeugung künstlicher Daten zu vermeiden, wurden Segmente mit Rauschen von der Datenanalyse ausgeschlossen und Korrekturen vorgenommen, wenn der Nullgehalt des Katheters abgedriftet war. RVP und PAP wurden an Mäusen mit induzierter chronischer Hypoxie gemessen, und die Ergebnisse wurden mit denen einer Kontrollgruppe verglichen. Systolischer PAP, diastolischer PAP, mittlerer PAP und rechtsventrikulärer systolischer Druck waren in der chronischen Hypoxiegruppe signifikant erhöht.Das Wichtigste, was Sie sich merken sollten, ist, den Druckwandlerkatheter sorgfältig in den rechten Ventrikel einzufügen, um schäden am Katheter zu vermeiden und zu bestätigen, dass die glatte RVP-Wellenform auf dem Bildschirm erscheint.

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Eine spezifische und schnelle Protokoll gleichzeitig zu untersuchen Funktion der rechten Herzkammer, Lungenentzündung, und die Immunantwort als Lernwerkzeug beschrieben. Video und Figuren beschreiben Physiologie und Mikrodissektion Techniken in einer organisierten Team-Ansatz, anpassungsfähig an für kleine bis große Studien verwendet werden soll.

Rechtsventrikulären systolischen Druck Messungen in Kombination mit Harvest of Lung and Immune Gewebeproben in Mäuse

Dieser Artikel enthält ein Protokoll für die echokardiographische Beurteilung der Rechtsherzgröße und Lungenhochdruck bei Mäusen. Die Anwendungen umfassen Phänotyp Bestimmung und Serienbewertung in transgenen und Toxin-induzierten Maus-Modellen der Kardiomyopathie und Lungengefäßerkrankung.

Echokardiographische Beurteilung des rechten Herzens bei Mäusen

Rechte Herzkammer (RV) Dysfunktion ist für die Pathogenese von Herz-Kreislauferkrankungen, noch begrenzt Methoden sind für die Auswertung zur Verfügung. Jüngste Fortschritte in der Ultraschall-Bildgebung eine nicht-invasive und präzise Möglichkeit zur Längs RV Studie. Hier haben wir ausführlich eine Schritt-für-Schritt-Verfahren, das eine Echokardiographie Mausmodell der RV Drucküberlastung.

Beurteilung der rechtsventrikulären Struktur und Funktion in Maus-Modell der Lungenarterie Verengung durch transthorakale Echokardiographie

Pulmonale arterielle Hypertonie (PAH) ist eine Erkrankung der Lungenarteriolen, die zu deren Obliteration und der Entwicklung eines rechtsventrikulären Versagens führt. Nagetiermodelle der PAH sind entscheidend für das Verständnis der Pathophysiologie der PAH. Hier zeigen wir die hämodynamische Charakterisierung mit Rechtsherzkatheterisierung und Echokardiographie bei Maus und Ratte.

Hämodynamische Charakterisierung von Nagetiermodellen von pulmonaler arterieller Hypertonie

Wir präsentieren Ihnen ein Protokoll rechtsventrikuläre Dysfunktion durch Induktion ARDS in ein Schwein-Modell zu schaffen. Wir demonstrieren, invasives monitoring von links und rechts, ventrikuläre Herzzeitvolumen mit Flow in der Aorta und der Lungenarterie sowie Blutdruckmessungen in der Aorta und Lungenarterie Sonden.

Invasiven hämodynamischen Monitoring der Aorten- und pulmonale Arterie Hämodynamik in einem großen Tier Modell des ARDS

Dieses Protokoll beschreibt die Induktion von pulmonaler Hypertonie (PH) bei Mäusen basierend auf der Exposition gegenüber Hypoxie und der Injektion eines VEGF-Rezeptor-Antagonisten. Die Tiere entwickeln 3 Wochen nach Beginn des Protokolls eine PH- und rechtsventrikuläre (RV) Hypertrophie. Die funktionale und morphometrische Charakterisierung des Modells wird ebenfalls dargestellt.

Induktion und Charakterisierung der pulmonalen Hypertonie bei Mäusen mit dem Hypoxia/SU5416-Modell

Hier bieten wir einen nützlichen Ansatz für die Untersuchung des Mechanismus des rechtsventrikulären Versagens. Ein bequemerer und effizienterer Ansatz zur Verengung der Lungenarterie wird mit chirurgischen Instrumenten aus dem eigenen Haus etabliert. Darüber hinaus werden Methoden zur Bewertung der Qualität dieses Ansatzes durch Echokardiographie und Katheterisierung bereitgestellt.

Induktion des rechtsventrikulären Versagens durch Lungenarterienverengung und Bewertung der rechten ventrikulären Funktion bei Mäusen

Das vorliegende Protokoll beschreibt die echokardiographische Charakterisierung der rechtsventrikulären Morphologie und Funktion in einem Rattenmodell der pulmonalen arteriellen Hypertonie.

Umfassende echokardiographische Beurteilung der Funktion des rechten Ventrikels in einem Rattenmodell der pulmonalen arteriellen Hypertonie

Dieses Protokoll bietet ein schrittweises Verfahren zur Durchführung der mehrfachen intravenösen Bolusdosisverabreichung und invasiven hämodynamischen Überwachung bei Mäusen. Forscher können dieses Protokoll für zukünftiges therapeutisches Wirkstoff-Screening auf pulmonalarterielle Hypertonie verwenden.

Multiple intravenöse Bolusdosierung und invasive hämodynamische Beurteilung in einem Hypoxie-induzierten Mausmodell für pulmonalarterielle Hypertonie

Die Präsentation detaillierter Methoden zur Bewertung der Funktion des rechten Ventrikels wird die Qualität und Zuverlässigkeit der Forschung zur pulmonalen Hypertonie verbessern, einen robusten Rahmen für zukünftige Studien bieten und die Reproduzierbarkeit in verschiedenen Laboratorien verbessern.

Evaluierung der rechtsventrikulären Funktion in experimentellen Modellen der pulmonalen arteriellen Hypertonie

Lernen Sie die invasive hämodynamische Beurteilung des rechten Ventrikels und der Pulmonalarterie bei Mäusen durch offene Thoraxchirurgie. Diese Methode ermöglicht die gleichzeitige Messung von RVP und PAP für PAH-Forschung.

Invasive hämodynamische Beurteilung des rechten ventrikulären Systems und Hypoxie-induzierte pulmonale arterielle Hypertonie bei Mäusen (Video) | JoVE Journal

Invasive hämodynamische Beurteilung des rechten ventrikulären Systems und Hypoxie-induzierte pulmonale arterielle Hypertonie bei Mäusen

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