Name: Betrieb der transversalen Aortenverengung mit resorbierbarer Naht zur Erlangung einer transienten Myokardhypertrophie (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2020-09-09T14:45:00.000+00:00
Duration: 7 min 2 s
Description: Lernen Sie die transversale Aortenverengung mit resorbierbarer Naht zur Erzeugung transienter Myokardhypertrophie bei Mäusen. Diese verbesserte Methode ermöglicht die Untersuchung von Hypertrophie-Regressionsmechanismen mit geringerer Operationsmortalität.

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Diese Arbeit wurde durch Stipendien der National Natural Science Foundation of China (81770271; an Y, Liao), die Joint Funds der National Natural Science Foundation of China (U1908205; to Y, Liao) und die Municipal Planning Projects of Scientific Technology of Guangzhou (201804020083; an Dr. Liao) unterstützt.

Alle Verfahren wurden gemäß den Richtlinien der Pflege und Verwendung von Labortieren durchgeführt, die von den US National Institutes of Health (NIH-Publikation Nr. 85-23, überarbeitet 1996) veröffentlicht wurden. C57BL/6J männliche Mäuse (8–10 Wochen, 20–25 g) wurden vom Animal Center der South Medical University zur Verfügung gestellt.
1. Präoperative Zubereitung
<ol><li>Drücken Sie die Spitze einer 25 G Nadel mit einem Nadelhalter ab und stumpfen Sie sie mit einem harten Gegenstand wie dem Halter ab.</li>
	<li>Führen Sie eine 5:0-Absorber-Naht durch die Nadel und kurven Sie sie dann mit einem Halter13auf 90°. HINWEIS: Nach verschiedenen Forschungszwecken konnten die Forscher resorbierbare Linien mit unterschiedlicher Absorptionszeit auswählen. In diesem Protokoll haben wir eine 2-wöchige resorbierbare Naht verwendet, um den Aortenbogen zu verengen.</li>
	<li>Biegen Sie eine weitere 25 G Nadel auf 120° und glätten Sie die Spitze mit einem Halter, der als Abstandshalter im Ligationsschritt verwendet werden soll. HINWEIS: Eine 25 G Nadel wurde als Abstandsraum für Mäuse mit Körpergewicht (BW) >25 g verwendet. Verwenden Sie eine 26 G Nadel für Mäuse mit 19–24 g BW.</li>
	<li>Desinfizieren Sie die Einsatzstelle mit 75% Alkohol.</li>
	<li>Stellen Sie die Heizkissentemperatur auf 37 °C ein.</li>
	<li>Bereiten Sie sterilisierte chirurgische Instrumente (einschließlich 1 Augenschere, 1 Mikroschere, 2 mikrochirurgische Ellbogenpinzette, 1 Nadelhalter und 1 Mikronadelhalter) vor.</li>
</ol>2. Induktion von Anästhesie und Rasur
<ol><li>Anästhetisieren Sie eine Maus durch intraperitoneale Injektion einer Mischung aus Xylazin (5 mg/kg) und Ketamin (100 mg/kg) in Einer Salinelösung (0,9% NaCl) verdünnt. Bestätigen Sie die vollständige Anästhesie mit dem negativen Pedalentzugsreflex.</li>
	<li>Halten Sie die Maus in Supine-Position, indem Sie die Schneidezähne mit einer Naht befestigen und die Gliedmaßen mit Klebebändern fixieren.</li>
	<li>Tragen Sie Enthaarungscreme auf, um Haare am Hals und Xiphoid zu entfernen. Desinfizieren Sie den Bereich mit Jod gefolgt von 75% Alkohol.</li>
</ol>3. Chirurgie
<ol><li>Machen Sie einen Schnitt über 10 mm an der Mittellinie Position zwischen supra-sternal Kerbe und Brust mit einem Skalpell. Dann trennen Sie die Haut und die oberflächliche Faszien.</li>
	<li>Identifizieren Sie den ersten interkostalen Raum, indem Sie die Rippen aus dem Sternwinkel zählen. Führen Sie den Schnitt im ersten interkostalen Raum und so nah wie möglich am Brustbein aus. Durchdringen Sie es mit einer Ellbogenpinzette, um diesen Raum zu öffnen.</li>
	<li>Trennen Sie das Parenchym und den Thymus vorsichtig, bis der Queraortenbogen sichtbar ist. HINWEIS: Beschädigen Sie die parietale Pleura nicht, um Pneumothorax zu vermeiden.</li>
	<li>Passieren Sie die 5:0-Absorber-Naht unter dem Aortenbogen zwischen der brachiocephalen Arterie und der linken gemeinsamen Halsschlagader mit einer Riegelnadel14. Bitte stellen Sie sicher, dass die brachiocephalische Arterie, die linke gemeinsame Halsschlagader und die linke subklavische Arterie im Operationsfeld sichtbar sind.</li>
	<li>Legen Sie den Abstandsabstand, in Schritt 1.3 vorbereitet, auf die Queraorta und führen Sie einen doppelten Knoten auf dem Abstandsraum mit der Naht in Schritt 3.4 aus. HINWEIS: Die Spitze des Abstandsraums muss stumpf sein, um zu vermeiden, dass die Queraorta beim Entfernen beschädigt wird.</li>
	<li>Entfernen Sie den Abstandsabstand schnell, aber schonend, und schneiden Sie dann die Enden der Naht.</li>
	<li>Schließen Sie den ersten interkostalen Raum und die Haut mit 5:0 Nylon Nähte. Desinfizieren Sie die Haut erneut mit 75% Alkohol.</li>
	<li>Legen Sie die Maus auf das Heizkissen, um die Erholung zu fördern. Buprenorphin (0,1 mg/kg, q12h) in die ersten 3 Tage nach der Operation intraperitoneal injizieren.</li>
	<li>Bringen Sie die Maus in einem 12 h hellen/dunklen Zyklusraum in den Käfig zurück, wenn sie das Bewusstsein wiedererlangt.</li>
	<li>Führen Sie Eine Scheinoperation durch, die mit allen oben genannten Schritten identisch ist, jedoch ohne die Verengung (Schritt 3.5).</li>
	<li>Führen Sie eine Operation für die Seidennahtgruppe durch, die mit allen oben genannten Schritten identisch ist, aber in Schritt 1.2 mit einer 5:0-Seidennaht verwendet wird.</li>
</ol>4. Echokardiographische Bewertung erfolgreicher Ligation und Messungen
<ol><li>Führen Sie die echokardiographische Bewertung am Tag (D) 7 nach der Operation durch.</li>
	<li>Anästhesisieren Sie die Maus mit 3% Isofluran durch Inhalation zur Induktion und 1,5% zur Aufrechterhaltung der Anästhesietiefe mit einer Sauerstoffdurchflussrate von 0,5–1 l/min.</li>
	<li>Legen Sie die Maus in Supine-Position auf der Plattform, bei 37 °C gehalten, und klebe ihre Gliedmaßen an die Elektrode.</li>
	<li>Entfernen Sie das Brusthaar mit einer Enthaarungscreme und tragen Sie Ultraschall-Kupplungsmittel auf die Brust der Maus auf.</li>
	<li>Bewerten Sie die transversale Aortenverengung mit einer 30-MHz-Sonde.<ol>
<li>Neigen Sie die Plattform ganz links. Halten Sie die Sonde in vertikaler Position und senken Sie sie auf der Brust entlang der rechten parasternalen Linie. Bearbeiten Sie dann x-Achse und Y-Achse unter B-Modus, bis der Aortenbogen deutlich sichtbar ist.</li>
		<li>Suchen Sie die Verengung durch den B-Modus, um die Aortenbogenansicht11zu erhalten. Verwenden Sie den Farb-Doppler-Modus und die gepulste Welle, um die Spitzenströmungsgeschwindigkeit zu messen und Mäuse mit einer Geschwindigkeit von mehr als 3.000 mm/s als TAC-Gruppe auszuwählen (Werte basieren auf Vorversuchen).</li>
		<li>Berechnen Sie den Druckgradienten gemäß der modifizierten Version von Bernoullis Gleichung11: Druckgradient = 4 x Vmax2. HINWEIS: Der ideale Druckgradient für transversale Aortenverengungsmodelle reicht von 40–80 mmHg11.</li>
		<li>Speichern Sie die Daten und Bilder mit Cine Store und Frame Store.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Bewerten Sie Abmessungen und Kontraktilität von linksventrikulärer (LV) mit einer 30 MHz Sonde.<ol>
<li>Setzen Sie die Plattform auf die horizontale Position zurück. Halten Sie die Sonde gegen den Uhrzeigersinn relativ zur linken parasternalen Linie bei 30° gegenüber dem Uhrzeigersinn.</li>
		<li>Verwenden Sie den B-Modus und bearbeiten Sie X und Y, um eine klare und langgestreckte Achsenansicht des Herzens zu erhalten.</li>
		<li>Drücken Sie den M-Modus, um die Indikatorlinie anzuzeigen. Erfassen Sie Bilder mit Cine Store und Frame Store zur späteren Messung der LV-Kammerabmessung, bruchfraktionelle Verkürzung und LV-Wanddicke.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Sobald fertig, stoppen Isofluran inhalation und lassen Sie die Maus von der Anästhesie zu erholen. Dann kehren Sie das Tier in einem 12 h hellen/dunklen Fahrradraum in seinen Käfig zurück.</li>
	<li>Wiederholen Sie auf D14 und D28 nach der Operation die obigen Schritte, um die Herzparameter zu messen, und ernten Sie dann das Herz für histologische Studien.</li>
</ol>

<ol><li>Murry, C. E., Jennings, R. B., Reimer, K. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Preconditioning+with+ischemia%3A+a+delay+of+lethal+cell+injury+in+ischemic+myocardium%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Preconditioning with ischemia: a delay of lethal cell injury in ischemic myocardium.</a> Circulation. 74 (5), 1124-1136 (1986).</li>
<li>Ban, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Phosphatidylinositol+3-kinase+gamma+is+a+critical+mediator+of+myocardial+ischemic+and+adenosine-mediated+preconditioning%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation+Research%22%5BJournal%5D)">Phosphatidylinositol 3-kinase gamma is a critical mediator of myocardial ischemic and adenosine-mediated preconditioning.</a> Circulation Research. 103 (6), 643-653 (2008).</li>
<li>Wu, Z. K., Iivainen, T., Pehkonen, E., Laurikka, J., Tarkka, M. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ischemic+preconditioning+suppresses+ventricular+tachyarrhythmias+after+myocardial+revascularization%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Ischemic preconditioning suppresses ventricular tachyarrhythmias after myocardial revascularization.</a> Circulation. 106 (24), 3091-3096 (2002).</li>
<li>Hausenloy, D. J., Yellon, D. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Preconditioning+and+postconditioning%3A+underlying+mechanisms+and+clinical+application%5BTitle%5D)+AND+%22Atherosclerosis%22%5BJournal%5D)">Preconditioning and postconditioning: underlying mechanisms and clinical application.</a> Atherosclerosis. 204 (2), 334-341 (2009).</li>
<li>Heusch, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Molecular+basis+of+cardioprotection%3A+signal+transduction+in+ischemic+pre-%2C+post-%2C+and+remote+conditioning%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation+Research%22%5BJournal%5D)">Molecular basis of cardioprotection: signal transduction in ischemic pre-, post-, and remote conditioning.</a> Circulation Research. 116 (4), 674-699 (2015).</li>
<li>Lund, O., Emmertsen, K., Dorup, I., Jensen, F. T., Flo, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Regression+of+left+ventricular+hypertrophy+during+10+years+after+valve+replacement+for+aortic+stenosis+is+related+to+the+preoperative+risk+profile%5BTitle%5D)+AND+%22European+Heart+Journal%22%5BJournal%5D)">Regression of left ventricular hypertrophy during 10 years after valve replacement for aortic stenosis is related to the preoperative risk profile.</a> European Heart Journal. 24 (15), 1437-1446 (2003).</li>
<li>Rockman, H. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Segregation+of+atrial-specific+and+inducible+expression+of+an+atrial+natriuretic+factor+transgene+in+an+in+vivo+murine+model+of+cardiac+hypertrophy%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+National+Academy+of+Sciiences+of+the+United+States+of+America%22%5BJournal%5D)">Segregation of atrial-specific and inducible expression of an atrial natriuretic factor transgene in an in vivo murine model of cardiac hypertrophy.</a> Proceedings of the National Academy of Sciiences of the United States of America. 88 (18), 8277-8281 (1991).</li>
<li>Wei, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Myocardial+hypertrophic+preconditioning+attenuates+cardiomyocyte+hypertrophy+and+slows+progression+to+heart+failure+through+upregulation+of+S100A8%2FA9%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Myocardial hypertrophic preconditioning attenuates cardiomyocyte hypertrophy and slows progression to heart failure through upregulation of S100A8/A9.</a> Circulation. 131 (17), 1506-1517 (2015).</li>
<li>Huang, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ultrasound+biomicroscopy+validation+of+a+murine+model+of+cardiac+hypertrophic+preconditioning%3A+comparison+with+a+hemodynamic+assessment%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Physiology.+Heart+and+Circulatory+Physiology%22%5BJournal%5D)">Ultrasound biomicroscopy validation of a murine model of cardiac hypertrophic preconditioning: comparison with a hemodynamic assessment.</a> American Journal of Physiology. Heart and Circulatory Physiology. 313 (1), 138-148 (2017).</li>
<li>Oka, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cardiac-specific+deletion+of+Gata4+reveals+its+requirement+for+hypertrophy%2C+compensation%2C+and+myocyte+viability%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation+Research%22%5BJournal%5D)">Cardiac-specific deletion of Gata4 reveals its requirement for hypertrophy, compensation, and myocyte viability.</a> Circulation Research. 98 (6), 837-845 (2006).</li>
<li>Li, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Assessment+of+cardiac+morphological+and+functional+changes+in+mouse+model+of+transverse+aortic+constriction+by+echocardiographic+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Assessment of cardiac morphological and functional changes in mouse model of transverse aortic constriction by echocardiographic imaging.</a> Journal of Visualized Experiments. (112), e54101(2016).</li>
<li>Veldhuizen, R. A., Slutsky, A. S., Joseph, M., McCaig, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+mechanical+ventilation+of+isolated+mouse+lungs+on+surfactant+and+inflammatory+cytokines%5BTitle%5D)+AND+%22The+European+Respiratory+Journal%22%5BJournal%5D)">Effects of mechanical ventilation of isolated mouse lungs on surfactant and inflammatory cytokines.</a> The European Respiratory Journal. 17 (3), 488-494 (2001).</li>
<li>Wang, Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Induction+of+right+ventricular+failure+by+pulmonary+artery+constriction+and+evaluation+of+right+ventricular+function+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Induction of right ventricular failure by pulmonary artery constriction and evaluation of right ventricular function in mice.</a> Journal of Visualized Experiments. (147), e59431(2019).</li>
<li>Eichhorn, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+closed-chest+model+to+induce+transverse+aortic+constriction+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">A closed-chest model to induce transverse aortic constriction in mice.</a> Journal of Visualized Experiments. (134), e57397(2018).</li>
<li>Tavakoli, R., Nemska, S., Jamshidi, P., Gassmann, M., Frossard, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Technique+of+minimally+invasive+transverse+aortic+constriction+in+mice+for+induction+of+left+ventricular+hypertrophy%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Technique of minimally invasive transverse aortic constriction in mice for induction of left ventricular hypertrophy.</a> Journal of Visualized Experiments. (127), e56231(2017).</li>
</ol>

Die Autoren haben nichts zu verraten.

Es gibt immer noch einen weit untererforschten Bereich der kardialen nicht-ischämischen Vorbedingungen. Basierend auf unseren früheren Studien haben wir auf resorbierbare Nähte umgestellt, um das myokarde hypertrophe Vorkonditionierungsmodell zu verbessern.
In früheren Berichten verwendeten viele Forscher Seidennaht, um den Aortenbogen8,14,15zu verengen. Seidennaht war leicht verfügbar und wurde oft f...

Ischämische Vorbedingung ist ein Phänomen, das kurze nicht-tödliche Episoden von Ischämie und Reperfusion ins Herz induziert und die Fähigkeit hat, Die Myokardverletzung drastisch zu reduzieren1. Angesichts der offensichtlichen klinischen Implikationen der ischämischen Vorbedingungen, wie die Begrenzung des Myokardinfarkts Größe2 und die Unterdrückung ventrikulärer Tachyarrhythmien nach myokarddialer Revaskularisation3,gab es viele Forschungen, um die Mechanismen zu sezieren, die kardioprotektive Effekte durch Vorkonditionierung4,5induziert. Im Gegensatz dazu haben andere nicht-ischämische Arten der Vorkonditionierung relativ wenig Beachtung gefunden. Herzhypertrophie kann bei Patienten mit Aortenstenose stumpf werden, die aortenklappenersatz durchläuft6. Wo immer der Zustand der pathologischen Myokardhypertrophie existiert, wird das Prinzip der Vorkonditionierung selten gemeldet.
1991 erstellten Rockman et al. zunächst ein Mausmodell der linksventrikulären Hypertrophie durch transversale Aortenverengung (TAC)7. Durch die zweimalige Durchführung von TAC bei Mäusen haben wir zuvor bewiesen, dass myokardiale hypertrophe Vorbedingungen (MHP) zu einer transienten hypertrophen Stimulation im Herzen führen und dadurch das Herz in Zukunft resistenter gegen anhaltenden hypertrophen Stress machen8. Die Eigenschaften des MHP-Modells wurden durch Ultraschall-Biomikroskop und hämodynamische Bewertung9validiert. Die wichtigsten Punkte bei der Konstruktion des Modells waren die dreimale Thorakotomie, die TAC für eine Woche, das Entbanden für eine Woche und die sekundäre TAC für 6 Wochen. Allerdings kann die Entbupinierung Blutungen verursachen, was es schwierig machte, von Anfängern gemeistert zu werden und schwer populär zu werden. Darüber hinaus ist es auch eine technische Herausforderung, Mäuse zu intubieren. Unsachgemäße Intubation kann Trachealverletzungen, Pneumothorax und sogar den Tod bei Mäusen verursachen. Daher ist es notwendig und wertvoll, einige Verfahren beim Erstellen des MHP-Modells zu verbessern.
Um die Schwierigkeit des Modells zu reduzieren und seinen Erfolg zu steigern, haben wir für die erste TAC auf resorbierbare Nähte umgestellt und den Erfolg des Modells überwacht, indem wir den Druckgradienten über die Aortenverengung unter echokardiographie10gemessen haben. Basierend auf unserem vorläufigen Experiment wäre es schwierig, bei Mäusen mit einem zu niedrigen Druckgradienten eine ausreichende Myokardhypertrophie auszulösen, während Mäuse mit einem zu hohen Druckgradienten eine akute Herzinsuffizienz entwickeln oder sogar sterben würden. Der ideale Druckgradient für das Modell reicht von 40–80 mmHg11. Darüber hinaus stützte sich dieses Experiment nicht auf ein Beatmungsgerät, das effektiv beatmungsbezogene technische Manipulationen und Verletzungen vermeiden konnte12.

<table><tbody><tr><td>Resorbierbares Nahtmaterial (5-0)</td><td>Shandong Kang Lida Medical Products Co., Ltd</td><td>5-0</td><td>Ligatur</td></tr><tr><td>Ultraschallsystem für Tiere VEVO2100</td><td>Visual Sonic</td><td>VEVO2100</td><td>Echokardiographie</td></tr><tr><td>Kaltlichtbeleuchtung</td><td>Olympus</td><td>ILD-2</td><td>Light</td></tr><tr><td>Heat Pad - thermostatisches chirurgisches System (ALC-HTP-S1)</td><td>SHANGHAI ALCOTT BIOTECH CO</td><td>ALC-HTP-S1</td><td>Heizung</td></tr><tr><td>Isofluran</td><td>RWD Life Science</td><td>R510-22</td><td>Inhalationsmittel Anästhesie</td></tr><tr><td>Matrx VIP 3000 Isofuran Vaporizer</td><td>Midmark Corporation</td><td>VIP 3000</td><td>Anästhesie</td></tr><tr><td>Medizinische Nylonnaht (5-0)</td><td>Ningbo Medical Needle Co.</td><td>5-0</td><td>Schließen Sie die</td></tr><tr><td>Haut Pentobarbital-Natriumsalz</td><td>Merck</td><td>25MG</td><td>Anästhesie</td></tr><tr><td>Präzisionswaage Elektronische Präzisionswaage</td><td>Denver Instrument</td><td>TB-114</td><td>Wiegesensor</td></tr><tr><td>Selbstgemachter Abstandshalter</td><td></td><td></td><td>25-Gauge-Nadel</td></tr><tr><td>Seidennaht (5-0)</td><td>Yangzhou Yuankang Medical Devices Co., Ltd.</td><td>5-0</td><td>Ligatur</td></tr><tr><td>Mikrochirurgie für Kleintiere</td><td>Napox</td><td>MA-65</td><td>Chirurgische Instrumente</td></tr><tr><td>Transmission Gel</td><td>Guang Gong pai</td><td>250ML</td><td>Echokardiographie</td></tr><tr><td>Veet Haarentfernungscreme</td><td>Reckitt Benchiser</td><td>RQ/B 33 Typ 2</td><td>Entfernen Sie Haare von Mäusen</td></tr><tr><td>Vertikaler automatischer elektrothermischer Druckdampfsterilisator</td><td>Hefei Huatai Medical Equipment Co.</td><td>LX-B50L</td><td>Automatische Reinigung der chirurgischen Instrumente</td></tr></tbody></table>

betrieb der transversalen aortenverengung mit resorbierbarer naht zur erlangung einer transienten myokardhypertrophie

Operating Transverse Aortic Constriction with Absorbable Suture to Obtain Transient Myocardial Hypertrophy

Basierend auf zweimal transversalen Aortenverengungen (TACs) bei Mäusen ist nachgewiesen, dass myokardiale hypertrophe Vorbedingungen (MHP) die Kardiomyozytenhypertrophie dämpfen und das Fortschreiten der Herzinsuffizienz verlangsamen können. Für Anfänger ist das MHP-Modell jedoch in der Regel recht schwierig zu etablieren, da die technischen Hindernisse im Beatmungsbetrieb, das wiederholte Öffnen der Brust und die Blutung durch Entbandierung auftreten. Um dieses Modell zu erleichtern, die chirurgische Erfolgsrate zu erhöhen und die Inzidenz von Blutungen zu reduzieren, haben wir für die erste TAC-Kämmung mit einer lüfterfreien Technik auf resorbierbare Nähte umgestellt. Mit einer 2-wöchigen resorbierbaren Naht, Wir zeigten, dass dieses Verfahren erhebliche Myokardhypertrophie in 2 Wochen verursachen kann; und 4 Wochen nach der Operation wurde die Myokardhypertrophie fast vollständig auf die Grundlinie zurückgefallen. Mit diesem Protokoll konnten die Bediener das MHP-Modell problemlos mit einer geringeren Betriebssterblichkeit beherrschen.

In dieser Studie teilten wir nach dem Zufallsprinzip 45 Mäuse in drei Gruppen ein, die Scheingruppe, die Seidennahtgruppe und die resorbierbare Nahtgruppe (die Anzahl jeder Gruppe auf D0 (Basis), D14 und D28 nach TAC war 15, 10 bzw. 5). Auf D7, D14, D21 und D28 nach der Operation wurde die verengte Spitzengeschwindigkeit durch Echokardiographie bestimmt. Wir fanden heraus, dass die Durchblutungsgeschwindigkeit an der Verengung in der zweiten Woche nach DER TAC immer noch größer als 3.000 mm/s war, obwohl eine resorbierba...

Dieses Protokoll stellt eine verbesserte Methode zur Erlangung einer transienten myokardischen Hypertrophie mit resorbierbarer Naht dar, die nach dem Entfernen der Drucküberlastung eine abnehmende linksventrikuläre Hypertrophie simuliert. Es könnte für die Studien über myokardische hypertrophe Vorbedingungen wertvoll sein.

Betrieb der transversalen Aortenverengung mit resorbierbarer Naht zur Erlangung einer transienten Myokardhypertrophie

Based on twice transverse aortic constrictions (TACs) in mice, it is proved that myocardial hypertrophic preconditioning (MHP) could attenuate ...

Dieses Protokoll stellt eine verbesserte Methode zur Erlangung einer transienten Myokardhypertrophie unter Verwendung resorbierbarer Nähte dar, die die Abnahme der linksventrikulären Hypertrophie nach Beseitigung der Drucküberlastung stimuliert. Mit diesem Protokoll können die Forscher das Modell mit einer geringeren Operationssterblichkeit leicht beherrschen. Xiaoxia Huang, eine Technikerin aus meinem Labor, wird das Verfahren vorführen.Beginnen Sie damit, die Spitze einer 25-Gauge-Nadel mit einem Nadelhalter abzukneifen und abzustumpfen. Führen Sie dann ein resorbierbares Nahtmaterial 5/0 durch diese Nadel und krümmen Sie die stumpfe Nadel mit dem Halter in einem 90-Grad-Winkel. Kneifen Sie die Spitze einer weiteren 25-Gauge-Nadel ab, biegen Sie sie dann in einen 120-Grad-Winkel und glätten Sie die Spitze mit einem Halter, der als Abstandshalter im Ligaturschritt verwendet wird.Bereiten Sie sterilisierte chirurgische Instrumente vor, darunter eine Augenschere, eine Mikroschere, zwei mikrochirurgische Ellbogenpinzetten, einen Nadelhalter und einen Mikronadelhalter. Um die Operation zu beginnen, bestätigen Sie die vollständige Anästhesie der Maus mit dem Pedalrückzugsreflex. Halten Sie die Maus in Rückenlage, indem Sie die Schneidezähne mit einer Naht fixieren und die Gliedmaßen mit Klebeband fixieren.Entfernen Sie die Haare im Nacken und desinfizieren Sie den Bereich mit Jod und 75% Alkohol. Beginnen Sie die Operation mit einem Schnitt von mehr als 10 Millimetern in der Mittellinienposition zwischen der suprasternalen Kerbe und der Brust. Trennen Sie dann die Haut und die oberflächlichen Faszien.Machen Sie einen Schnitt im ersten Interkostalraum so nah wie möglich am Brustbein und dringen Sie stumpf ein, um diesen Raum mit einer Ellbogenpinzette zu öffnen. Trennen Sie vorsichtig das Parenchym und den Thymus, bis der Querbogen der Aorta sichtbar ist. Führen Sie eine resorbierbare 5/0-Naht unter dem Aortenbogen zwischen der Arteria brachiocephalica und der linken Arteria carotis communis mit einer Riegelnadel ein.Legen Sie den zuvor vorbereiteten Abstandshalter auf die Querschlagader und machen Sie mit der Naht einen Doppelknoten auf dem Abstandshalter. Entfernen Sie vorsichtig, aber schnell den Abstandshalter und schneiden Sie die Enden der Naht ab. Verschließen Sie den ersten Interkostalraum und die Haut mit 5/0 Nylonnähten.Desinfizieren Sie die Haut erneut mit 75% Alkohol. Sieben Tage nach der Operation bringen Sie die Maus in Rückenlage, halten Sie sie bei 37 Grad Celsius und kleben Sie ihre Gliedmaßen an die Elektrode. Entfernen Sie die Brusthaare und tragen Sie ein Ultraschall-Haftvermittler auf die Brust der Maus auf.Greifen Sie dann mit einer 30-Megahertz-Sonde auf TAC zu. Neige die Plattform ganz nach links. Halten Sie die Sonde in vertikaler Position und senken Sie sie auf der Brust entlang der rechten parasternalen Linie ab.Stellen Sie die X- und Y-Achse im B-Modus ein, bis der Aortenbogen und die Einengung deutlich sichtbar sind. Messen Sie im Doppler-Modus die Spitzengeschwindigkeit, die Abmessungen und die Kontraktilität des linken Ventrikels. Wählen Sie die Mäuse mit einer Geschwindigkeit von mehr als 3000 Millimetern pro Sekunde als TAC-Gruppe aus.Beurteilen Sie mit einer 30-Megahertz-Sonde die linksventrikulären Abmessungen und die Kontraktilität. Setzen Sie die Plattform in die horizontale Position zurück und halten Sie die Sonde in einem Winkel von 30 Grad gegen den Uhrzeigersinn zur linken parasternalen Linie. Erhalten Sie eine kurze Achsenansicht des Herzens, indem Sie die X- und Y-Achse im B-Modus bearbeiten.Drücken Sie dann den M-Modus, um die Indikatorlinie anzuzeigen und Bilder mit Cine Store und Frame Store aufzunehmen, um später die LV-Kammerabmessung, die fraktionelle Verkürzung und die LV-Wandstärke zu messen. Die Pulswellen-Doppler-Bildgebung, die nach 14 Tagen TAC durchgeführt wurde, zeigte, dass die Blutflussgeschwindigkeit an der Verengung mehr als 3000 Millimeter pro Sekunde betrug, obwohl eine resorbierbare Naht zur Verengung des Aortenbogens verwendet worden war. Der Druckgradient des Blutflusses nach 14 Tagen TAC wurde über 40 Millimeter Quecksilbersäule gehalten.Interessanterweise gab es in der vierten Woche nach der Operation keine Einengung, was darauf hindeutet, dass das resorbierbare Nahtmaterial vollständig resorbiert worden war. Hier sind die linksventrikulären Parameter in der Seidennahtgruppe und der Gruppe mit resorbierbarem Naht an den Tagen null, 14 und 28 nach TAC in der M-Mode-Bildgebung dargestellt. Am Tag 14 nach der TAC nahm die linksventrikuläre Hinterwanddicke an der Enddiastole zu, während der linksventrikuläre Innendurchmesser an der Enddiastole leicht abnahm.Die Ejektionsfraktion des linken Ventrikels wurde durch die Verwendung von resorbierbaren Nähten nicht beeinflusst. Der Vergleich des Verhältnisses von Herzgewicht zu Körpergewicht der Seidennahtgruppe, der resorbierbaren Nahtgruppe und der Scheingruppe ist hier dargestellt. Histologische Schnitte des Herzens zeigten, dass sich die Kardiomyozyten von Tag 14 bis Tag 28 in der Seidennahtgruppe signifikant vergrößerten, sich aber an Tag 28 in der Gruppe mit resorbierbarem Nahtmaterial überwiegend zurückbildeten.Wenn Sie dieses Protokoll versuchen, ist es am wichtigsten, die elterliche Rippenfellentzündung nicht zu beschädigen, um einen Pneumothorax zu vermeiden. Achten Sie darauf, die Nadelspitze so weit wie möglich abzustumpfen und den Eingriff vorsichtig durchzuführen. Es gibt viele potenzielle Anwendungen für diese Methode, wie z. B. die Etablierung des Modells der Präkonditionierung der Myokardhypertrophie, die Erforschung des Mechanismus der Hypertrophieregression und die Untersuchung des Zeitpunkts des linksventrikulären reversiblen Remodelings.

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Dieses Video demonstriert die Technik der Aortendebandierung, die zu einem umgekehrten Umbau führen kann, um das Fortschreiten zur Herzinsuffizienz in einem Mausmodell zu begrenzen. Nach der Debandierung löst eine signifikante Verringerung der ventrikulären Nachlast eine Rückbildung der ventrikulären Hypertrophie und Fibrose aus, was zu einer Wiederherstellung der Herzfunktion führt.

Chirurgische Aortendebandierung: Ein Verfahren zur Untersuchung des linksventrikulären umgekehrten Umbaus im Mausmodell der Aortenverengung

Wir beschreiben einen schrittweisen Verfahren zum Bilden von Drucklast und der linksventrikulären Hypertrophie in Wistar-Ratten durch Verengung der aufsteigenden Aorta unter Verwendung einer kleinen Metallclips. Dieses Modell wird weitgehend für das Studium Umbau Veränderungen während der Herzhypertrophie und zur Identifizierung und Bewertung von Strategien für die Regression von solchen Änderungen verwendet.

Aufsteigend Aortakonstriktion bei Ratten zur Erstellung von Drucküberlast Herzhypertrophie Modell

Ein Rattenmodell der abdominalen Aortenverengung, das Herzhypertrophie und Umbau induziert, wird beschrieben. Eine effiziente, hochgradig reproduzierbare und minimal-invasive Methode wird verwendet, um eine einfache, aber nützliche Plattform für die Erforschung von Myokardhypertrophie und -dysfunktion bereitzustellen.

Ein Modell der kardialen Remodeling Durch Zusammenziehen der Bauchaorta bei Ratten

Minimal-invasive Quer Aortakonstriktion (MTAC) schont das Wesentliche der regelmäßigen Quer Aortakonstriktion (TAC), während die Verwendung eines Ventilators mit Intubation zu beseitigen. Es erweist sich als ein höchst wünschenswertes Verfahren zur Hochdurchsatz-Untersuchungen an der linksventrikulären Überlastung, vor allem in der translationalen Studien zu sein.

Minimal Invasive Quer Aortakonstriktion bei Mäusen

Ziel dieses Protokolls ist es, Schritt für Schritt beschreiben die Technik der minimal-invasiven quer Aortenstenose Verengung (TAC) bei Mäusen. Durch Beseitigung der Intubation und Belüftung sind obligatorisch für häufig verwendete Standardverfahren, minimal-invasive TAC das operative Vorgehen vereinfacht und reduziert die Belastung auf das Tier setzen.

Technik der minimal-invasiven quer Aortenstenose Verengung bei Mäusen für Induktion der linken Ventricular Hypertrophie

Dieses Protokoll stellt eine chirurgische große Tiermodell der chronischen, einzelne Schiff Ischämie, die regionale Anomalien führt aber schafft kein Infarkt, bekannt als Winterschlaf Myokard. Nach Einrichtung der chronische Ischämie werden die Tiere mit off-Pump LIMA-LAD koronare Bypass Graft-Operation zur ischämische Gewebe Revaskularisierung behandelt.

Chirurgische Schweine Modell der chronischen kardialen Ischämie von Off Pump Coronary Artery Bypass Graft-Chirurgie behandelt

Hier präsentieren wir Ihnen ein Protokoll der transversalen Aortenstenose Verengung (TAC) über eine laterale Thorakotomie. Diese Technik ist ein minimal-invasive, geschlossenen Brust chirurgischer Eingriff mit dem Ziel, drucküberlastung und Herzinsuffizienz bei Mäusen unter Verwendung der Standardeinstellungen TAC-Labor zu simulieren.

Eine geschlossen Kasten Modell quer Aortenstenose Verengung bei Mäusen zu induzieren

Hier beschreiben wir ein Schritt-für-Schritt-Protokoll der chirurgischen Aortendepaling im etablierten Mäusemodell der Aortenverengung. Dieses Verfahren ermöglicht es nicht nur, die Mechanismen zu untersuchen, die dem linksventrikulären Reverse Remodeling und der Regression von Hypertrophie zugrunde liegen, sondern auch neue therapeutische Optionen zu testen, die die Myokardregeneration beschleunigen könnten.

Untersuchung des linksventrikulären Reverse Remodeling durch Aortendefletieren bei Nagetieren

Das vorliegende Protokoll beschreibt eine modifizierte und vereinfachte Technik mit einem minimal-invasiven Verfahren der transversalen Aortenverengung (TAC) unter Verwendung eines selbst hergestellten Retraktors. Dieses Verfahren kann ohne Beatmungsgerät oder Mikroskop durchgeführt werden und führt zu einer Drucküberlastung, die schließlich zu Herzhypertrophie oder Herzinsuffizienz führt.

Eine modifizierte Technik zur transversalen Aortenverengung bei Mäusen

Das vorliegende Protokoll beschreibt eine neue Technik der Aortenbandbildung bei Mäusen, um eine Drucküberlastung der Herzhypertrophie zu induzieren. Zum Banderolieren wird ein Gummiring mit festem Innendurchmesser verwendet. Diese neue Technik verspricht weniger Varianz und reproduzierbarere Daten für zukünftige Experimente.

O-Ring-Aortenband versus traditionelle transversale Aortenverengung zur Modellierung von Drucküberlastung-induzierter Herzhypertrophie

Diese Studie stellt ein chirurgisches Schweinemodell der chronischen Myokardischämie aufgrund einer progressiven Koronararterienstenose vor, die zu einer Beeinträchtigung der Herzfunktion ohne Infarkt führt. Nach einer Ischämie werden die Tiere einer Bypass-Transplantation außerhalb der Pumpe unterzogen, bei der ein mit Stammzellen gewonnenes Exosomen-beladenes Kollagenpflaster epikardial platziert wird. Diese Zusatztherapie verbessert die Myokardfunktion und die Genesung.

Chirurgisches Schweinemodell der chronischen Myokardischämie, das mit einem mit Exosomen beladenen Kollagenpflaster und einem Bypass-Transplantat der Koronararterien behandelt wird

Lernen Sie die transversale Aortenverengung mit resorbierbarer Naht zur Erzeugung transienter Myokardhypertrophie bei Mäusen. Diese verbesserte Methode ermöglicht die Untersuchung von Hypertrophie-Regressionsmechanismen mit geringerer Operationsmortalität.

Betrieb der transversalen Aortenverengung mit resorbierbarer Naht zur Erlangung einer transienten Myokardhypertrophie

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