Name: Erzeugung und Charakterisierung eines rechtsventrikulären Myokardinfarkts induziert durch permanente Ligation der rechten Koronararterie bei Mäusen (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2022-02-01T14:50:00.000+00:00
Duration: 10 min 18 s
Description: Erfahren Sie die Erzeugung eines rechtsventrikulären Myokardinfarkts bei Mäusen durch permanente Ligation der rechten Koronararterie. Diese Methode ermöglicht die Untersuchung pathophysiologischer Mechanismen und unterstützt die Entwicklung gezielter Therapien.

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Diese Arbeit wurde durch Stipendien der National Natural Science Foundation of China (82073851 to Sun) und der National China Postdoctoral Science Foundation (2021M690074 to Lin) unterstützt.

Alle Verfahren wurden gemäß dem von den US National Institutes of Health veröffentlichten Leitfaden für die Pflege und Verwendung von Labortieren (NIH-Publikation Nr. 85-23, überarbeitet 1996) durchgeführt und von der Tierethikkommission des Nanfang Hospital, Southern Medical University (Guangzhou, China) genehmigt. Gesunde männliche C57BL/6J Mäuse (8-10 Wochen alt; Körpergewicht, 25-30 g) wurden vom Animal Center der Southern Medical University bezogen. Weibliche Mäuse können ebenfalls verwendet werden, aber das Mischen beider Geschlechter wird aufgrund der möglichen Einflüsse von Geschlechtsunterschieden nicht empfohlen. Nach der Ankunft wurden die Mäuse in einem 12-h / 12-stündigen Dunkel- / Lichtzyklus (3-4 Mäuse pro Käfig) mit Ad-libitum-Futter und Wasser untergebracht.
1. Vorbereitung auf die Operation
<ol><li>Sterilisieren Sie chirurgische Instrumente durch Autoklavieren vor der Operation. Stellen Sie das Heizkissen auf 37 °C ein.</li>
	<li>Betäuben Sie die Mäuse durch eine intraperitoneale Injektion von 50 mg/kg Pentobarbital (siehe Materialtabelle), um chirurgische Schmerzen zu lindern. Legen Sie die Mäuse in separate Boxen für die Anästhesieinduktion. Stellen Sie die Tiefe der Anästhesie sicher, indem Sie keine Zehenentzugsreaktion haben. HINWEIS: Es wird auch empfohlen, 1,5% Isofluran für die Inhalationsanästhesie zu verwenden, da es besser für die Analgesie ist.</li>
	<li>Legen Sie die Mäuse in Rückenlage auf das Pad, indem Sie ihre Schneidezähne mit einer Naht befestigen und ihre Gliedmaßen mit Klebeband immobilisieren. Stellen Sie die Tiefe der Anästhesie erneut sicher, indem Sie den Reflex überprüfen.</li>
	<li>Entfernen Sie die Haare vom Hals bis xiphoid mit einer Enthaarungscreme. Desinfizieren Sie den Operationsbereich 3 Mal mit abwechselndem antiseptischem Peeling und 75% Alkohol und drapieren Sie dann das Operationsfeld.</li>
	<li>Führen Sie eine Intubation durch, indem Sie die folgenden Schritte ausführen.<ol>
<li>Stellen Sie die Atemfrequenz des Tieres mit einem Mini-Ventilator (siehe Materialtabelle) auf 150/min und das Tidalvolumen auf 300 μL ein. HINWEIS: Es ist nicht erforderlich, den Modus mit positivem endexspiratorischem Druck zu verwenden.</li>
		<li>Ziehen Sie die Zunge leicht mit einer Pinzette heraus, heben Sie den Unterkiefer mit einem Zungendrücker an, um die Glottis freizulegen, und führen Sie eine intratracheale Intubation durch, indem Sie eine 22-G-Kanüle in die Glottis einführen.</li>
		<li>Schalten Sie das Mini-Beatmungsgerät ein und schließen Sie die Trachealkanüle an das Beatmungsgerät an. Das Phänomen, dass die thorakale Welligkeit der Beatmungsfrequenz entspricht, deutet auf eine erfolgreiche Intubation hin. Befestigen Sie die Kanüle mit Klebeband, um ein Verrutschen während des Vorgangs zu verhindern.</li>
	</ol>
</li>
</ol>2. Dauerhafte Ligatur der rechten Koronararterie
<ol><li>Schließen Sie die Elektroden der Elektrokardiographie (EKG) (siehe Materialtabelle) korrekt an die Gliedmaßen der Maus an und zeichnen Sie das EKG auf. HINWEIS: Eine der II-, III- oder AVF-Leitungen wird als Überwachungsleitung ausgewählt. Blei III ist angemessener.</li>
	<li>Öffne die Truhe.<ol>
<li>Machen Sie einen 1 cm langen Schnitt in der Haut parallel zur dritten rechten Rippe mit einer Augenschere. Bestimmen Sie die dritte Interkostalseite erneut und sorgen Sie für ausreichend Platz entsprechend dem Brustbeinwinkel. HINWEIS: Die Richtung des Hauteinschnitts erfolgt vom Brustbeinwinkel zur rechten vorderen Achsellinie.</li>
		<li>Trennen und schneiden Sie die Muskeln pectoralis major und pectoralis minor mit einer Schere und einer Mikrozange über dem dritten Interkostalraum ab. Danach trennen Sie den Interkostalmuskel stumpf mit einer Ellenbogenzange, um das chirurgische Feld freizulegen. HINWEIS: Nur ein kleiner Teil der Brustmuskeln muss geschnitten werden, und dann wird eine stumpfe Trennung empfohlen, um das Herz freizulegen.</li>
		<li>Schneiden Sie das Perikard ein. Heben Sie das rechte Atrium mit steriler Baumwolle an und ligiieren Sie das RCA mit einem sterilen 8-0 Nylongewinde mit einem Ligaturbereich von 3-5 mm. Nach dem Ligieren des RCA zeigt das Überwachungs-EKG (Blei III) die ST-Segment-Elevation an. HINWEIS: Da der Maus-RCA unsichtbar ist, muss sein anatomischer Standort sorgfältig bestätigt werden. Das Myokard des Wohnmobils ist viel dünner als das des LV. Daher ist es schwierig, die Tiefe der eingeführten Nadel zu erfassen. Es ist leicht, Sinusbradykardie und atrioventrikulären Block zu induzieren, wenn die Tiefe der eingeführten Nadel zu tief ist und der Ligaturbereich zu groß ist.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Entfernen Sie die sterilen Baumwoll- und Nahtmuskeln und die Haut mit einem sterilen 5-0-Nylonfaden, um den Interkostalschnitt zu schließen. Desinfizieren Sie die Haut erneut mit 75% Alkohol und machen Sie die Maus nach der Operation im Einzelhaus. HINWEIS: Der gut vernähte Muskel ist wichtig, um Aerothoracx zu vermeiden. Ein steriles Drainagerohr wird bis zum Abschluss des Brustverschlusses in die Brusthöhle gelegt, und dann wird die Brusthöhle durch eine Injektionsspritze evakuiert, die das Drainagerohr verbindet. HINWEIS: Nach der Operation werden die Mäuse auf ein Heizkissen gelegt. Analgetika wie Buprenorphin (0,1 mg/kg Körpergewicht, subkutane Injektion) sind erforderlich, um die Schmerzen der Tiere nach der Operation zu lindern. Die erwarteten Komplikationen sind Sinusbradykardie und atrioventrikulärer Block, und die Sterblichkeitsrate nach der Operation beträgt 10-20%.</li>
</ol>3. Echokardiographische Beurteilung der RV-Funktion nach der Operation
HINWEIS: Verwenden Sie für die Echokardiographie eine MS400D-Sonde mit einer Mittenfrequenz von 30 MHz, die an ein hochauflösendes Ultraschallbildgebungssystem angeschlossen ist (siehe Materialtabelle). Die Echokardiographie-Untersuchung wird 4 Wochen nach der Operation durchgeführt.
<ol><li>Betäuben Sie die Maus mit 3% Isofluran durch Inhalation.</li>
	<li>Stellen Sie die Maus in Rückenlage auf einer Ultraschallplattform für Tierfixierung und Ultraschalloperation. Kleben Sie die Krallen an die Elektrode, um eine EKG-Aufzeichnung über ein an die Ultraschallmaschine angeschlossenes System zu erhalten.</li>
	<li>Überwachen Sie die Herzfrequenz durch das EKG und halten Sie sie zwischen 450-550 Schlägen / min, indem Sie die Anästhesiekonzentration zwischen 1,5% und 3% einstellen.</li>
	<li>Entfernen Sie die Haare von der Brust der Maus mit einer Enthaarungscreme und tragen Sie Ultraschallgel auf die Haut der Brust auf.</li>
	<li>Stellen Sie die Plattform auf die horizontale Position ein. Richten Sie den Wandler parallel zum linken Bein aus und erhalten Sie das linksventrikuläre Langachsenbild. Drehen Sie die Sonde um 90° im Uhrzeigersinn, um die LV-Kurzachsenansicht zu erhalten. Drücken Sie die Cine-Store-Taste , um die Bilder zu speichern. HINWEIS: Die obere linke Seite der Plattform ist am tiefsten Punkt geneigt. Der kurzachsige LV-Drehwinkel des Wandlers wird beibehalten, während der Wandler auf die rechte Schulter der Maus ausgerichtet ist.</li>
	<li>Bewegen Sie den Wandler vertikal nach unten und behalten Sie seine Position über dem Oberbauch und unterhalb der Membran der Maus im B-Modus bei. Passen Sie die Plattformposition leicht an, indem Sie die x- und y-Achsen drehen, bis das RV, das rechte Atrium (RA), das linke Atrium (LA) und das LV deutlich auf dem Bildschirm zu sehen sind. Speichern Sie apikale Vierkammerbilder, indem Sie die Schaltfläche Cine-Speicher oder Rahmenspeicher drücken. HINWEIS: Der B-Modus wird verwendet, um die zweidimensionale (2D) Ansicht des Herzens anzuzeigen.</li>
	<li>Drücken Sie den M-Modus; Nachdem die 2X-Indikatorlinie angezeigt wurde, suchen Sie die Indikatorlinie an der Trikuspidalklappenöffnung, um die Bewegung der Trikuspidalringebene zu erhalten. Klicken Sie auf die Schaltfläche Cine store oder Frame store , um Daten und Bilder zu speichern. HINWEIS: M-Modus bedeutet Bewegungsmodus, der die Bewegung des Herzens oder Gefäßes in einer Kurvenform anzeigt.</li>
	<li>Drücken Sie die Messtaste, um in den Messmodus zu wechseln. Klicken Sie auf die Schaltfläche Flächenmessung, um in RV und LV einzuteilen. Berechnen Sie die Fläche von RV und LV, um das Flächenverhältnis von RV zu LV zu erhalten.<ol>
<li>Klicken Sie auf die Schaltfläche Zeitleiste und erstellen Sie zwei Grundlinien, um den Bewegungsbereich der ringförmigen Trikuspidalebene während der systolischen und diastolischen Perioden zu definieren. Klicken Sie auf die Schaltfläche Entfernung und messen Sie den Abstand zwischen zwei Basislinien, um eine trikuspidale ringförmige systolische Exkursion (TAPSE) zu erhalten.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Neigen Sie die linke Seite der Plattform am tiefsten Punkt. Halten Sie die Sonde in einem Winkel von 30° zur horizontalen Achse entlang der rechten vorderen Achsellinie. Drehen Sie die x- und y-Achsen der Plattform, um das RV anzuzeigen.<ol>
<li>Drücken Sie die M-Mode-Taste und suchen Sie die Anzeigelinie am Hyperechopunkt des Septums, um das M-Mode-Bild der RV-Schnittstelle zu erhalten. Drücken Sie die Cine-Store-Taste , um das Bild zu speichern.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Öffnen Sie das M-Modus-Bild der RV-Schnittstelle, drücken Sie die Messtaste, um in den Messmodus zu gelangen. Messen Sie den RV-Innenabstand am Ende der Diastole (RVIDd), der RV-Ejektionsfraktion (RVEF) und der RV-Fraktionsverkürzung (RVFS) mit dem eingebauten Messwerkzeug des echokardiographischen Systems.</li>
	<li>Hören Sie auf, Isofluran zu verabreichen und legen Sie die Maus für 3-5 Minuten auf das Heizkissen, bis sie das Bewusstsein wiedererlangt. Danach bringen Sie die Maus mit 12 h Hell/Dunkel-Zyklus in ihren Käfig zurück.</li>
</ol>4. Invasive Messungen der Hämodynamik von Wohnmobilen
HINWEIS: Die Hämodynamik des RV wird 4 Wochen nach der RVI durch eine Katheterisierung des rechten Herzens beurteilt. Zum Einsatz kommt ein 1.0 F Katheter zusammen mit einem Überwachungssystem.
<ol><li>Betäuben Sie die Maus mit einer intraperitonealen Injektion von 50 mg/kg Natriumpentobarbital (siehe Materialtabelle).</li>
	<li>Nachdem Sie das Verschwinden des Pedalentzugsreflexes bestätigt haben, halten Sie die Maus in Rückenlage und immobilisieren Sie sie mit Klebeband.</li>
	<li>Rasieren Sie die Brusthaare vom Sternalwinkel bis zum Xiphoid. Desinfizieren Sie den Betriebsbereich mit 75% Alkohol.</li>
	<li>Führen Sie eine Trachealintubation durch und stellen Sie den Parameter des tierischen Beatmungsgeräts wie in den Schritten 1.5.2-1.5.3 beschrieben ein.</li>
	<li>Machen Sie einen 1 cm beidseitigen Schnitt auf der Haut über dem Xiphoid-Prozess und transektieren Sie das Zwerchfell und die Rippe mit einer Augenschere, um das Herz freizulegen.</li>
	<li>Durchstechen Sie die rechte ventrikuläre freie Wand mit einer 32 G Nadel. Entfernen Sie die Nadel und drücken Sie die Wunde mit Baumwolle, um Blutungen zu stillen.</li>
	<li>Führen Sie die Spitze des Katheters durch die Einstoßstelle in den rechten Ventrikel ein und drücken Sie den Katheter langsam nach vorne. Stellen Sie die Position der Spitze ein, um eine typische RV-Druckwellenform zu erhalten, die auf einem Monitor und einem Aufzeichnungssystem angezeigt wird. HINWEIS: Die rechte Halsvene ist auch ein geeigneter Weg für die hämodynamische Messung.</li>
	<li>Nach 10 Minuten Stabilisierung zeichnen Sie die Daten des systolischen RV-Blutdrucks (RVSBP), des enddiastolischen RV-Drucks (RVEDP) und des RV dP / dt auf. Klicken Sie auf die Schaltfläche Auswählen, um die Herzzyklen für die Berechnung auszuwählen, und klicken Sie dann auf die Schaltfläche Analysieren, um die Mittelwerte der ausgewählten Zyklen zu berechnen.</li>
	<li>Entfernen Sie den Katheter nach Abschluss der Aufnahme und legen Sie ihn dann in normale Kochsalzlösung.</li>
	<li>Euthanasieren Sie die Maus mit einer intraperitonealen Injektion von Überdosierung Pentobarbital-Natrium (150 mg / kg) und opfern Sie es dann durch zervikale Dislokation.</li>
	<li>Sammeln Sie das Herz und die Tibia für die histologische Analyse.</li>
</ol>5. Koronaler Gefäßabgüss mit einem Gefäßgießmittel
<ol><li>Heparinisieren Sie die Maus mit einer intraperitonealen Injektion von 200 IE/ml Heparin-Natrium bei 2000 IE/kg (siehe Materialtabelle).</li>
	<li>Betäuben Sie die Maus mit einer intraperitonealen Injektion von 50 mg/kg Natriumpentobarbital.</li>
	<li>Legen Sie das Tier in Rückenlage auf das Pad und intubieren Sie es zur künstlichen Belüftung gemäß den Schritten 1.5.2-1.5.3.</li>
	<li>Öffnen Sie die Brust mit einer chirurgischen Schere, wie in Schritt 4.5 beschrieben, und legen Sie das Herz frei.</li>
	<li>Machen Sie eine 3-mm-Kerbe mit einer Augenschere an den rechten Vorhöfen und durchbluten Sie das Herz mit 5 ml normaler Kochsalzlösung durch die Herzspitze mit einem Injektor.</li>
	<li>Blockieren Sie das Blut aus der Aorta mit einer Aortenklemme und perfusionieren Sie 0,1 ml Nitroglycerin (1 mg / ml) durch die Herzspitze mit einem Injektor, um die Koronararterie zu erweitern.</li>
	<li>Bereiten Sie das Gussreagenz vor, indem Sie die Zutaten im Kit gemäß den Anweisungen des Herstellers mischen (siehe Materialtabelle). HINWEIS: Es wird empfohlen, das Gießreagenz und die Perfusion mit normaler Kochsalzlösung und Nitroglycerin gleichzeitig vorzubereiten, um einen mikrovaskulären Verschluss zu verhindern.</li>
	<li>Durchbluten Sie das Herz mit 1 ml gegossenem Reagenz durch die Herzspitze und warten Sie 2-3 h.</li>
	<li>Erodieren Sie das Herz mit 50% Natriumhydroxid für 2-3 Tage und entfernen Sie das Muskelgewebe oder Bindegewebe durch Spülen mit normaler Kochsalzlösung.</li>
	<li>Machen Sie Fotos unter einer Kamera. ACHTUNG: Das Gipsreagenz ist schädlich für Augen, Haut und Atemwege. Natriumhydroxid ist korrosiv. Das Tragen von Schutzhandschuhen, Schutzbrillen und einem Laborkittel ist erforderlich. Das gegossene Reagenz muß in einem Abzug zubereitet werden.</li>
</ol>

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<li>Fernández, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+coronary+arteries+of+the+C57BL%2F6+mouse+strains%3A+Implications+for+comparison+with+mutant+models%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Anatomy%22%5BJournal%5D)">The coronary arteries of the C57BL/6 mouse strains: Implications for comparison with mutant models.</a> Journal of Anatomy. 212 (1), 12-18 (2008).</li>
<li>Zhang, H., Faber, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((De-novo+collateral+formation+following+acute+myocardial+infarction%3A+Dependence+on+CCR2%2B+bone+marrow+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Molecular+and+Cellular+Cardiology%22%5BJournal%5D)">De-novo collateral formation following acute myocardial infarction: Dependence on CCR2+ bone marrow cells.</a> Journal of Molecular and Cellular Cardiology. 87, 4-16 (2015).</li>
</ol>

Die Autoren haben nichts offenzulegen.

Sicard und Kollegen aus Frankreich berichteten erstmals 2019 über ein Mausmodell von RVI, das den chirurgischen Prozess beschrieb und sich auf die Interaktion zwischen LV und RV nach RVI9 konzentrierte. Bis heute hat jedoch keine Studie berichtet, dass dieses Modell für weitere Studien verwendet wurde. Ein detaillierteres Verfahren wäre für Forscher hilfreich, um das Mausmodell von RVI für die Untersuchung zu verwenden. Im Gegensatz zum Bericht von Sicard et al.9 lieferten ...

Der rechte Ventrikel (RV), der lange Zeit als einfacher Schlauch angesehen wurde, der mit der Lungenarterie verbunden ist, wurde viele Jahre lang zu Unrecht vernachlässigt1. In letzter Zeit besteht jedoch ein zunehmendes Interesse an der RV-Funktion, da sie eine wesentliche Rolle bei hämodynamischen Erkrankungenspielt 2,3 und als unabhängiger Risikoprädiktor für Herz-Kreislauf-Erkrankungendienen kann 4,5,6,7. RV-Erkrankungen umfassen RV-Infarkt (RVI), Lungenarterien-Hypertonie und Herzklappenerkrankung8. Im Gegensatz zu dem immensen Interesse an der Hypertonie der Lungenarterie ist RVI vernachlässigtgeblieben 7,9.
RVI, in der Regel begleitet von inferior-posteriorem Myokardinfarkt10,11, wird durch einen Verschluss der rechten Koronararterie (RCA) verursacht. Laut klinischen Studien induziert eine schwere RVI wahrscheinlich hämodynamische Störungen und Arrhythmien wie Hypotonie, Bradykardie und atrioventrikuläre Blockaden, die mit einer höheren Krankenhausmorbidität und -mortalität verbunden sind12,13,14. Die RV-Funktion könnte sich bis zu einem gewissen Grad spontan erholen, auch wenn keine Reperfusionvorliegt 15,16. Zwischen dem linken Ventrikel (LV) und RV17 bestehen mehrere morphologische und funktionelle Unterschiede. Es wird angenommen, dass RV resistenter gegen Ischämie ist als LV8, teilweise aufgrund der umfangreicheren Kollateralzirkulationsbildung nach RVI. Die Klärung der Unterschiede zwischen LV-Infarkt (LVI) und RVI und die Identifizierung der zugrunde liegenden Mechanismen würden neue therapeutische Ziele für die kardiale Regeneration und die ischämische Herzinsuffizienz liefern. Aufgrund der Schwierigkeiten, die mit der Generierung von RVI-Mausmodellen verbunden sind, ist die Grundlagenforschung zu RVI jedoch hauptsächlich begrenzt.
Ein großes Tiermodell von RVI wurde durch Ligatieren von RCA in Schweine18 erzeugt, das aufgrund der sichtbaren RCA einfacher zu bedienen ist. Gegenüber dem Großtiermodell hat das Mausmodell folgende Vorteile: mehr Zugänglichkeit bei der Genmanipulation, geringere wirtschaftliche Kosten und kürzere Versuchsdauer19,20. Obwohl zuvor ein Maus-RVI-Modell berichtet wurde, das sich auf den Einfluss von RVI auf die LV-Funktion konzentrierte, wurden die detaillierten Schritte des Verfahrens, die Schwierigkeiten und Schlüsselpunkte des Betriebs sowie die Modellmerkmale wie hämodynamische Änderungen nicht vollständig eingeführt 9,21.
Dieser Artikel enthält detaillierte chirurgische Verfahren zum Generieren eines Mausmodells von RVI. Darüber hinaus zeichnete sich dieses Modell durch echokardiographische Messung, invasive hämodynamische Auswertung und histologische Analyse aus. Darüber hinaus wurde ein koronarer Gefäßabguss durchgeführt, um die koronare arterielle Anordnung im Wohnmobil zu beobachten. Die in diesem Artikel vorgestellte Technik würde Anfängern helfen, die Generierung des Maus-RVI-Modells mit akzeptabler Operationsmortalität und zuverlässigen Bewertungsansätzen schnell zu erfassen. Das Mausmodell von RVI würde helfen, die Mechanismen der Rechtsherzinsuffizienz zu erforschen und neue therapeutische Ziele für den RV-Umbau zu suchen.

<table><tbody><tr><td>2,3,5-Triphenyltetrazoliumchlorid</td><td>Sigma</td><td>T8877</td><td>Für die TTC-Färbung</td></tr><tr><td>Tier-Mini-Beatmungsgerät</td><td>Havard</td><td>Typ 845</td><td>Für die künstliche Beatmung</td></tr><tr><td>Tier-Ultraschall-System VEVO2100</td><td>Visual Sonic</td><td>VEVO2100</td><td>Messung für Doppler-Strömungsgeschwindigkeit und AS-Plaque</td></tr><tr><td>Batson' s # 17 Anatomisches Korrosionsset</td><td>Polyscience Inc</td><td>7349</td><td>Für das Gefäßgießen</td></tr><tr><td>Buprenorphin</td><td>Isoreag</td><td>1134630-70-8</td><td>Zur Verringerung der Schmerzen von Mäusen nach der Operation</td></tr><tr><td>C57BL / 6J Mäuse + D29A1A2: D27</td><td>Tierzentrum der South Medical University</td> - <td>Für die Erzeugung von Maus RVI-Modell</td><td></td></tr> <tr><td>Kamera</td><td>Sangnond</td><td></td><td>Zum Fotografieren</td></tr><tr><td>Kaltes Licht Beleuchtung</td><td>Olympus</td><td>ILD-2</td><td>Leuchte für Operationen</td></tr><tr><td>Elektrokardiograph</td><td>ADI Instrument</td><td>ADAS1000</td><td>Zur Aufzeichnung von Elektrokardiogramm-Haarentfernungscreme</td></tr><tr><td></td><td>Reckitt Benchiser</td><td>RQ/B 33 Typ 2</td><td>Mäusehaare entfernen</td></tr><tr><td>Wärmekissen - thermostatisches chirurgisches System (ALC-HTP-S1)</td><td>SHANGHAI ALCOTT BIOTECH CO</td><td>ALC-HTP-S1</td><td>Heizung</td></tr><tr><td>Hämatoxylin-eosin Farbstoff</td><td>Leagene</td><td>DH0003</td><td>Hämatoxylin-Eosin-Färbung Heparin-Natriumsalz</td></tr><tr><td></td><td>Macklin</td><td>H837056</td><td>Für die Heparisierung</td></tr><tr><td>Isofluran</td><td>RWD Life Science</td><td>R510-22</td><td>Inhalationsanästhesie</td></tr><tr><td>Laborgemachter Spatel</td><td></td><td></td><td>Arbeit als Laryngoskop</td></tr><tr><td>Laborgefertigte Trachealkanüle</td><td></td><td></td><td>Für die Intubation</td></tr><tr><td>Matrx VIP 3000 Isofuran-Verdampfer</td><td>Midmark Corporation</td><td>VIP 3000</td><td>Anästhesie</td></tr><tr><td>Medizinisches Nylon-Naht (5-0)</td><td>Ningbo Medical Needle Co.</td><td>5-0</td><td>Für die Nähe des Brustkorbs</td></tr><tr><td>Mikrochirurgische Ellenbogenpinzette</td><td>RWD life science</td><td>F11021-11</td><td>Für die Chirurgie</td></tr><tr><td>Mikrochirurgische Schere</td><td>NAPOX</td><td>MB-54-1</td><td>Für die Arteriotomie</td></tr><tr><td>Millar Catheter</td><td>AD Instruments, Shanghai</td><td>1.0F</td><td>Messung des Druckgradienten</td></tr><tr><td>MS400D Ultraschallsonde</td><td>Visual Sonic</td><td>MS400D</td><td>Messung des Dopplerflusses Geschwindigkeits- und AS-Plaque-Nadelzange</td></tr><tr><td></td><td>Visual</td><td>Sonic F31006-12</td><td>Für die Chirurgie</td></tr><tr><td>Nitroglycerin</td><td>BEIJING YIMIN MEDICINE Co</td><td></td><td>Für die Erweiterung der Koronararterien</td></tr><tr><td>Ophthalmische Schere</td><td>RWD Life Science</td><td>S11022-14</td><td>Für die</td></tr><tr><td>Chirurgie Pentobarbital-Natriumsalz</td><td>Merck</td><td>25MG</td><td>Anästhesie</td></tr><tr><td>PowerLab Multi-Directional Physiologisches Aufzeichnungssystem</td><td>AD Instruments, Shanghai</td><td>4/35</td><td>Druckaufzeichnung</td></tr><tr><td>Elektronische Präzisionswaage</td><td>Denver Instrument</td><td>TB-114</td><td>Waage</td></tr><tr><td>Seidennaht (8-0)</td><td>Ningbo Medical Needle Co.</td><td>6-0</td><td>Koronararterien-Ligatur</td></tr><tr><td>Mikrochirurgie-Ausrüstung für Kleintiere</td><td>Napox</td><td>MA-65</td><td>Chirurgische Instrumente</td></tr><tr><td>Gewebezange</td><td>Visual Sonic</td><td>F-12007-10</td><td>Für die Chirurgie</td></tr><tr><td>Gewebeschere</td><td>Visual Sonic</td><td>S13052-12</td><td>Offene Brust für hämodynamische Messung</td></tr><tr><td>Transmission Gel</td><td>Guang Gong pai</td><td>250ML</td><td>Vorbereitung für Echokardiographie-Messung</td></tr><tr><td>Gefäßklemmen</td><td>Visual Sonic</td><td>R31005-06</td><td>Zur Blockierung des Blutes aus der Aorta</td></tr></tbody></table>

erzeugung und charakterisierung eines rechtsventrikulären myokardinfarkts induziert durch permanente ligation der rechten koronararterie bei mäusen

Generation and Characterization of Right Ventricular Myocardial Infarction Induced by Permanent Ligation of the Right Coronary Artery in Mice

Rechtsventrikulärer Infarkt (RVI) ist eine häufige Präsentation in der klinischen Praxis. Schwere RVI kann zu tödlicher hämodynamischer Dysfunktion und Arrhythmie führen. Im Gegensatz zu dem weit verbreiteten Maus-Myokardinfarkt-Modell (MI), das durch linke Koronararterienligatur erzeugt wird, wird das RVI-Mausmodell aufgrund der Schwierigkeiten bei der Modellgenerierung selten eingesetzt. Die Erforschung der Mechanismen und der Behandlung von RVI-induziertem RV-Remodeling und -Dysfunktion erfordert Tiermodelle, um die Pathophysiologie von RVI bei Patienten nachzuahmen. Diese Studie stellt ein praktikables Verfahren zur RVI-Modellgenerierung bei C57BL/6J-Mäusen vor. Darüber hinaus wurde dieses Modell auf der Grundlage der folgenden Faktoren charakterisiert: Beurteilung der Infarktgröße bei 24 h nach MI, Beurteilung des Herzumbaus und der Funktion mit Echokardiographie, Beurteilung der RV-Hämodynamik und Histologie der Infarktzone 4 Wochen nach RVI. Darüber hinaus wurde ein koronarer Gefäßabguss durchgeführt, um die koronare arterielle Anordnung in RV zu beobachten. Dieses Mausmodell von RVI würde die Erforschung von Mechanismen der Rechtsherzinsuffizienz erleichtern und neue therapeutische Ziele für den RV-Umbau suchen.

In dieser Studie wurden Mäuse nach dem Zufallsprinzip der RVI- (n = 11) oder Scheinoperationsgruppe (n = 11) zugeordnet. Der Koronarstich in 2 normalen Mausherzen ist in Abbildung 1A dargestellt. Als Reaktion auf die RCA-Ligatur wurde eine Erhöhung des ST-Segments in Blei III des EKG beobachtet (Abbildung 1B). Darüber hinaus zeigte die Färbung von 2,3,5-Triphenyltetrazoliumchlorid (TTC), dass der Infarktbereich bei 24 h postoperativ 45% der freien RV-Wand ausmac...

Es gibt mehrere Unterschiede zwischen dem rechten und linken Ventrikel. Die Pathophysiologie des rechtsventrikulären Infarkts (RVI) ist jedoch nicht geklärt. Im vorliegenden Protokoll wird eine reproduzierbare Methode zur Generierung von RVI-Mausmodellen eingeführt, die ein Mittel zur Erläuterung des Mechanismus von RVI darstellen kann.

Erzeugung und Charakterisierung eines rechtsventrikulären Myokardinfarkts induziert durch permanente Ligation der rechten Koronararterie bei Mäusen

Right ventricular infarction (RVI) is a common presentation in clinical practice. Severe RVI can lead to fatal hemodynamic dysfunction and arrhythmia. In ...

Rechtsventrikulär ist resistenter gegen Ischämie als der linke. Wir haben eine Technik zur Generierung eines rechtsventrikulären Infektionsmodells eingeführt, das den pathophysiologischen Mechanismus während der Entwicklung eines rechtsventrikulären Infarkts klären kann. Wir lokalisierten die richtige Koronararterie durch vaskuläre Kostenrechnung und definierten den Ligationsbereich, der für die erfolgreiche Generierung eines rechtsventrikulären Infarktmodells der Maus entscheidend ist.Linhai Ruo, ein Posterdoktor aus meinem Labor, wird das Verfahren demonstrieren. Legen Sie die Maus in Rückenlage auf ein Pad und stellen Sie die Tiefe der Anästhesie sicher, indem Sie keine Zehenentzugsreaktion haben. Befestigen Sie die Schneidezähne mit einer Naht und immobilisieren Sie die Gliedmaßen mit Klebeband.Entfernen Sie die Haare vom Hals bis xiphoid mit einer Enthaarungscreme. Ziehen Sie die Zunge leicht mit einer Pinzette heraus, heben Sie den Unterkiefer mit einem Zungendrücker an, um die Glottis freizulegen. Und führen Sie eine intratracheale Intubation durch, indem Sie eine 22-Gauge-Kanüle in die Glottis einführen.Schließen Sie die Elektrokardiographie-Elektroden korrekt an die Gliedm

generation-characterization-right-ventricular-myocardial-infarction

Research

Forschung

JoVE Journal

Medicine

Medizin

Dieses Video zeigt, wie eine schnelle und zuverlässige Modell nutzen, um pathobiologischen und pathophysiologischen Prozessen der Myokardischämie zu studieren.

LAD-Ligation: einem Mausmodell der Myokardinfarkt

Das chirurgische Verfahren zum experimentellen Herzinfarkt in Mäusen zu induzieren beginnt mit linken Thorakotomie zwischen der dritten und der vierten Rippe, um die vordere Oberfläche des Herzens und linken Lunge visualisieren. Die linke Koronararterie ligiert ist, wird die Brust geschlossen und der Maus erlaubt ist, spontan zu erholen.

Geändert Technik für Coronary Artery Ligation in Mäuse

In diesem Video beschreiben wir einen chirurgischen Eingriff, um ein Mausmodell für einen Myokardinfarkt zu erstellen, indem die linke anteriore absteigende Koronararterie dauerhaft ligiert wird.

Generierung eines Mausmodells des Myokardinfarkts: Ein chirurgisches Verfahren zur dauerhaften Ligatur der linken vorderen absteigenden Koronararterie im Mausmodell

Wir stellen ein chirurgisches Verfahren, experimentelle Ischämie / Reperfusions (I / R) Schädigung induzieren Myokardinfarkt (MI) in Mausmodellen, die für mehr Klarheit in der Positionierung der Ligation an der linken vorderen absteigenden Arterie (LAD) simulieren können, um die Reproduzierbarkeit zu erhöhen MI Experimente in Mäusen.

Einem Mausmodell der myokardialen Ischämie-Reperfusion Injury durch Ligation des linken vorderen absteigenden Arterie

Herzinsuffizienz ist die Hauptursache für Krankenhausaufenthalte und eine der Haupttodesursachen. Ein Modell der permanenten Ligatur der linken anterioren absteigenden Koronararterie bei Mäusen wird angewendet, um den ventrikulären Umbau und die kardiale Dysfunktion nach einem Myokardinfarkt zu untersuchen. Die Technik der invasiven hämodynamischen Messungen an Mäusen wird vorgestellt.

Permanent Ligation des linken vorderen absteigenden Koronararterie bei Mäusen: Ein Modell der Post-Myokardinfarkt Umbau und Herzinsuffizienz

Wir bieten eine zuverlässige Methode für die Ligatur der linken vorderen absteigenden Arterie (LAD) in einem Mausmodell an. Diese Methode ist vergleichsweise weniger invasiv als andere Methoden, die eine endotracheale Intubation, einen linksseitigen Thorakotomieansatz und eine Thorakozentese umfassen. Diese Methode kann sowohl als Modell für akuten als auch für chronischen Myokardinfarkt (MI) verwendet werden.

Murine linken vorderen absteigenden (LAD) Koronararterienligatur: ein verbessertes und vereinfachtes Modell für Myokardinfarkts

Hierin beschreiben wir ein chirurgisches Verfahren, das zeigt, wie eine dauerhafte Ligation der links-vorderen absteigenden Herzkranzgefäße bei Mäusen erreicht werden kann. Dieses Modell ist von hoher Relevanz für die Untersuchung der Pathophysiologie des Myokardinfarkts und der damit einhergehenden biologischen Prozesse.

Murine Myokardinfarkt Modell mit permanenten Ligation der linken Anterior absteigende Koronararterie

Hier beschreiben wir eine einfache und reproduzierbare Methode, die bei Mäusen durch Präzisionsligation der linken vorderen absteigenden Koronararterie durch Mikromanipulation einen Myokardinfarkt oder eine myokardiale Ischämie-Reperfusionsverletzung induzieren kann.

Induktion von Myokardinfarkt und myokardialer Ischämie-Reperfusionsschädigung bei Mäusen

Hier wird ein chirurgisches Verfahren zur permanenten Ligatur der linken Koronararterie bei Mäusen vorgestellt. Mit diesem Modell kann die Pathophysiologie und die damit verbundene Entzündungsreaktion nach Myokardinfarkt untersucht werden.

Linke Koronararterienligatur: Ein chirurgisches Mausmodell des Myokardinfarkts

Zahlreiche genetische Manipulationen und / oder intramyokardialen Injektionen von Genen, Proteinen, Zellen und / oder Biomaterialien basieren auf die Dimension der Zeit in Studien zur akuten Ischämie / Reperfusion und chronischer Umbau in Mäusen überlagert. Dieses Video zeigt die mikrochirurgische Verfahren für die Ischämie / Reperfusion, permanent koronare Ligation und intramyokardialen Injektion Studien.

Koronare Ligation und intramyokardialen Injection in einem Mausmodell der Infarkt

Erfahren Sie die Erzeugung eines rechtsventrikulären Myokardinfarkts bei Mäusen durch permanente Ligation der rechten Koronararterie. Diese Methode ermöglicht die Untersuchung pathophysiologischer Mechanismen und unterstützt die Entwicklung gezielter Therapien.

Erzeugung und Charakterisierung eines rechtsventrikulären Myokardinfarkts induziert durch permanente Ligation der rechten Koronararterie bei Mäusen (Video) | JoVE Journal

Erzeugung und Charakterisierung eines rechtsventrikulären Myokardinfarkts induziert durch permanente Ligation der rechten Koronararterie bei Mäusen

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