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Ein innovativer 3D-gedruckter Einsatz, der für einfache 2D- und 3D-Zellkulturen entwickelt wurde
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JoVE Journal Biology
An Innovative 3D-Printed Insert Designed to Enable Straightforward 2D and 3D Cell Cultures

Ein innovativer 3D-gedruckter Einsatz, der für einfache 2D- und 3D-Zellkulturen entwickelt wurde

Full Text
1,906 Views
08:17 min
January 6, 2023

DOI: 10.3791/64655-v

Charlie Colin-Pierre1,2,3, Oussama El Baraka3, Laurent Ramont1,2,4, Stéphane Brézillon1,2

1Laboratoire de Biochimie Médicale et Biologie Moléculaire,Université de Reims Champagne-Ardenne, 2UMR CNRS 7369, Matrice Extracellulaire et Dynamique Cellulaire-MEDyC,Université de Reims Champagne-Ardenne Reims, 3BASF Beauty Care Solutions, 4Service Biochimie-Pharmacologie-Toxicologie,Centre Hospitalier Universitaire (CHU) de Reims

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Overview

This study presents a novel 3D-printed insert model to investigate co-culture systems, focusing on the paracrine intercellular communication between endothelial cells and keratinocytes. The insert enhances experimental model design for various cell types and demonstrates significant increases in endothelial cell proliferation and migration when co-cultured with keratinocytes.

Key Study Components

Research Area

  • Cell biology
  • Endothelial cell-keratinocyte interactions
  • 3D culture models

Background

  • The importance of direct cell communication in biological systems.
  • Challenges in establishing culture models for different cell types.
  • Need for scalable, flexible cell culture techniques.

Methods Used

  • Use of a 3D-printed insert for cell culture.
  • Co-culture of keratinocytes and human dermal microvascular endothelial cells.
  • Analysis of cell viability and communication effects through migration and proliferation assays.

Main Results

  • Keratinocytes significantly enhanced endothelial cell proliferation by 1.5-fold after 24 hours and by 3.1-fold after 48 hours.
  • Endothelial cell migration improved significantly in the presence of keratinocytes, covering up to 99% of the wound area by 24 hours.
  • High cell viability was observed in the 3D-printed inserts compared to conventional culture methods.

Conclusions

  • This study demonstrates the efficacy of 3D-printed inserts in facilitating direct cell interactions and culture.
  • The findings have implications for understanding cell communication and can aid in studying various physiopathologies.

Frequently Asked Questions

What are the advantages of using 3D-printed inserts in cell culture?
3D-printed inserts are durable, flexible, and scalable, allowing for improved experimental models for various studies.
How do keratinocytes affect endothelial cell behavior?
Keratinocytes significantly enhance endothelial cell proliferation and migration, demonstrating important intercellular communication.
What is the main application of this co-culture model?
It is applicable to studying direct cell communication and various physiopathologies including immunology.
What are the key findings related to cell viability?
Cell viability rates were high, with 90% in 6-well plates and 91% in the 3D-printed inserts for keratinocytes.
Can this model be used for other cell types?
Yes, the 3D-printed inserts can be modified for various cell types requiring different coatings.
What protocols are followed for preparing the 3D inserts?
The inserts are created by mixing silicone and catalyst, sterilized, and then incubated for cell attachment and growth.

In dieser Arbeit wird ein neu entworfener 3D-gedruckter Einsatz als Modell der Co-Kultur vorgestellt und durch die Untersuchung der parakrinen interzellulären Kommunikation zwischen Endothelzellen und Keratinozyten validiert.

Dieses Protokoll kann zur Untersuchung zahlreicher Kulturstudien verwendet werden und bietet ein neues Werkzeug zur Untersuchung der direkten Zellkommunikation. Dieses neue Gerät spart viel Zeit bei der Erstellung eines Kulturmodells und ist auf verschiedene Zelltypen anwendbar, die eine bestimmte Beschichtung benötigen oder nicht. Die vier Kompartimente der 3D-gedruckten Einsätze ermöglichen es nämlich, verschiedene Zelltypen in Monolayern oder in 3D auf die gleiche Weise mit verschiedenen Kombinationen zu kultivieren.

Die 3D-gedruckten Einsätze sind langlebiger, flexibler, skalierbarer und können zur Entwicklung von experimentellen Modellen für die Untersuchung von Physiopathologien wie Immunologie oder Androgenese verwendet werden. Mischen Sie zunächst die beiden im Kit enthaltenen Komponenten, Lebensmittelsilizium und Katalysator, in einem Verhältnis von 10:1 mit einem sterilisierten Spatel mit 70 % Ethanol gemäß den Anweisungen des Herstellers. Tragen Sie die Einsätze mit einer Pinzette auf die Silikonmischung auf, so dass sich die Mischung homogen am unteren Rand des Einsatzes verteilt.

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Biologie Heft 191

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