Generierung und Manipulation von Ratten-Darm-Organoiden

In dieser Studie haben wir ein intestinales Organoidmodell der Ratte etabliert, das in Langzeitzellkulturen robust ist. Wir demonstrieren auch die ersten erfolgreichen genetischen Manipulationen, die sowohl eine lentivirale Infektion als auch eine transiente Transfektion verwenden. Dieses Modell ist ein hervorragendes Werkzeug zur Manipulation der Darmbiologie bei Ratten, bei denen die in vivo verfügbaren genetischen Werkzeuge begrenzt sind.

Darmorganoide von Ratten waren bisher nur schwer langfristig zu kultivieren. Durch die Generierung eines robusten, genetisch manipulierbaren Ratten-Organoid-Modells bieten wir Forschern zusätzliche Flexibilität und Wahlmöglichkeiten bei der Auswahl eines Organoid-Modells, das für ihre speziellen Umstände am besten geeignet ist. Darmorganoide von Mäusen werden verwendet, um das Verhalten, das Zellschicksal und die Physiologie von Stammzellen zu untersuchen, aber sie können ein suboptimales Modell sein.

Denn es gibt wichtige Unterschiede zwischen der Biologie von Maus und Mensch. Auf der anderen Seite können menschliche Darmorganoide schwer zu beschaffen sein und komplexe Anforderungen an die Zellkultur stellen. Das hier beschriebene Ratten-Organoid-Modell behält eine wichtige physiologische Relevanz für die menschliche Biologie und ist gleichzeitig wesentlich einfacher zugänglich und pflegebedürftig als menschliche Darmorganoide.

Die Entwicklung und Optimierung des Darmorganoidmodells der Ratte ermöglicht genetische Manipulationen, pharmakologische Behandlungen und Studien mit höherem Durchsatz der Darmbiologie und ein zugängliches Modell mit wichtiger physiologischer Relevanz für den Menschen. Darüber hinaus werden diese Ratten-Organoide die Untersuchung der speziesspezifischen Physiologie, des Zellschicksals und der phänotypischen Variationen und Krankheitsmodelle im Darm ermöglichen.