Etablierung und Charakterisierung von patienteneigenen Magenorganoiden aus Biopsien des gutartigen Magenkörpers und des Antralepithels
January 26th, 2024
Aus Magenpatienten stammende Organoide finden zunehmend Verwendung in der Forschung, jedoch fehlen formale Protokolle zur Erzeugung menschlicher Magenorganoide aus Einzelzellverdauen mit standardisierter Aussaatdichte. Dieses Protokoll stellt eine detaillierte Methode zur zuverlässigen Herstellung von Magenorganoiden aus Biopsiegewebe dar, das während der oberen Endoskopie gewonnen wurde.
Unsere Forschung konzentriert sich auf erbliche Ursachen von Magenkrebs. Insbesondere interessieren wir uns für hereditären diffusen Magenkrebs aufgrund krankheitsverursachender Varianten im CDH1- oder CTNNA1-Gen. Wir untersuchen auch die Rolle von BRCA1 und BRCA2 beim Magenkrebsrisiko und bei der Krebsentstehung.
Organoide werden zunehmend in einer Vielzahl von Forschungsbereichen eingesetzt, und die Gastroenterologie ist da keine Ausnahme, so dass eine Standardisierung dieser Techniken erforderlich ist, um diese Organoide zu erzeugen, insbesondere von Patienten stammende Magenorganoide. Unser Protokoll bietet eine Schritt-für-Schritt-Methode, um zuverlässig patienteneigene Magenorganoide aus Biopsien sowohl der Antral- als auch der Körperregion des Magens zu generieren. Insbesondere verwenden wir einen Einzelzellverdausansatz, um eine standardisierte Aussaat von Zellen zu ermöglichen, um zuverlässige Vergleiche zwischen Organoiden verschiedener Patienten anzustellen.
Unsere Ergebnisse zeigen, dass im Vergleich zu patienteneigenen Magenorganoiden aus der Körperregion des Magens diejenigen aus der Antralregion im Laufe von 20 Tagen nach der ersten Aussaat tatsächlich zahlreicher und größer werden. Diese Ergebnisse sollten von Forschern berücksichtigt werden, die Magenorganoide aus verschiedenen Regionen des Magens verwenden möchten.
Übersicht
Diese Forschung untersucht die erblichen Ursachen von Magenkrebs und konzentriert sich auf Varianten in den CDH1- und CTNNA1-Genen. Die Studie präsentiert ein zuverlässiges Protokoll zur Erzeugung patientenabgeleiteter Magenorganoide aus Biopsiegewebe, das während einer oberen Endoskopie gewonnen wurde, und zeigt Unterschiede in den Wachstumsraten zwischen Organoiden, die aus den Antrum- und Körperregionen des Magens stammen.
Wichtige Studienkomponenten
Forschungsbereich
- Erbliche Ursachen von Magenkrebs
- Erzeugung von Magenorganoiden
- Standardisierung biologischer Techniken
Hintergrund
- Hereditäre diffuse Magenkrebs und genetische Varianten
- Verwendung von Organoiden in der Gastroenterologieforschung
- Standardisierte Protokolle für die Entwicklung von Magenorganoiden
Verwendete Methoden
- Isolierung einzelner Zellen aus Magengewebebiopsien
- Patientenabgeleitete Magenorganoide als biologisches Modell
- Zellverdauungs- und Aussaatprotokolle in Kultur
Hauptergebnisse
- Organoide aus Antrum-Biopsiegewebe zeigen eine größere Größe und Wachstumsraten im Vergleich zu denen aus Körpergewebe
- Erhebliche Variationen in der Organoid-Morphologie bei verschiedenen Patienten
- Standardisierte Methoden ermöglichen einen zuverlässigen Wachstumsvergleich von Organoiden
Schlussfolgerungen
- Die Studie etabliert eine zuverlässige Methode zur Erzeugung von Magenorganoiden, die zukünftige Forschung zu Magenkrebs unterstützt.
- Die Ergebnisse unterstreichen die Bedeutung der Gewebeherkunft für das Wachstum von Organoiden, was für die experimentelle Reproduzierbarkeit entscheidend ist.
Häufig gestellte Fragen
Chapters in this video
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Introduction
1:20
Isolating Single Cells from Upper Endoscopy Biopsies Derived from Gastric Patients for Organoid Generation
3:36
Embedding Gastric Biopsy‐Derived Single Cells in a Basement Membrane Matrix Dome for Organoid Generation
5:37
Routine Passaging of Patient‐Derived Gastric Organoids Through Fragmentation
