Name: Ein Schweinebrandmodell zur Untersuchung des Heilungsprozesses bei mehrfachtiefen Brandwunden (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2024-02-23T13:50:00.000+00:00
Duration: 2 min 49 s
Description: Erfahren Sie ein standardisiertes Mehrfach-Verbrennungsmodell bei Yucatan-Minischweinen zur Untersuchung von Heilungsprozessen. Diese reproduzierbare Methode ermöglicht langfristige Beobachtungen mit minimierter Variabilität.

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<meta charset="utf8"></head><body>Yucatan Minipig Burn Wound Model zur Analyse von mehrtiefigen Verbrennungen

<table><tbody><tr><td>Adson Gewebezange</td><td>Jarit</td><td>130-234</td><td></td></tr><tr><td>Aluminiumperlen</td><td>Lab Armor</td><td>42370-002</td><td>Lab Armor Perlen&nbsp;</td></tr><tr><td>Buprenorphinhydrochlorid</td><td>Ranbaxy Pharmaceuticals</td><td>NDC:12469-0757-01</td><td>Buprenex injizierbares</td></tr><tr><td>Carprofen</td><td>Pfizer</td><td>NADA 141-199</td><td>Rymadyl 50mg/ml injizierbar&nbsp;</td></tr><tr><td>Zylindrischer Messingblock</td><td>Handgefertigte</td><td>N/A</td><td>Technische Zeichnung im Manuskript enthalten</td></tr><tr><td>Dermografischer Stift</td><td>McKesson</td><td>Chirurgischer Hautmarker Steril</td><td></td></tr><tr><td>Einweg #15 chirurgische Skalpelle</td><td>Medline</td><td>MDS15315</td><td>Skalpellklingen</td></tr><tr><td>Fentanyl-Pflaster</td><td>Mylan</td><td>NDC:60505-7082</td><td>Fentanyl Transdermales System</td></tr><tr><td>Isofluran&nbsp;</td><td>Piramal</td><td>NDC:66794-013-25</td><td>Isofluran, USP</td></tr><tr><td>McPherson Bipolare Gerinnungszange</td><td>Bovie</td><td>A842</td><td>Wiederverwendbare, autoklavierbare</td></tr><tr><td>Miltex verschiedene Biopsiestempel (3,4 und 5 mm)</td><td>Integra</td><td>33-38</td><td>Biopsiestempel - Größe zur Anpassung an die Studie</td></tr><tr><td>Vliesgaze</td><td>Starryshine</td><td>GZNW22</td><td>2 x 2" Vlies 4-lagige medizinische Mulleinlagen</td></tr><tr><td>Povidon-Jod</td><td>Betadin</td><td>NDC:0034-9200-88</td><td>Chirurgisches Peeling 7,5%&nbsp;</td></tr><tr><td>Sterile isotonische Natriumchloridlösung 0,9%</td><td>Aqualite System</td><td>RL-2095</td><td>Sterile Kochsalzlösung</td></tr><tr><td>Tätowierfarbe</td><td>Spaulding & Rogers</td><td>Schwarz - 2 oz - #9053</td><td></td></tr><tr><td>Tattoo Marker</td><td>Spaulding & Rogers</td><td>Special Electric Tattoo Marker</td><td></td></tr><tr><td>Tattoo Nadel</td><td>Spaulding & Rogers</td><td>1310251</td><td>Tattoo 5 Punkt Nadel</td></tr><tr><td>Tegaderm Transparent Film Dressing</td><td>3M</td><td>1.628</td><td>Großer transparenter Klebeverband</td></tr><tr><td>Temperaturgesteuerte Heizplatte</td><td>Cole-Parmer</td><td>03407-11</td><td>StableTemp Heizplatte</td></tr><tr><td>Rührer Thermometer</td><td>American Scientific</td><td>U14295</td><td>Rohr Quecksilberthermometer</td></tr><tr><td>Tiletamin und Zolazepam Hydrochlorid</td><td>Zoetis</td><td>NDC: 54771-9050</td><td>Telazol-Tinktur</td></tr><tr><td>aus Benzoe-Spray Smith</td><td>& Neffe</td><td>407000</td><td>Klebeschichtspray</td></tr><tr><td>Dreifache antibiotische Salbe</td><td>Fougera</td><td>NDC 0168-0012-31</td><td>Dreifache antibiotische Salbe</td></tr><tr><td>Tubular Stockinette</td><td>Medline</td><td>NONNET02</td><td>Curad Medline Latexfreie elastische Netze</td></tr><tr><td>Wärmedecke</td><td>3M</td><td>Bair Hugger 750 Wärmeeinheit</td><td></td></tr><tr><td>Xeroform Okklusive Gaze Strip</td><td>Covidien</td><td>8884433301</td><td>Xeroforme Vaseline Wundauflagen</td></tr><tr><td>Xylazin</td><td>Vetone</td><td>NDC:13985-704-10</td><td>AnaSed LA</td></tr><tr><td>Yucat&agrave; n Minischweine (weiblich, 30 kg)</td><td>Sinclair Bio Resources</td><td>N/A</td><td>Vollpigmentierung&nbsp;</td></tr></tbody></table>

ein schweinebrandmodell zur untersuchung des heilungsprozesses bei mehrfachtiefen brandwunden

A Swine Burn Model for Investigating the Healing Process in Multiple Depth Burn Wounds

Abbildung 2A,B zeigt die Ergebnisse mehrerer Verbrennungen am Rücken eines Yucatàn-Minischweins. Die Wunden (I) und (VII) sind Kontrollwunden (37 °C). Wunden zweiten Grades (II; III und VIII) zeigen sich mit starken Rötungen und Bläschen. Im Gegensatz dazu sind Wunden dritten Grades (IV; V; und VI) sind blaß und bis zum Abtasten verhärtet. Es ist zu beachten, dass Wunde VIII zwischen dem zweiten und dritten Grad liegt: Für die Zwecke einer laufenden Studie haben wir die Kontaktzeit auf 45 s bei 65 Grad erhöht. Abbildung 2C zeigt das Aussehen der Wunden nach der Öscharotomie am postoperativen Tag 3. An den Wunden zweiten Grades wurde eine Blasenektomie durchgeführt, und an den Wunden dritten Grades wurde eine "En-bloc"-Exzision des verhärteten verbrannten Gewebes durchgeführt, um ein lebensfähiges Wundbett für die Sekundärheilung zu schaffen. Eine minimale Kauterisation des Plexus dermalis wurde durchgeführt, wenn die Blutung nicht spontan aufhörte. Die Abbildungen 2D-F zeigen das Aussehen der Wunden zu den nachfolgenden Zeitpunkten (Woche 2, Woche 3 bzw. Woche 7).
Die histologischen Befunde sind in Abbildung 3 dargestellt (H&amp;E, 5,5x und 20x). Die Kontrollhaut (Abbildung 3A,B) zeigt eine intakte Epidermis (blaues Bracket), einschließlich eines Stratum corneum (blauer Pfeil), das am restlichen Hautgewebe anhaftet. Die Dermis zeigt eine homogene blassrosa Eosinophilie (Kollagen und elastische Fasern - rotes Sternchen). Verbrennungen zweiten Grades (Abbildung 3D,E) zeigen einen Verlust des Stratum corneum im Vergleich zu den Kontrollen (Spaltebene, entsprechend den Blasen). Die oberflächliche Dermis zeigt eine stärkere Eosinophilie und Fissuren/Frakturen innerhalb der dermalen Strukturen (blaue Pfeile). Tiefe Blutgefäße bleiben erhalten (roter Pfeil). Die Verbrennungen dritten Grades (Abbildung 3G,H) zeigen ausgedehnte Verletzungen mit erhöhter Eosinophilie der Dermis bis hin zu schweren Hautfrakturen (blaue Pfeile), die von der tiefen Dermis bis zur Unterhaut reichen (Adipozytenleere, grünes Sternchen). Schließlich ermöglicht die Trichrom-Färbung (Abbildung 3C,F,I) eine bessere Beurteilung des Bindegewebes. Es nutzt die Unterschiede in der Färbbarkeit von hitzevergälltem Kollagen, um die Brenntiefe anzuzeigen. Abbildung 3C zeigt deutlich die blauen Merkmale in der intakten Dermis der Kontrollwundbiopsie mit der oberen Epidermisschicht. Dies steht im Gegensatz zur Verbrennung zweiten Grades (Abbildung 3F), bei der der Epithelverlust mit einer Kollagendenaturierung in der oberen Dermisschicht einhergeht (weißes Sternchen). Die Wunde dritten Grades (Abbildung 3I) schließlich zeigt den Verlust der Epidermisschicht mit einer ausgedehnten roten Färbung (gelber Pfeil) der Hautschicht, was auf eine vollständige Kollagendenaturierung in dieser Hautschicht hinweist.
<img alt="Modellversuchsdiagramm für Verbrennungsverletzungen; Beheizter Messingblock für kontrollierte Induktion thermischer Verletzungen." class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66362/66362fig01.jpg" data-altupdatedat="1754922859000" data-alt="Figure 1"> Abbildung 1: Operative Raumpositionierung, Einrichtung des Verbrennungsgeräts und Studiendesign. Das Tier wird betäubt, intubiert, beatmet und in Rückenlage gelegt. Der Messingblock wird in den vorgeheizten Behälter gelegt, der mit Aluminiumperlen +/- Wasser gefüllt ist. Ein Thermometer ist zentral im Messingblock platziert, um die Überwachung der Kerntemperatur zu ermöglichen. Die angestrebte Temperatur hängt von der angestrebten Brenntiefe gemäß dem Studiendesign ab. Um Teilverbrennungen zu provozieren, wird ein Kontakt von 30 s bei 65 °C ohne zusätzlichen Druck empfohlen. Bei Verbrennungen dritten Grades wird ein Kontakt von 30 s bei 93 °C ohne zusätzlichen Druck empfohlen. Verbrennungen zweiten und dritten Grades sollten randomisiert werden, um Verzerrungen aufgrund unterschiedlicher Hautdicke zu vermeiden. Die vortätowierte Wundlokalisation ermöglicht eine einfache Überwachung jeder randomisierten Wunde während der Nachsorge. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66362/66362fig01large.jpg" target="_blank">Bitte klicken Sie hier, um eine größere Version dieser Abbildung anzuzeigen.</a>
<img alt="Verlaufsdiagramm der Wundheilung, Diagramm der kreisförmigen Hautbiopsien bei unterschiedlichen Hauttönen im Laufe der Zeit." class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66362/66362fig02.jpg" data-altupdatedat="1754922859000" data-alt="Figure 2"> Abbildung 2: Repräsentative Ergebnisse der Wundaspekte nach randomisierten mehrtiefigen Verbrennungen bei einem Yucatán-Minischwein. (A) Die Tätowierung wird durchgeführt, indem sie an der Stelle aller 8 Wundpunkte platziert wird. Jeder Standort ist nummeriert, um die Überwachung zu erleichtern. (B) Aspekt der Wunden nach der Entstehung der Verbrennung. Die Wunden I und VII sind Kontrollen, und die Wunden II, III und VIII sind Wunden mit partieller Dicke. Die Wunden IV, V und VI sind Wunden dritten Grades. (C) Aussehen der Wunden nach Öscharotomie der Wunden dritten Grades auf POD3. Eine Blasenektomie wurde auch an den teildicken Wunden durchgeführt. (D) Aspekt der Wundheilung auf POD14, der ein sauberes Wundbett der Wunden dritten Grades (II und V) und Re-Epithelisierungsinseln aus den Hautanhängseln auf den Wunden mit partieller Dicke (III, IV, VI, VII, VIII) zeigt. (E) Aspekt des Wundheilungsprozesses auf POD21, der eine Kontraktur der Wundbetten dritten Grades und eine weitere Reepithelisierung an den Wunden zweiten Grades zeigt. (F) Aspekt der Wunden auf POD49, der eine fortgeschrittene Wundkontraktur an den Wunden dritten Grades und eine subtotale Epithelisierung der partiellen Wunden mit wichtiger postinflammatorischer Hyperpigmentierung zeigt. Bitte beachten Sie, dass die angezeigten Wunden Narben an der Biopsiestelle aufweisen können. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66362/66362fig02large.jpg" target="_blank">Bitte klicken Sie hier, um eine größere Version dieser Abbildung anzuzeigen.</a>
<img alt="Histologie der Wundheilung von Verbrennungen: Kontrolle, Verbrennungen 2., 3. Grades. Gefärbte Gewebeproben, Analyse." class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66362/66362fig03.jpg" data-altupdatedat="1754922859000" data-alt="Figure 3"> Abbildung 3: Histologische Befunde. Repräsentative Ergebnisse des histologischen Aspekts der Wunden [Lichtmikroskopie 10x (A,C,D,F,G,I) und 20x (B,E,H); Hämatoxylin und Eosin (A, B, D, E, G, H); Massons Trichromie (C,F,I)]. Die Kontrollhaut (A,B) zeigt eine intakte Epidermis (schwarze Klammer), einschließlich eines Stratum corneum (schwarzer Pfeil), das am restlichen Hautgewebe anhaftet. Die Dermis zeigt eine homogene blassrosa Eosinophilie (Kollagen und elastische Fasern - rotes Sternchen). Die Trichrom-Färbung (C) zeigt das normale Aussehen der Epidermisschicht und des Bindegewebes und der dermalen Kollagenfasern. Verbrennungen zweiten Grades (D,E) zeigen einen Verlust des Stratum corneum im Vergleich zu den Kontrollen (Spaltebene, die während der Blasenektomie entfernt wurde). Die oberflächliche Dermis zeigt eine stärkere Eosinophilie und Fissuren/Frakturen innerhalb der dermalen Strukturen (blaue Pfeile). Tiefe Blutgefäße bleiben erhalten (roter Pfeil). Trichrom (F) zeigt einen Verlust des Epithels, begleitet von einer Kollagendenaturierung in der oberen Dermisschicht (gelber Pfeil). Die Verbrennungen dritten Grades (E,F) zeigen ausgedehnte Verletzungen mit erhöhter Eosinophilie der Dermis bis hin zu schweren Hautfrakturen (blaue Pfeile), die von der tiefen Dermis bis zur Unterhaut reichen (Adipozytenleere, grünes Sternchen) und ausgedehnte rote Färbung (I, gelber Pfeil) der Hautschicht mit Trichrom, was auf eine vollständige Kollagendenaturierung hinweist. Maßstabsleisten: A,D,G, 500 μm; B,E,H, 100 μm; C,F,I, 200 μm. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66362/66362fig03large.jpg" target="_blank">Bitte klicken Sie hier, um eine größere Version dieser Abbildung zu sehen.</a>
<img alt="Statisches Gleichgewicht; Durchdringung des Thermometers; Diagramm, Aufbau, Ergebnis; Experiment zur thermischen Ausdehnung." class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66362/66362fig04.jpg" data-altupdatedat="1754922859000" data-alt="Figure 4"> Abbildung 4: Technische Zeichnung des Messingblocks, der für die Herstellung von Brandwunden verwendet wurde. (A) Abbildung mit den Abmessungen des Messingblocks, der für den Bau des Blocks verwendet wurde. Ein Durchmesser von 40 mm ermöglicht es, Wunden optimal zu vergrößern und gleichzeitig 8 Wunden an einem 20-30 kg schweren Yucatan-Minischwein zu gestalten. (B) Diagramm, das den endgültigen Aspekt des Messingblocks mit einem zentralen Tunnel zeigt, der es dem Thermometer ermöglicht, die Kerntemperatur des Blocks zu messen. (C) Abbildung mit Hervorhebung des auf 65 °C erhitzten Messingblocks, wie er vom Quecksilberthermometer angezeigt wird. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66362/66362fig04large.jpg" target="_blank">Bitte klicken Sie hier, um eine größere Version dieser Abbildung anzuzeigen.</a>

Ein Schweinebrandmodell zur Untersuchung des Heilungsprozesses bei mehrfachtiefen Brandwunden

Burn wound healing is a complex and long process. Despite extensive experience, plastic surgeons and specialized teams in burn centers still face ...

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Research

Forschung

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Medicine

Medizin

Zu eng mimischen Modus von Brandverletzungen erfordert das Zusammenspiel von klinischen Beobachtungen und Studien in Tiermodellen. In dieser Studie wurde ein Schweine-Modell der schwere Brandverletzung gegründet, um einer experimentellen Dressing in physiologische und pathophysiologische Einstellungen zu beurteilen.

Schwere Brandverletzungen in einem Schweine-Modell zur Beurteilung der klinischen Dressing

Chronische Wunden, die gegen Antibiotika resistent sind, stellen eine große Bedrohung für das Gesundheitssystem dar. Biofilminfektionen sind hartnäckig und feindlich und können zu einem mangelhaften funktionellen Wundverschluss führen. Wir berichten über ein klinisch relevantes Schweinemodell von Biofilm-infizierten chronischen Wunden voller Dicke. Dieses Modell eignet sich sowohl für mechanistische Studien als auch für das Testen von Interventionen.

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