Das Mouse Stroke Unit Protocol mit standardisiertem neurologischem Scoring für translationale Maus-Schlaganfallstudien

Das Maus-Schlaganfallmodell mit intravaskulärem Verschluss lässt sich gut mit den aktuellen Thrombektomie- und Reperfusionsbehandlungen übersetzen, jedoch nicht mit den effektiven klinischen Stroke-Unit-Routinen. Hier in diesem Video demonstrieren wir unser bewährtes translationales Maus-Stroke-Unit-Konzept und unsere standardisierte neurologische Bewertungsskala. Die erste Methode unseres Protokolls bezieht sich auf die Maus-Stroke-Unit.

Beurteilen Sie täglich den klinischen Status des Tieres und berechnen Sie seine Risikobewertung, indem Sie die Punkte wie hier gezeigt addieren. Passen Sie die Häufigkeit und Intensität der Unterstützung an das RSS und die Phase des Tieres nach dem Schlaganfall an. Für eine aktive Ernährungsunterstützung greifen und halten Sie die Maus sanft, aber fest von ihrem Halsfell weg.

Stabilisieren Sie die Wange mit einem Mittelfinger und schieben Sie den Mittelfinger in Richtung der Nase der Maus gegen die Wange und halten Sie die Position. Platzieren Sie die Spitze der Spritze zwischen den Zähnen in Richtung der Innenseite der Wange. Geben Sie jedes Mal etwa 40 oder 50 Mikroliter Gelfutter.

Bringen Sie die Maus vorsichtig in den Käfig zurück und wiederholen Sie die Fütterung nach ein bis zwei Minuten. Als nächstes wird die Fokuskomponente der Experimental Stroke Scale demonstriert. Beginnen Sie mit dem ersten Test für Parese der Vordergliedmaßen.

Hebe die Maus vorsichtig von ihrem Schwanzansatz und untersuche die Vordergliedmaßen. Punktzahl Null für symmetrische Vorwärtsstreckung und Beweglichkeit der Vordergliedmaßen. Punktzahl eins für leichte Flexion und reduzierte Bewegung der kontraläsionalen Gliedmaßen.

Note zwei für eine leichte Beugung der kontraläsionalen Extremität. Punktzahl drei für das Anhaften der kontraläsionalen Gliedmaße am Rumpf und vier Punkte für eine plegische Gliedmaße ohne Gliedmaßen oder Körperbewegungen. Beurteilen Sie nun die Parese der Hintergliedmaßen.

Halten Sie die Maus weiterhin wie im ersten Test an der Schwanzbasis fest. Untersuchen Sie die Hintergliedmaßen, Punktzahl Null für symmetrische Streckung und Bewegung der Hintergliedmaßen. Punktzahl eins für die Asymmetrie der Hintergliedmaßen mit deutlich verminderter Bewegung und asymmetrischer Position der kontraläsionalen Hintergliedmaße.

Halten Sie die Maus weiterhin an der Schwanzbasis, um ihre Rumpfsymmetrie zu beurteilen. Null für eine normale symmetrische Rumpfbeugung zu beiden Seiten und keine anhaltende Rumpfbeugung über 30 Grad zur vertikalen Achse. Punktzahl eins für eine ausgeprägte Rumpfbeugung über 30 Grad zur vertikalen Achse mit kontraläsionaler Dominanz.

Testen Sie nun auf Kreisverhalten. Legen Sie die Maus vorsichtig auf eine ebene Fläche und lassen Sie sie mindestens eine Minute lang frei bewegen. Beobachte sein Bewegungsmuster.

Punktzahl Null, wenn sich die Maus schnell und linear bewegt. Punktzahl eins für die Tendenz, sich zur Seite zu drehen, aber nicht in engen Kreisen. Erzielen Sie zwei Punkte für geschlossene, unbeständige Kreise auf einer Seite.

Punkten Sie drei für konstant enge Kreise zu einer Seite und vier Punkte für Schwenken, Schwanken oder gar keine Bewegung. Testen Sie nun auf Körpersymmetrie. Fahren Sie mit Test vier fort und lassen Sie die Maus frei auf der ebenen Fläche bewegen.

Beobachten Sie die Achse von Nase zu Heck. Null Punkte für die normale Körperhaltung, den erhöhten Rumpf von der Bank und den geraden Schwanz. Punktzahl eins für leichte Asymmetrie, wenn sich der Körper leicht zur Seite biegt und der Schwanz distal gebogen ist.

Punktzahl zwei für moderate Asymmetrie, wenn sich der Körper zur kontraläsionalen Seite neigt oder beugt und der Schwanz proximal gebeugt ist. Punktzahl drei für ausgeprägte Asymmetrie, wenn der Körper gebeugt ist, eine Seite auf der Bank liegt und der Schwanz deutlich gebogen ist. Und vier Punkte für extreme Asymmetrie, wenn der Körper gebeugt ist und eine Seite ständig auf der Bank liegt.

Fahren Sie nun bei Test sechs mit dem fünften Test fort und beobachten Sie den Gang. Überprüfen Sie auf motorische Gangdefizite. Punktzahl Null für normalen Gang, wenn die Gliedmaßen flexibel, symmetrisch und schnell sind.

Punktzahl eins für steifen, unflexiblen und langsameren Gang ohne Hinken. Punktzahl zwei für klares Hinken mit asymmetrischen Bewegungen. Punkte drei für Zittern, Driften oder Fallen nach einem sanften Schubs.

Vier Punkte für keinen spontanen Spaziergang. Jetzt auf obligatorisches Zirkeln testen. Halten Sie die Maus an der Schwanzbasis fest und heben Sie sie leicht von der Oberfläche ab, so dass sie auf den Vordergliedmaßen läuft.

Beobachte seine Bewegung. Punktzahl Null für normale lineare Bewegung. Punktzahl eins für die Tendenz, sich zur Seite zu drehen.

Erzielen Sie zwei Punkte, wenn die Maus bei vollständig geschlossenen Kreisen zur Seite kreist. Ein dritter Punkt, wenn er sich dreht und sich träge bewegt. Und Punktzahl vier, wenn die Maus nicht vorrückt und der vordere Teil des Kofferraums auf der Bank liegt.

Hier beschreiben wir, wie Sie den Haltungstest durchführen. Platzieren Sie die Maus wie im Video gezeigt auf Ihrer Handfläche und schwingen Sie sie vorsichtig hin und her. Beachten Sie, wie die Maus ihre aufrechte Position beibehält und gegen seitliche Kräfte balanciert, ihr Körper berührt nicht die Handfläche oder die Finger.

Aufnahmen von unterschiedlichen Ergebnissen dieses Tests sind nicht hilfreich, da die Bewertung stark von der Erkennung schneller und subtiler Bewegungen der Maus abhängt, die von der Hand wahrgenommen werden, und visuelle Hinweise für die Bewertung nicht ausreichen. Wir beschreiben jede Punktzahl in Textform, um Ihnen die Arbeit zu erleichtern. Beurteilen Sie nun die Platzierung der Vordergliedmaßen.

Halten Sie die Maus von ihrem Rücken oder von ihrer Heckbasis und richten Sie sie auf den Strahl als Ziel, das Sie erreichen können. Achten Sie auf symmetrische Reichweite. Sobald es den Balken greift, ziehen Sie es vorsichtig weg und beobachten Sie, ob sich die Vordergliedmaßen symmetrisch lösen.

Punktzahl Null für symmetrisches Reach Out and Release. Punktzahl eins für jede Asymmetrie. Testen Sie nun auf das sensomotorische Defizit der Vordergliedmaßen.

Halten Sie die Maus wie demonstriert am Rücken und stimulieren Sie die Vorderpfoten nacheinander mit einer feinen Spitze. Punktzahl Null für normale, prompte Greifbewegungen. Punktzahl eins für fehlendes oder deutlich verzögertes Greifen der kontraläsionalen Vorderpfote.

Testen Sie als Nächstes das Beam-Walking. Platzieren Sie die Maus mit der Nasen-Heck-Achse parallel dazu auf dem Balken und lassen Sie sie auf dem Balken balancieren oder laufen. Beobachten Sie Gleichgewicht, Gliedmaßenlähmungen und Stürze.

Halten Sie Ihre Hand immer unter dem Tier, falls es herunterfällt. Ein Nullpunkt, wenn die Maus in ruhiger Haltung balanciert und auf eine Seite des Balkens zugeht. Erzielen Sie eine Punktzahl, wenn er die Seite des Balkens greift und nicht darauf läuft.

Seien Sie sich bewusst, dass es einige Zeit dauern kann, bis es noch auf dem Balken balanciert. Es wird zwei Punkte erzielt, wenn ein Glied vom Balken fällt. Erziele drei Punkte, wenn zwei Gliedmaßen vom Balken fallen.

Sie erhalten vier Punkte, wenn die Maus versucht, auf dem Balken zu balancieren, aber nach 40 Sekunden herunterfällt. Beachten Sie, dass die Maus in diesem Test bis zu 60 Sekunden lang beobachtet werden sollte. Fünf Punkte, wenn es zu einem Sturz kommt, der zwischen 20 und 40 Sekunden auftritt.

Und es gibt sechs Punkte, wenn es keinen Versuch macht, zu balancieren oder am Balken zu hängen. Beurteilen Sie das Whisker-Gefühl. Stellen Sie die Maus auf eine offene Arbeitsplatte und stimulieren Sie erfolgreich ihre Schnurrhaare mit einem dünnen Wattestäbchen mit langer Spitze.

Beobachten Sie aus einem toten Winkel kommend seine Abbiegereaktion. Punktzahl Null für normales schnelles Drehen bei bilateraler Stimulation. Punktzahl eins für eine langsamere kontraläsionale Reaktion.

Punktzahl zwei für fehlende kontraläsionale Reaktion. Punktzahl drei für fehlendes kontraläsionales und langsameres ipsilesionales Ansprechen. Und Punktzahl vier für bilaterale fehlende Antwort.

Test der Kletterfähigkeit. Platzieren Sie die Maus in der Mitte einer gummibeschichteten Oberfläche im 45-Grad-Winkel und beobachten Sie ihre Reaktion, während sie versucht zu klettern. Ein Nullpunkt, wenn die Maus schnell an die Spitze der Oberfläche klettert.

Punktzahl eins, wenn er mit Anstrengung steigt und eine Schwäche der Gliedmaßen vorhanden ist. Erzielen Sie zwei Punkte, wenn es sich an der Steigung festhält und weder ausrutscht noch klettert. Erzielen Sie drei Punkte, wenn er trotz aller Anstrengungen, einen Sturz zu verhindern, den Hang hinunterrutscht.

Und es gibt vier Punkte, wenn es rutscht, ohne sich anstrengen zu müssen, um einen Sturz zu verhindern. Das Protokoll der Maus-Schlaganfalleinheit hat das Überleben von Mäusen nach dem filamentösen Verschluss der mittleren Hirnarterie reproduzierbar unterstützt und eine Überlebensrate von 80 % aufrechterhalten. Das fokale ESS zeichnet sich durch die Erkennung neurologischer Defizite, die Erfassung der Genesung und die Aufrechterhaltung der Empfindlichkeit für bis zu sechs Monate nach dem Schlaganfall aus. Ergänzend zum fokalen ESS können Sie einen Leiter-Sprossen-Test verwenden, um sowohl die Schwäche der Vorder- als auch der Hintergliedmaßen für bis zu sechs Monate zu erkennen und zu quantifizieren.