Ein multiples integriertes soziales Stressmodell für psychiatrische Störungen bei weiblichen C57BL/6J-Mäusen

Diese Forschung zielt darauf ab, zu verstehen, wie chronischer sozialer Stress zu psychiatrischen Symptomen bei weiblichen Mäusen führt, indem ein multiintegriertes soziales Stressmodell etabliert wird. Die meisten derzeit verfügbaren Modelle für psychiatrische Störungen wurden mit männlichen Tieren etabliert. Dieses Protokoll stellt ein neues Mausmodell vor, das entwickelt wurde, um diese Störungen bei weiblichen Mäusen zu untersuchen. Diese Studie hat ein zuverlässiges Tiermodell entwickelt, das es uns ermöglicht, die neurophysiologischen Mechanismen zu untersuchen, die psychiatrischen Störungen bei weiblichen Mäusen zugrunde liegen.

[Erzähler] Platzieren Sie zunächst ein 10 Zentimeter langes Acrylrohr mit einem Innendurchmesser von 26 Millimetern in jedem Käfig der weiblichen Probandmäuse und Gewinnerkandidaten, damit sie sich drei Tage lang akklimatisieren und lernen können, es zu durchlaufen. Um Mäuse für den Röhrenwettbewerb zu trainieren, fassen Sie vorsichtig den Schwanz jeder Maus und legen Sie ihn auf den Tisch. Halten Sie dann die Maus am Schwanz und platzieren Sie sie an einem Ende des Rohrs. Lassen Sie den Schwanz los, sobald die Maus in die Röhre eindringt, und lassen Sie sie freiwillig passieren. Platzieren Sie nun die Maus am gegenüberliegenden Ende der Röhre und wiederholen Sie den gleichen Vorgang. Nachdem Sie den gesamten Vorgang noch einmal wiederholt haben, bringen Sie die Maus in ihren Ausgangskäfig zurück. Bereiten Sie für das Gewinnerscreening ein 30 Zentimeter langes Acrylrohr mit einem Innendurchmesser von 26 Millimetern vor und zeichnen Sie eine sichtbare Mittellinie auf das Rohr. Halten Sie beide Mäuse an den Schwänzen und platzieren Sie sie an den gegenüberliegenden Enden des Röhrchens. Lassen Sie sie in der Mitte eintreten und sich treffen, lassen Sie sie dann gleichzeitig los und starten Sie den Timer. Identifizieren Sie den Gewinner als die Maus, die die andere Maus aus der Röhre drückt, und vergeben Sie einen Punkt. Bringen Sie beide Mäuse in ihren Heimatkäfig zurück. Ordnen Sie die Mäuse basierend auf ihrer Gesamtpunktzahl ein. Setzen Sie für das CD1-Aggressor-Screening eine männliche C57-Maus für drei Minuten direkt in den Heimkäfig eines CD1-Männchens. Notieren Sie die Latenz bis zum ersten Angriff, die Anzahl der Angriffe und die Dauer aggressiver Verhaltensweisen innerhalb des Zeitraums von drei Minuten als Indikatoren für die Aggressivität und wiederholen Sie den Screening-Vorgang für zwei weitere Tage. Für das Scheitern des sozialen Wettbewerbs platzieren Sie eine mehrfach integrierte soziale Stress- oder MISS-Maus und eine Gewinnermaus an gegenüberliegenden Enden der Röhre, so dass sie vorwärts gehen und sich in der Mitte treffen. Die MISS Maus wird vom Gewinner aus der Röhre geschoben. Tauschen Sie die Positionen der beiden Mäuse und wiederholen Sie die Interaktion. Bringen Sie dann sowohl die MISS- als auch die Gewinnermäuse in ihre Heimkäfige zurück. Für die modifizierte Modellierung des stellvertretenden sozialen Niederlagenstresses platzieren Sie eine weibliche MISS-Maus in den Käfig eines CD1-Aggressors, der unter einer perforierten Acrylabdeckung eingesperrt ist, um eine stellvertretende Beobachtung aggressiver Interaktionen zu ermöglichen. Führe eine männliche C57-Eindringlingsmaus in den Käfig ein, die 10 Minuten lang von der CD1-Maus physisch angegriffen wird. Entfernen Sie nach 10 Minuten den männlichen Eindringling und lassen Sie die weibliche MISS-Maus und weitere fünf Minuten sensorische Exposition gegenüber der CD1-Maus zu. Ersetzen Sie nach fünf Minuten die CD1-Maus durch eine neuartige männliche C57-Eindringlingsmaus und wiederholen Sie den gesamten Vorgang dreimal. Bringen Sie dann die MISS-Maus in ihren Heimatkäfig zurück. Um die unausweichliche Belastung der Überbelegung zu modellieren, platzieren Sie als Nächstes eine undurchsichtige Hülle in einem Standardkäfig mit Einstreu. Führen Sie 12 bis 15 weibliche Mäuse, entweder alle MISS-Mäuse oder gemischt mit anderen Weibchen, täglich für 30 Minuten in den Ärmel ein. Bei sozialer Isolation sollten MISS-Mäuse einzeln untergebracht werden, wenn sie für den Rest des 10-tägigen Modellierungszeitraums nicht unter sozialem Wettbewerbsversagen, stellvertretendem Niederlagenstress oder Überfüllungsstress leiden. Der Saccharose-Präferenztest, bei dem die Anhedonie durch Messung der Präferenz für eine süße Lösung gegenüber Wasser bewertet wird, zeigte, dass die Saccharosepräferenz bei MISS-exponierten Mäusen im Vergleich zu naiven Kontrollen signifikant niedriger war. Die Gesamtflüssigkeitsaufnahme im Saccharosepräferenztest, die sowohl Wasser als auch Saccharose umfasste, unterschied sich nicht signifikant zwischen MISS und naiven Mäusen, was darauf hindeutet, dass die reduzierte Saccharosepräferenz nicht auf einen veränderten Flüssigkeitsverbrauch zurückzuführen war. Der Schwanzaufhängungstest, bei dem Verhaltensverzweiflung durch Messung der passiven Immobilität bewertet wird, zeigte, dass MISS-exponierte Mäuse signifikant längere Immobilitätszeiten aufwiesen als naive Mäuse. Darüber hinaus zeigte der Freilandtest, der zur Bewertung von Angstzuständen verwendet wurde, indem die Zeit gemessen wurde, die in der Mitte einer offenen Arena verbracht wurde, dass MISS-exponierte Mäuse im Vergleich zu naiven Mäusen signifikant weniger Zeit in der zentralen Zone verbrachten. Das erhöhte Plus-Labyrinth, das Angst durch Vermeidung offener Arme misst, zeigte, dass MISS-exponierte Mäuse signifikant weniger Zeit in den offenen Armen verbrachten als naive Kontrollen.