Name: Experimentelle Infektion von Mäusen mit dem parasitären Fadenwurm Strongyloides ratti (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-01-17T13:50:00.000+00:00
Duration: 10 min 12 s
Description: Lernen Sie die experimentelle Infektion von Mäusen mit dem parasitären Fadenwurm Strongyloides ratti. Dieses Protokoll zeigt Methoden zur Aufrechterhaltung des Parasitenzyklus und zur Quantifizierung in verschiedenen Geweben.

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<meta charset="utf8"></head><body>Untersuchung der Strongyloides ratti-Infektion bei Labormäusen

<ol><li>Olsen, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Strongyloidiasis+-+the+most+neglected+of+the+neglected+tropical+diseases%5BTitle%5D)+AND+%22Trans+Royal+Soc+Tropical+Med+Hygiene%22%5BJournal%5D)">Strongyloidiasis - the most neglected of the neglected tropical diseases.</a> Trans Royal Soc Tropical Med Hygiene. 103 (10), 967-972 (2009).</li>
<li>Buonfrate, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+global+prevalence+of+Strongyloides+stercoralis+infection%5BTitle%5D)+AND+%22Pathogens%22%5BJournal%5D)">The global prevalence of Strongyloides stercoralis infection.</a> Pathogens. 9 (6), 468(2020).</li>
<li>Dawkins, H. J. S., Grove, D. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Attempts+to+establish+infections+with+Strongyloides+stercoralis+in+mice+and+other+laboratory+animals%5BTitle%5D)+AND+%22J+Helminthol%22%5BJournal%5D)">Attempts to establish infections with Strongyloides stercoralis in mice and other laboratory animals.</a> J Helminthol. 56 (1), 23-26 (1982).</li>
<li>Abraham, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Strongyloides+stercoralis%3A+protective+immunity+to+third-stage+larvae+inBALB%2FcByJ+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Parasitol%22%5BJournal%5D)">Strongyloides stercoralis: protective immunity to third-stage larvae inBALB/cByJ mice.</a> Exp Parasitol. 80 (2), 297-307 (1995).</li>
<li>Breloer, M., Abraham, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Strongyloides+infection+in+rodents%3A+immune+response+and+immune+regulation%5BTitle%5D)+AND+%22Parasitology%22%5BJournal%5D)">Strongyloides infection in rodents: immune response and immune regulation.</a> Parasitology. 144 (3), 295-315 (2017).</li>
<li>Breloer, M., Linnemann, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Strongyloides+ratti+infection+in+mice%3A+immune+response+and+immune+modulation%5BTitle%5D)+AND+%22Philosophical+Trans+Royal+Society+B%22%5BJournal%5D)">Strongyloides ratti infection in mice: immune response and immune modulation.</a> Philosophical Trans Royal Society B. 379 (1894), 20220440(2024).</li>
<li>Dawkins, H. J. S., Grove, D. I., Dunsmore, J. D., Mitchell, G. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Strongyloides+ratti%3A+Susceptibility+to+infection+and+resistance+to+reinfection+in+inbred+strains+of+mice+as+assessed+by+excretion+of+larvae%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Parasitol%22%5BJournal%5D)">Strongyloides ratti: Susceptibility to infection and resistance to reinfection in inbred strains of mice as assessed by excretion of larvae.</a> Int J Parasitol. 10 (2), 125-129 (1980).</li>
<li>Ehrens, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Eosinophils+and+neutrophils+eliminate+migrating+Strongyloides+ratti+larvae+at+the+site+of+infection+in+the+context+of+extracellular+DNA+trap+formation%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Immunol%22%5BJournal%5D)">Eosinophils and neutrophils eliminate migrating Strongyloides ratti larvae at the site of infection in the context of extracellular DNA trap formation.</a> Front Immunol. 12, 715766(2021).</li>
<li>Eschbach, M. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Strongyloides+ratti+infection+induces+transient+nematode-specific+Th2+response+and+reciprocal+suppression+of+IFN-%CE%B3+production+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Parasite+Immunol%22%5BJournal%5D)">Strongyloides ratti infection induces transient nematode-specific Th2 response and reciprocal suppression of IFN-γ production in mice.</a> Parasite Immunol. 32 (5), 370-383 (2010).</li>
<li>Dawkins, H., Muir, G., Grove, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Histopathological+appearances+in+primary+and+secondary+infections+with+Strongyloides+ratti+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Parasitol%22%5BJournal%5D)">Histopathological appearances in primary and secondary infections with Strongyloides ratti in mice.</a> Int J Parasitol. 11 (1), 97-103 (1981).</li>
<li>Tada, I., Mimori, T., Nakai, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Migration+route+of+Strongyloides+ratti+in+albino+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Jap+J+Parasit%22%5BJournal%5D)">Migration route of Strongyloides ratti in albino rats.</a> Jap J Parasit. 28 (4), 219-227 (1979).</li>
<li>Reitz, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mucosal+mast+cells+are+indispensable+for+the+timely+termination+of+Strongyloides+ratti+infection%5BTitle%5D)+AND+%22Mucosal+Immunol%22%5BJournal%5D)">Mucosal mast cells are indispensable for the timely termination of Strongyloides ratti infection.</a> Mucosal Immunol. 10 (2), 481-492 (2017).</li>
<li>Viney, M. E., Lok, J. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+biology+of+Strongyloides+spp%5BTitle%5D)+AND+%22WormBook%22%5BJournal%5D)">The biology of Strongyloides spp.</a> WormBook. , 1-17 (2018).</li>
<li>Reitz, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Interleukin-9+promotes+early+mast+cell-mediated+expulsion+of+Strongyloides+ratti+but+is+dispensable+for+generation+of+protective+memory%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">Interleukin-9 promotes early mast cell-mediated expulsion of Strongyloides ratti but is dispensable for generation of protective memory.</a> Sci Rep. 8 (1), 8636(2018).</li>
<li>Breloer, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cutting+edge%3A+The+BTLA-HVEM+regulatory+pathway+interferes+with+protective+immunity+to+intestinal+Helminth+infection%5BTitle%5D)+AND+%22J+Immunol%22%5BJournal%5D)">Cutting edge: The BTLA-HVEM regulatory pathway interferes with protective immunity to intestinal Helminth infection.</a> J Immunol. 194 (4), 1413-1416 (2015).</li>
<li>Blankenhaus, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Foxp3%2B+regulatory+T+cells+delay+expulsion+of+intestinal+nematodes+by+suppression+of+IL-9-driven+mast+cell+activation+in+BALB%2Fc+but+not+in+C57BL%2F6+mice%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+Pathogens%22%5BJournal%5D)">Foxp3+ regulatory T cells delay expulsion of intestinal nematodes by suppression of IL-9-driven mast cell activation in BALB/c but not in C57BL/6 mice.</a> PLoS Pathogens. 10 (2), e1003913(2014).</li>
<li>Niamatali, S., Nolan, T. J., Schad, G. A. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aNiamatali%2C+S+%22Can+Autoinfection+be+Provoked+in+the+Strongyloides+ratt%2F-infected+Gerbil%2C+Meriones+unguiculatus%22">Can Autoinfection be Provoked in the Strongyloides ratt/-infected Gerbil, Meriones unguiculatus</a>. 59 (2), 149-152 (1992).</li>
<li>Gardner, M. P., Gems, D., Viney, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Extraordinary+plasticity+in+aging+in+Strongyloides+ratti+implies+a+gene-regulatory+mechanism+of+lifespan+evolution%5BTitle%5D)+AND+%22Aging+Cell%22%5BJournal%5D)">Extraordinary plasticity in aging in Strongyloides ratti implies a gene-regulatory mechanism of lifespan evolution.</a> Aging Cell. 5 (4), 315-323 (2006).</li>
<li>Viney, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Developmental+switching+in+the+parasitic+nematode+Strongyloides+ratti%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Biol+Sci%22%5BJournal%5D)">Developmental switching in the parasitic nematode Strongyloides ratti.</a> Proc Biol Sci. 263 (1367), 201-208 (1996).</li>
<li>Dawkins, H. J., Thomason, H. J., Grove, D. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+occurrence+of+Strongyloides+ratti+in+the+tissues+of+mice+after+percutaneous+infection%5BTitle%5D)+AND+%22J+Helminthol%22%5BJournal%5D)">The occurrence of Strongyloides ratti in the tissues of mice after percutaneous infection.</a> J Helminthol. 56 (1), 45-50 (1982).</li>
<li>Takamure, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Migration+route+of+Strongyloides+venezuelensis+in+rodents%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Parasitol%22%5BJournal%5D)">Migration route of Strongyloides venezuelensis in rodents.</a> Int J Parasitol. 25 (8), 907-911 (1995).</li>
<li>Filbey, K., Bouchery, T., Le Gros, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+role+of+ILC+2+in+hookworm+infection%5BTitle%5D)+AND+%22Parasite+Immunol%22%5BJournal%5D)">The role of ILC 2 in hookworm infection.</a> Parasite Immunol. 40 (2), e12429(2018).</li>
<li>Allen, J. E., Sutherland, T. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Host+protective+roles+of+type+2+immunity%3A+Parasite+killing+and+tissue+repair%2C+flip+sides+of+the+same+coin%5BTitle%5D)+AND+%22Semin+Immunol%22%5BJournal%5D)">Host protective roles of type 2 immunity: Parasite killing and tissue repair, flip sides of the same coin.</a> Semin Immunol. 26 (4), 329-340 (2014).</li>
<li>Dulovic, A., Puller, V., Streit, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Optimizing+culture+conditions+for+free-living+stages+of+the+nematode+parasite+Strongyloides+ratti%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Parasitol%22%5BJournal%5D)">Optimizing culture conditions for free-living stages of the nematode parasite Strongyloides ratti.</a> Exp Parasitol. 168, 25-30 (2016).</li>
<li>Douglas, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transgenic+expression+of+a+T+cell+epitope+in+Strongyloides+ratti+reveals+that+helminth-specific+CD4%2B+T+cells+constitute+both+Th2+and+Treg+populations%5BTitle%5D)+AND+%22PLOS+Pathogens%22%5BJournal%5D)">Transgenic expression of a T cell epitope in Strongyloides ratti reveals that helminth-specific CD4+ T cells constitute both Th2 and Treg populations.</a> PLOS Pathogens. 17 (7), e1009709(2021).</li>
<li>Vadlamudi, R. S., Chi, D. S., Krishnaswamy, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intestinal+strongyloidiasis+and+hyperinfection+syndrome%5BTitle%5D)+AND+%22Clin+Mol+Allergy%22%5BJournal%5D)">Intestinal strongyloidiasis and hyperinfection syndrome.</a> Clin Mol Allergy. 4 (1), 8(2006).</li>
<li>Viney, M., Kikuchi, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Strongyloides+ratti+and+S.+venezuelensis-+rodent+models+of+Strongyloides+infection%5BTitle%5D)+AND+%22Parasitology%22%5BJournal%5D)">Strongyloides ratti and S. venezuelensis- rodent models of Strongyloides infection.</a> Parasitology. 144 (3), 285-294 (2017).</li>
<li>Patton, J. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Methylprednisolone+acetate+induces%2C+and+%CE%947-dafachronic+acid+suppresses%2C+Strongyloides+stercoralis+hyperinfection+in+NSG+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci%22%5BJournal%5D)">Methylprednisolone acetate induces, and Δ7-dafachronic acid suppresses, Strongyloides stercoralis hyperinfection in NSG mice.</a> Proc Natl Acad Sci. 115 (1), 204-209 (2018).</li>
<li>Reitz, M., Brunn, M. L., Voehringer, D., Breloer, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Basophils+are+dispensable+for+the+establishment+of+protective+adaptive+immunity+against+primary+and+challenge+infection+with+the+intestinal+helminth+parasite+Strongyloides+ratti%5BTitle%5D)+AND+%22PLOS+Neglected+Trop+Dis%22%5BJournal%5D)">Basophils are dispensable for the establishment of protective adaptive immunity against primary and challenge infection with the intestinal helminth parasite Strongyloides ratti.</a> PLOS Neglected Trop Dis. 12 (11), e000699(2018).</li>
<li>Blankenhaus, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Strongyloides+ratti+infection+induces+expansion+of+Foxp3%2B+regulatory+T+cells+that+interfere+with+immune+response+and+parasite+clearance+in+BALB%2Fc+Mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Immunol%22%5BJournal%5D)">Strongyloides ratti infection induces expansion of Foxp3+ regulatory T cells that interfere with immune response and parasite clearance in BALB/c Mice.</a> J Immunol. 186 (7), 4295-4305 (2011).</li>
<li>Hartmann, W., Blankenhaus, B., Brunn, M. L., Meiners, J., Breloer, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Elucidating+different+pattern+of+immunoregulation+in+BALB%2Fc+and+C57BL%2F6+mice+and+their+F1+progeny%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">Elucidating different pattern of immunoregulation in BALB/c and C57BL/6 mice and their F1 progeny.</a> Sci Rep. 11 (1), 1536(2021).</li>
<li>Meiners, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((IL-33+facilitates+rapid+expulsion+of+the+parasitic+nematode+Strongyloides+ratti+from+the+intestine+via+ILC2-+and+IL-9-driven+mast+cell+activation%5BTitle%5D)+AND+%22PLOS+Pathogens%22%5BJournal%5D)">IL-33 facilitates rapid expulsion of the parasitic nematode Strongyloides ratti from the intestine via ILC2- and IL-9-driven mast cell activation.</a> PLOS Pathogens. 16 (12), e1009121(2020).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>50 ml  Röhren</td><td>Sarstedt, N<img alt="Gleichung 1" src="/files/ftp_upload/67533/67533eq01.jpg" style="margin: auto; ">mbrecht, DE </td><td>6,25,47,254</td><td>50 ml https://www.sarstedt.com/produkte/labor/reagenz-zentrifugenroehren/roehren/produkt/62.547.254/</td></tr> <tr><td>BD Micro-Fine U100 Insulin 0,5 ml</td><td>BD Bioscience</td><td>7468077</td><td>0,5 ml https://www.bestimed.de/bd-micro-fine-insulinspritze-05-ml-u100-8-mm-100x05ml-324825.html</td></tr><tr><td>Zentrifugenröhrchen</td><td>Sarstedt, Nü mbrecht, DE </td><td>72.706</td><td>1,5 ml https://www.sarstedt.com/produkte/labor/mikro-schraubroehren-reagiergefaesse/reagiergefaesse/produkt/72.706/</td></tr> <tr><td>Charcoal</td><td>Roth</td><td>0998.3</td><td>5 kg</td></tr><tr><td>https://www.carlroth.com/de/de/aktivkohle/aktivkohle/p/0998.3 Falcon 6-Well-Multiwell-Kulturplatte mit klarem Boden, unbehandelte Zell-Multiwell-Kulturplatte, mit Deckel, steril</td><td>Corning 351146</td><td></td><td>6-Well-https://www.corning.com/emea/de/search.html?_cookie=false &amp; searchText=351146&amp; search-initialcatalog =Unternehmen+Kommunikation&amp; initialResultType=Produkte</td></tr><tr><td>Tiefkühlschrank &amp; Kühlschrank</td><td>Liebherr-Hausgerä te, Rostock, DE </td><td></td><td></td></tr><tr><td>Greiner Bio-One  24-Well-Platten fü r Zellkulturen aus Polystyrol</td><td>Fisher Scientific</td><td>10177380</td><td>24-Well-https://www.fishersci.de/shop/products/polystyrene-24-well-cell-culture-multiwell-plate/10177380#?keyword=24-well</td></tr><tr><td>Incidin Premium Wipes</td><td>Ecolab Healthcare</td><td>100 10 279</td><td>https://www.ecolabhealthcare.de/website/seiten/produkte/flaechendesinfektion/tuecher/incidin_premium_wipes.php</td></tr><tr><td>Inkubator 25" C</td><td>Heraeus Instruments, Hanau, DE</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Inkubator 37° C</td><td>Heraeus Instruments, Hanau, DE</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Mikroskop</td><td>Helmut Hund, Wetzlar, DE</td><td></td><td>4 x Objektiv, 10 x Okularlinse </td></tr><tr><td>Parafilm M</td><td>Parafilm</td><td>11772644</td><td>4 Zoll X 125 ft. https://www.fishersci.de/shop/products/parafilm-m-laboratory-wrapping-film-2/11772644</td></tr><tr><td>Penicillin/Streptomycin (Pen-Streptomycin)</td><td>Steinbock</td><td>PS-B</td><td>100x https://www.capricorn-scientific.com/en/shop/penicillin-streptomycin-pen-strep-100x~p1205</td></tr><tr><td>ROTI Fair 10x PBS 7.4</td><td>Roth</td><td>1105.1</td><td>https://www.carlroth.com/de/de/fertigloesungen-tabletten-portionsbeutel/rotifair-10x-pbs-7-4/p/1105.1</td></tr></tbody></table>

experimentelle infektion von mäusen mit dem parasitären fadenwurm strongyloides ratti

Experimental Infection of Mice with the Parasitic Nematode Strongyloides ratti

S. ratti wandert von der Infektionsstelle überwiegend in den Kopf und später in den Darm auf einem nicht genau definierten Weg. Um die genaue Lokalisation im Kopfgewebe und im Darm zu untersuchen, wurden C57BL/6 Mäuse mit 1000 iL3 in den linken hinteren Fußballen infiziert. Mäuse wurden an Tag 1 bis Tag 14 p.i. getötet und S. ratti-Parasiten wurden im vorderen und hinteren Kopf, Gehirn und in der Lunge quantifiziert (Abbildung 2) sowie im Zwölffingerdarm, Jejunum, Ileum, Blinddarm und Dickdarm (Abbildung 3).
An Tag 1 p.i. erreichte die erste L3 den Kopf und zeigte eine gleichmäßige Verteilung (Abbildung 2A). Darüber hinaus wurde ein kleiner Teil der Larven an Tag 1 p.i. in der Lunge entnommen (Abbildung 2B). Die L3-Zahlen stiegen an Tag 2 p.i. deutlich an und betrugen durchschnittlich 174 L3 ± 13 im Kopf und durchschnittlich 17 ± 1,7 in der Lunge. So wird der Großteil von L3 (ca. 90%) aus dem Kopf und nur etwa 10% aus der Lunge entnommen. Die meisten L3-Larven (Mittelwert 93 ± 13,3) waren in der vorderen Seite des Kopfes lokalisiert, aber auch etwa 41 ± 4,7 L3-Larven waren in der hinteren Seite des Kopfes und etwa 39 ± 5,8 im Gehirn lokalisiert. In Übereinstimmung mit dieser Beobachtung wurde das Vorhandensein von L3 im Gehirn und in der Zerebrospinalflüssigkeit bei 24 h p.i. und mit einem Maximum bei 48 h p.i. bei C57BL/6 Mäusen nach perkutaner Infektion berichtet20. An Tag 3 p.i. wurde eine deutliche Abnahme der L3-Gesamtzahlen im Vergleich zur Larvenbelastung an Tag 2 p.i. beobachtet, und an Tag 4 p.i. wurde kein L3 aus dem Kopfgewebe entnommen (Abbildung 2A). Dementsprechend wurde die Ankunft von S. ratti-Parasiten im Darm am Tag 4 p.i. nachgewiesen (Abbildung 3A). Um eine genaue Definition der Parasitenlokalisation zu ermöglichen, wurde der Darm in verschiedene Segmente unterteilt, d.h. Duodenum, Jejunum, Ileum, Caecum und Colon (Abbildung 3B). Am Tag 4 war die Mehrzahl der S. ratti-Parasiten im Zwölffingerdarm und in den ersten zwei Dritteln des Jejunums lokalisiert (Abbildung 3A). Diese Lokalisation war bis zum Tag 6 p.i. konsistent. Ab Tag 7 p.i. war die Mehrzahl der adulten S. ratti im Blinddarm lokalisiert, wo sie bis zum Tag 9 p.i. persistierten (Abbildung 3A). Die Anzahl der Parasiten im Blinddarm sank bis zum Tag 11 p.i. auf etwa 20 und bis zum Tag 14 p.i. auf 0. Wir haben zu keinem analysierten Zeitpunkt eine signifikante Anzahl von Parasiten aus dem verbleibenden Dickdarm entnommen, mit Ausnahme von etwa 5-11 Parasiten bis zum Tag 11 p.i. Während sich die Lokalisation der S. ratti-Parasiten von Tag 4 bis Tag 9 p.i. änderte und die Mehrheit der adulten Tiere nach Tag 7 p.i. aus dem Dünndarm ausgestoßen wurde, blieb die Gesamtzahl der aus dem gesamten Darm entnommenen Parasiten bis zum Tag 9 konstant. Lebensfähiges L1 wurde nicht quantifiziert, ist aber von Tag 4 bis Tag 11 nachweisbar, mit Höhepunkt an Tag 6 (Daten nicht gezeigt).
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67533/67533fig01.jpg"> 
Abbildung 1: Aufrechterhaltung des Lebenszyklus von S. ratti bei Ratten und Mäusen. Wistar-Ratten werden s.c. mit 2500 iL3 in die Nackenfalte injiziert. Nach 6- 15 Tagen wird z.B. der Kot gesammelt, mit wassergetränkter Aktivkohle vermischt, mit einem Gefälle angeordnet und mit einer transparenten Folie bedeckt, einschließlich Luftlöchern. Diese Kultur wird 6-7 Tage lang bei 25 °C und 90 % Luftfeuchtigkeit inkubiert. Die iL3 werden mit dem Baermann-Apparat isoliert und 3x mit PBS/Pen-Strep gewaschen. Experimentellen Mäusen werden 1000 iL3 subkutan in den hinteren Fußballen injiziert. Erstellt mit BioRender.com. Abbildung 1 wurde in BioRender erstellt. Linnemann, L. (2024) https://BioRender.com/g80l370. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67533/67533fig01large.jpg" target="_blank">Bitte klicken Sie hier, um eine größere Version dieser Abbildung anzuzeigen.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67533/67533fig02.jpg"> 
Abbildung 2: Quantifizierung von S. ratti im Lungen- und Kopfgewebe im Zeitverlauf. C57BL/6 Mäusen wurde s.c. 1000 iL3 in den hinteren Fußballen injiziert. Die Mäuse wurden zu den angegebenen Zeitpunkten getötet und die S. ratti-Parasiten im Kopf (A) und in der Lunge (B) gezählt. Jedes Symbol stellt die L3-Zählungen einer einzelnen Maus dar. Das Balkendiagramm zeigt den Mittelwert an, und die Fehlerbalken zeigen SEM an. Die Grafiken zeigen kombinierte Daten aus einzelnen Experimenten. Tag 1: zwei unabhängige Experimente mit n=4 pro Zeitpunkt und Experiment; Tag 2: vier unabhängige Experimente mit n=4, n=4, n=6 und n=3; Tag 3: zwei unabhängige Experimente mit n=4 und n=3; Tag 4: Ein Experiment mit n=5. (C) Schematische Karikatur, die die einzelnen Regionen des Kopfes zeigt, die für die Isolierung verwendet werden. Die rote gestrichelte Linie zeigt den Schnittpfad an. Abbildung 2C wurde in BioRender erstellt. Linnemann, L. (2024) https://BioRender.com/t83e660. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67533/67533fig02large.jpg" target="_blank">Bitte klicken Sie hier, um eine größere Version dieser Abbildung anzuzeigen.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67533/67533fig03.jpg"> 
Abbildung 3: Quantifizierung von S. ratti in den Darmregionen im Zeitverlauf. Männlichen C57BL/6-Mäusen wurde s.c. 1000 iL3 in den Hinterfußballen injiziert. (A) Mäuse wurden zu den angegebenen Zeitpunkten getötet, und S. ratti-Parasiten mit Ausnahme von L1 wurden in den folgenden Regionen gezählt: Duodenum, Jejunum 1-3, Ileum, Caecum und Colon. (B) Schematische Übersicht der verschiedenen Darmregionen. Jedes Symbol stellt die Anzahl der Parasiten einer einzelnen Maus dar. Das Balkendiagramm zeigt den Mittelwert, und die Fehlerbalken zeigen das REM. Dargestellt sind kombinierte Daten aus einzelnen Experimenten. Tag 4: zwei unabhängige Experimente mit n=4 und n=6 Mäusen; Tag 5: zwei unabhängige Experimente mit n=4 und n=6; Tag 6: zwei unabhängige Experimente mit n=4 und n=6; Tag 7: zwei unabhängige Experimente mit n=6 und n=3; Tag 8 bis 14: ein Experiment mit n=3. SI: Dünndarm. Abbildung 3B wurde in BioRender erstellt. Linnemann, L. (2024) https://BioRender.com/h27y297. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67533/67533fig03large.jpg" target="_blank">Bitte klicken Sie hier, um eine größere Version dieser Abbildung anzuzeigen.</a>

Experimentelle Infektion von Mäusen mit dem parasitären Fadenwurm Strongyloides ratti

Strongyloides ratti is a parasitic nematode that naturally infects wild rats. However, most laboratory rat and mouse strains are fully susceptible to ...

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Research

Forschung

JoVE Journal

Immunology and Infection

Immunologie und Infektion

Genetische Kreuzungen Nagetier Malaria-Parasiten werden durch Zuführen von zwei genetisch verschiedene Parasiten Mücken durchgeführt. Rekombinante Nachkommen sind von der Maus Blut nach Abzug Mücken infizierten Mäuse beißen geklont. Dieses Video zeigt, wie genetische Kreuzungen...

Protokoll für die Herstellung eines genetischen Kreuz der Nager Malaria-Erregern

Trichuris muris Infektion ist ein Darm-Modell von Th2 Immunität, wo resistente Mäuse generieren eine schützende Th2-Antwort und anfälligen Mäusen erzeugen eine pathologische Th1-Antwort.

Trichuris muris Infektion: Ein Modell des Typ-2-Immunität und Entzündung im Darm

Schistosoma mansoni Eier sind potente Stimulatoren der T-Helferzellen vom Typ 2 (Th2) Immunantwort, die charakteristisch für Parasitenbefall, Asthma und allergische Entzündung. Dieses Protokoll nutzt S. mansoni Ei Injektion an einen CD4 Th2-Zytokin-induzierte Entzündungsreaktion in der Lunge, Lunge durch Granulombildung um das Ei gekennzeichnet, Eosinophilie und Makrophagen-Aktivierung Alternative zu generieren.

Mit den Eizellen<em&gt; Schistosoma mansoni</em&gt; Als ein<em&gt; In vivo</em&gt; Modell von Helminthen-induzierten Lungenentzündung

Citrobacter rodentium Infektion bietet ein wertvolles Modell zur enteralen bakterielle Infektionen zu untersuchen sowie Host Immunantwort und Kolitis bei Mäusen. Dieses Protokoll beschreibt die Messung der Barriere Integrität, pathogenen Belastung und histologische Beschädigung, die eine für die gründliche Charakterisierung von Erreger und Wirt Beiträge murine infektiöse Kolitis.

Die<em&gt; Citrobacter rodentium</em&gt; Mouse Model: Studieren Erreger und Wirt Beiträge zur Infectious Colitis

Dieser Artikel berichtet über eine detaillierte Methode zur dynamischen Messung und Quantifizierung der Blutflussgeschwindigkeit in einzelnen Blutgefäßen des Lebergefäßsystems der Maus unter Verwendung der intravitalen mikroskopischen Bildgebung in Kombination mit einer spezifischen Methodik zur Bildaufnahme und -analyse.

Intravitalmikroskopie Imaging der Leber nach<em&gt; Leishmania</em&gt; Infection: Eine Bewertung von Leber Hämodynamik

Dieser Artikel beschreibt ein Protokoll für die groß angelegte axenic Isolierung und Sammlung von freischwimmenden Miracidia der menschlichen Blut Egel Schistosoma Mansoni und deren Weiterverarbeitung für Einführung in die in-vitro- Kultur.

Masse isoliert und In-vitro- Kultivierung von Intramolluscan Stadien der menschlichen Blut Fluke Schistosoma Mansoni

Die Trypanosomen Trypanosoma Agent der Chagas-Krankheit produziert langlebige asymptomatische Infektionen, die abrupt in klinisch anerkannten Pathologie zu entwickeln. Die folgenden Forschungs-Protokoll beschreibt eine kurzfristige familienbasierte epidemiologische Studie um die T. Trypanosoma Infektion, sexuell übertragbare von übergeordneten an Nachkommen zu entwirren.

Sexuelle Übertragung von amerikanischen Trypanosomen von Männchen und Weibchen zu Naive Mates

Dieses Protokoll skizziert die Etablierung eines Mausmodells für das Studium von Malassezia-Host-Interaktionenin der Haut. Es beschreibt die Kultivierung von Malassezia in vitro, die Infektion der murinen Haut mit Malassezia, und die anschließende Analyse der Entzündung und der Pilzbelastung im Hautgewebe.

Infizieren von Mäusen mit Malassezia spp. zur Untersuchung der Pilz-Host-Interaktion

Hier stellen wir ein zusammengestelltes Protokoll zur Bewertung der Hautinfektion von Mäusen mit Leishmania amazonensisvor. Dies ist eine zuverlässige Methode zur Untersuchung der Virrulenz von Parasiten, die eine systemische Ansicht der Wirbeltier-Wirtsreaktion auf die Infektion ermöglicht.

In Vivo-Infektion mit Leishmania amazonensis zur Bewertung der Parasitenvirulenz bei Mäusen

Das funktionelle genomische Toolkit für die parasitären Nematoden Strongyloides stercoralis und Strongyloides ratti umfasst Transgenese, CRISPR/Cas9-vermittelte Mutagenese und RNAi. Dieses Protokoll wird zeigen, wie intragonadale Mikroinjektion verwendet werden kann, um Transgene und CRISPR-Komponenten in S. stercoralis und S. ratti einzuführen.

Erzeugung von Transgenics und Knockouts in Strongyloides-Spezies durch Mikroinjektion

IL-9-exprimierende T- und ILC2-Zellen werden während einer N. brasiliensis-Infektion induziert, ihre Charakterisierung wurde jedoch im infizierten Darm aufgrund ihrer geringen Häufigkeit und differentiellen Kinetik weitgehend übersehen. Dieses Protokoll beschreibt die Isolierung dieser Zellen aus verschiedenen Zielorganen und die Bestätigung ihrer Identität mittels Durchflusszytometrie in verschiedenen Infektionsstadien.

Eine Strategie für die Untersuchung von IL-9-produzierenden lymphatischen Zellen im Nippostrongylus brasiliensis-Infektionsmodell

Lernen Sie die experimentelle Infektion von Mäusen mit dem parasitären Fadenwurm Strongyloides ratti. Dieses Protokoll zeigt Methoden zur Aufrechterhaltung des Parasitenzyklus und zur Quantifizierung in verschiedenen Geweben.

Experimentelle Infektion von Mäusen mit dem parasitären Fadenwurm Strongyloides ratti

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