Name: Hochdurchsatz-Dissoziation und orthotope Implantation von Xenotransplantaten von Brustkrebspatientinnen (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2024-12-20T15:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 6 s
Description: Erfahren Sie die Hochdurchsatz-Dissoziation und orthotope Implantation von Brustkrebs-Patienten-Xenotransplantaten in Mäuse. Diese Methode ermöglicht effiziente Studien systemischer Tumorantworten und beschleunigt die Krebsforschung erheblich.

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<meta charset="utf8"></head><body>Hochdurchsatz-Dissoziation und orthotope Implantation von Xenotransplantaten von Brustkrebspatientinnen

<ol><li>Sung, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Global+cancer+statistics+2020%3A+GLOBOCAN+estimates+of+incidence+and+mortality+worldwide+for+36+cancers+in+185+countries%5BTitle%5D)+AND+%22CA+Cancer+J+Clin%22%5BJournal%5D)">Global cancer statistics 2020: GLOBOCAN estimates of incidence and mortality worldwide for 36 cancers in 185 countries.</a> CA Cancer J Clin. 3 (3), 209-249 (2021).</li>
<li>Hidalgo, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Patient-derived+xenograft+models%3A+an+emerging+platform+for+translational+cancer+research%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Discov%22%5BJournal%5D)">Patient-derived xenograft models: an emerging platform for translational cancer research.</a> Cancer Discov. 4 (9), 998-1013 (2014).</li>
<li>DeRose, Y. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tumor+grafts+derived+from+women+with+breast+cancer+authentically+reflect+tumor+pathology%2C+growth%2C+metastasis+and+disease+outcomes%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Med%22%5BJournal%5D)">Tumor grafts derived from women with breast cancer authentically reflect tumor pathology, growth, metastasis and disease outcomes.</a> Nat Med. 17 (11), 1514-1520 (2011).</li>
<li>Zhang, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+renewable+tissue+resource+of+phenotypically+stable%2C+biologically+and+ethnically+diverse%2C+patient-derived+human+breast+cancer+xenograft+models%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Res%22%5BJournal%5D)">A renewable tissue resource of phenotypically stable, biologically and ethnically diverse, patient-derived human breast cancer xenograft models.</a> Cancer Res. 73 (15), 4885-4897 (2013).</li>
<li>Yoshida, G. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Applications+of+patient-derived+tumor+xenograft+models+and+tumor+organoids%5BTitle%5D)+AND+%22J+Hematol+Oncol%22%5BJournal%5D)">Applications of patient-derived tumor xenograft models and tumor organoids.</a> J Hematol Oncol. 13 (1), 1-16 (2020).</li>
<li>Wilson, H. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Human+breast+cancer+xenograft+model+implicates+peroxisome+proliferator-activated+receptor+signaling+as+driver+of+cancer-induced+muscle+fatigue%5BTitle%5D)+AND+%22Clin+Cancer+Res%22%5BJournal%5D)">Human breast cancer xenograft model implicates peroxisome proliferator-activated receptor signaling as driver of cancer-induced muscle fatigue.</a> Clin Cancer Res. 25 (7), 2336-2347 (2019).</li>
<li>Wilson, H. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Skeletal+muscle+reprogramming+by+breast+cancer+regardless+of+treatment+history+or+tumor+molecular+subtype%5BTitle%5D)+AND+%22NPJ+Breast+Cancer%22%5BJournal%5D)">Skeletal muscle reprogramming by breast cancer regardless of treatment history or tumor molecular subtype.</a> NPJ Breast Cancer. 6 (1), 18(2020).</li>
<li>Shultz, L. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Human+lymphoid+and+myeloid+cell+development+in+NOD%2FLtSz-scid+IL2R%CE%B3null+mice+engrafted+with+mobilized+human+hemopoietic+stem+cells%5BTitle%5D)+AND+%22J+Immunol%22%5BJournal%5D)">Human lymphoid and myeloid cell development in NOD/LtSz-scid IL2Rγnull mice engrafted with mobilized human hemopoietic stem cells.</a> J Immunol. 174 (10), 6477-6489 (2005).</li>
<li>DeRose, Y. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Patient-derived+models+of+human+breast+cancer%3A+Protocols+for+in+vitro+and+in+vivo+applications+in+tumor+biology+and+translational+medicine%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Protoc+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">Patient-derived models of human breast cancer: Protocols for in vitro and in vivo applications in tumor biology and translational medicine.</a> Curr Protoc Pharmacol. 14, Unit14.23(2013).</li>
<li>Whittle, J. R., Lewis, M. T., Lindeman, G. J., Visvader, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Patient-derived+xenograft+models+of+breast+cancer+and+their+predictive+power%5BTitle%5D)+AND+%22Breast+Cancer+Res%22%5BJournal%5D)">Patient-derived xenograft models of breast cancer and their predictive power.</a> Breast Cancer Res. 17 (1), 17(2015).</li>
<li>Fleming, J. M., Miller, T. C., Meyer, M. J., Ginsburg, E., Vonderhaar, B. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Local+regulation+of+human+breast+xenograft+models%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cell+Physiol%22%5BJournal%5D)">Local regulation of human breast xenograft models.</a> J Cell Physiol. 224 (3), 795-806 (2010).</li>
<li>Okano, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Orthotopic+implantation+achieves+better+engraftment+and+faster+growth+than+subcutaneous+implantation+in+breast+cancer+patient-derived+xenografts%5BTitle%5D)+AND+%22J+Mammary+Gland+Biol+Neoplasia%22%5BJournal%5D)">Orthotopic implantation achieves better engraftment and faster growth than subcutaneous implantation in breast cancer patient-derived xenografts.</a> J Mammary Gland Biol Neoplasia. 25 (1), 27-36 (2020).</li>
<li>Ryu, A. H., Eckalbar, W. L., Kreimer, A., Yosef, N., Ahituv, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Use+antibiotics+in+cell+culture+with+caution%3A+Genome-wide+identification+of+antibiotic-induced+changes+in+gene+expression+and+regulation%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">Use antibiotics in cell culture with caution: Genome-wide identification of antibiotic-induced changes in gene expression and regulation.</a> Sci Rep. 1 (1), 7533(2017).</li>
<li>Amens, J. N., Bahçecioglu, G., Zorlutuna, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Immune+system+effects+on+breast+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Mol+Bioeng%22%5BJournal%5D)">Immune system effects on breast cancer.</a> Cell Mol Bioeng. 14 (4), 279-292 (2021).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>1 mL Tuberkulinspritze</td><td>BD</td><td>305945</td><td>steril</td></tr><tr><td>1x phosphatgepufferte Kochsalzlösung, pH 7,4</td><td>Gibco</td><td>10010023</td><td>steril</td></tr><tr><td>2,0 mL Mikrozentrifugenröhrchen mit rundem Boden</td><td>Eppendorf</td><td>0030123620</td><td>sterile</td></tr><tr><td>26 G Nadel, &frac12; in.</td><td>BD</td><td>305111</td><td>steriles</td></tr><tr><td>5,0 mL Mikroröhrchen</td><td>Eppendorf</td><td>0030119401</td><td>steriles</td></tr><tr><td>8+ Wochen altes NSG (NOD. Cg-Prkdcscid Il2rgtm1Wjl/SzJ) Mäuse</td><td>The Jackson Laboratory</td><td>#005557</td><td></td></tr><tr><td>Alkohol-Vorbereitungspads</td><td>Fisher Scientific</td><td>22-363-750</td><td>steril</td></tr><tr><td>Basalmembran-Extrakt (Matrigel)</td><td>Cultrex</td><td>3632-005-02</td><td></td></tr><tr><td>Applikatoren mit Wattespitze, 6 Zoll.</td><td>Fisher Scientific</td><td>22-029-553</td><td>sterile</td></tr> gebogene <tr><td>Pinzette mit mittleren, nicht gezackten Spitzen, 152 mm</td><td>Elektronenmikroskopie Sciences</td><td>50-365-845</td><td>sterile</td></tr><tr><td>Enthaarungscreme</td><td>Nair</td><td></td><td></td></tr><tr><td>gentleMACS C Tubes</td><td>Miltenyi Biotec</td><td>130-093-237</td><td></td></tr><tr><td>gentleMACS Octo Dissoziator mit Heizern</td><td>Miltenyi Biotec</td><td>130-096-427</td><td></td></tr><tr><td>Nr. 10 Skalpellklingen</td><td>Fisher Scientific</td><td>12-000-162</td><td>sterile</td></tr><tr><td>Vlies-Mullschwämme, 4x4 Zoll</td><td>Fisher Scientific</td><td>22-028-558</td><td>steril</td></tr><tr><td>RPMI 1640 1x + L-Glutamin</td><td>Gibco</td><td>11875093</td><td>steriles</td></tr><tr><td>Tumordissoziationsset, human</td><td>Miltenyi Biotec</td><td>130-095-929</td><td></td></tr></tbody></table>

hochdurchsatz-dissoziation und orthotope implantation von xenotransplantaten von brustkrebspatientinnen

High-Throughput Dissociation and Orthotopic Implantation of Breast Cancer Patient-Derived Xenografts

Diese Studie skizziert einen effizienten und nicht-chirurgischen Ansatz für die orthotope Implantation von patientinnenstammenden Brustkrebs-Xenotransplantaten bei Mäusen. Brusttumorgewebe wurde mit humanspezifischen Enzymen und mechanischer Bewegung dissoziiert, in einem 1:1 v/v-Verhältnis von Matrigel: RPMI 1640 resuspendiert und orthotopisch in die leistenförmigen Brustfettpolster von NSG-Mäusen injiziert (Abbildung 1 und Abbildung 2). Um die Genauigkeit der PDX-Modelle zu gewährleisten, wurde die Übereinstimmung der ursprünglichen Tumorprobe des Patienten mit den passageierten Tumoren mit etablierten histopathologischen und genomischen Techniken validiert. Die Rezeptorexpression wurde mittels immunhistochemischer (IHC) Färbung von Standard-Brustkrebsrezeptoren, einschließlich des Östrogenrezeptors (ER), des Progesteronrezeptors (PR) und des humanen epidermalen Wachstumsfaktor-Rezeptors 2 (HER2), profiliert (Abbildung 3). Die zelluläre Morphologie wurde anhand der Hämatoxylin- und Eosin (H&amp;E)-Färbung der geschnittenen Tumorschnitte und der pathologischen Interpretation der gefärbten Schnitte durch einen Pathologen beurteilt. Die Erhaltung der genetischen Landschaft und die Retention menschlicher Zellen wurde mittels Bulk-RNA-Sequenzierung und STR-Authentifizierung (Short Tandem Repeat) validiert (Abbildung 4 und Tabelle 1). Darüber hinaus wurde bei Erregertests keine Kontamination des Patienten oder der passageierten Tumorproben festgestellt, was bei der Verwendung von immundefizienten Mäusen ein wesentlicher Überprüfungsschritt ist.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67607/67607fig1.jpg"> 
Abbildung 1: Überblick über das Protokoll. Darstellung des Arbeitsablaufs bei der Tumordissoziation und -injektion. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67607/67607fig1large.jpg" target="_blank">Bitte klicken Sie hier, um eine größere Version dieser Abbildung anzuzeigen.</a>
NSG-Mäuse wurden für die Injektion vorbereitet, wobei eine Enthaarungscreme verwendet wurde, die abwechselnd im und gegen den Uhrzeigersinn aufgetragen wurde, um das Fell aus dem Bereich des Brustfettpolsters der Leistenrinde gründlich zu entfernen (Abbildung 2A). Überschüssige Enthaarungscreme wurde mit steriler Gaze von der freiliegenden Bauchhaut abgewischt und der Bereich mit einem Alkoholtupfer desinfiziert (Abbildung 2B). Eine sterile Nadel, die mit dissoziierten Tumorzellen beladen war, wurde in einem Winkel von etwa 45 Grad 0,5 bis 1 mm kaudal zu den Brustfettpolstern der vierten Leistenbrustwarze positioniert (Abbildung 2C). Tumorzellen wurden kontrolliert in die Brustfettpolster der vierten Leistenbrustwarze injiziert (Abbildung 2D). Das Tumorwachstum wurde zunächst durch digitales Abtasten der Fettpolster nachgewiesen. Anschließend wurde die Progression des Tumorvolumens mittels Magnetresonanztomographie (MRT) quantitativ verfolgt (Abbildung 2E). Sowohl das Körpergewicht (Abbildung 2F) als auch das Tumorvolumen (Abbildung 2G) wurden wöchentlich gemessen, um Schwankungen des Gewichts und des Fortschreitens des Tumorvolumens zu überwachen. Die Tumore wurden visuell untersucht, um Wunden wie Geschwüre zu überwachen, die einen vorzeitigen Abbruch erforderlich machen würden. Die erfolgreiche bilaterale Transplantation des PDX in die leistenweisen Brustfettpolster ist in Abbildung 2H dargestellt, und die Fettpolster nach der Exzision der Tumoren sind in Abbildung 2I dargestellt.
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67607/67607fig2.jpg"> 
Abbildung 2: Präparation von Mäusen, PDX-Injektion und Überwachung der Tumorprogression. (A) Brustfettpolster wurden gründlich enthaart gemacht. (B) Darstellung der Injektionsstelle mit klarer Sichtbarkeit der Zielinjektionsbereiche. (C) Position der Spritze auf dem Fettpolster, typischerweise 0,5-1 mm kaudal zum Fettpolster, abhängig von der Nadellänge. Der weiße Pfeil zeigt den Zielbereich für die Nadel beim Einstechen an. (D) Darstellung einer dissoziierten Zellinjektion in das Brustfettpolster der linken vierten Leistenbrustwarze. Die Nadel sollte in einem Winkel von etwa 45 Grad gehalten werden, wie bei der Injektion gezeigt. (E) Repräsentatives MRT-Bild von bilateral transplantierten Tumoren an der Injektionsstelle. Tumore sind grün hervorgehoben. (F) Repräsentative Progression des Körpergewichts in Gramm nach Injektion von Tumorzellen (n = 5). Die dunkelblaue Linie stellt eine einfache lineare Regression dar, die signifikant ungleich Null ist (p &lt; 0,0001); Mäuse nahmen im Durchschnitt 22 mg zu.Tag-1. Die dunkelblaue Schattierung ist ein Konfidenzintervall von 95 %, die hellblaue Schattierung ein Vorhersageintervall von 95 % und die orangefarbenen Linien sind Längsmessungen des Körpergewichts. (G) Repräsentative Progression einzelner Tumorvolumina in mm3 nach Injektion von Tumorzellen (n = 10). Die dunkelblaue Linie stellt die exponentielle Regression dar. Die Verdopplungszeit des Tumorvolumens betrug 19,08 Tage. Die dunkelblaue Schattierung ist ein 95 %-Konfidenzintervall, die hellblaue Schattierung ist ein 95 %-Vorhersageintervall und die orangefarbenen Linien stellen das longitudinale Tumorvolumen dar. (H) Erfolgreiche bilaterale Transplantation von PDX-Zellen in die leistenförmigen Brustfettpolster. Beachten Sie, dass die Vaskularisierung bei jedem Tumor zu sehen ist. Die weißen Pfeile kennzeichnen die Tumore. (I) Der Bereich des Brustfettpolsters der Leistengegend nach der Entfernung von Tumoren. (H,I) Die Einheiten auf dem Lineal sind in cm angegeben. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67607/67607fig2large.jpg" target="_blank">Bitte klicken Sie hier, um eine größere Version dieser Abbildung anzuzeigen.</a>
Der repräsentative PDX (PEN_056) stammt von einer 31-jährigen kaukasischen Frau mit invasivem Mammakarzinom im Stadium 3A. Der Primärtumor, der aus der rechten Brust entnommen wurde, hatte einen Rezeptorstatus von ER und PR negativ, HER2 positiv (ER-PR-HER2+). Die IHC-Färbung für ER-, PR- und HER2-Rezeptoren zeigte eine Übereinstimmung zwischen der Patientin und PDX-Tumoren (Abbildung 3). Die PDX zeigt jedoch eine stärkere Expression von HER2, was auf ein selektives Wachstum von HER2+-Zellen zurückzuführen sein könnte. Die pathologische Auswertung von H&amp;E-gefärbten Schnitten bestätigte ein schlecht differenziertes Karzinom mit konsistenter Morphologie und Zytologie sowohl in der Patienten- als auch in der PDX-Probe (Abbildung 3).
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67607/67607fig3.jpg"> 
Abbildung 3: IHC-Rezeptor- und H&amp;E-Färbung. (Linke Spalte) IHC-Färbung von ER-, PR- und HER2-Rezeptoren und H&amp;E-Färbung im Patiententumor. ER- und PR-Färbungen zeigen erwartungsgemäß keine offensichtliche positive Färbung. HER2-Flecken zeigen eine positive Wirkung auf HER2 (braun). (Rechte Spalte) IHC-Färbung von ER-, PR- und HER2-Rezeptoren und H&amp;E-Färbung in der passageierten PDX-Probe. Die Rezeptorfärbung ähnelt stark der in der Patientenprobe, obwohl HER2 nach der Passage eine stärkere Expression zeigt. Maßstab: 50 μm; Vergrößerung: 20x. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67607/67607fig3large.jpg" target="_blank">Bitte klicken Sie hier, um eine größere Version dieser Abbildung zu sehen.</a>
Die Genotypisierung der kurzen Tandemwiederholung (STR) bestätigte eine Ähnlichkeit von &gt;80 % zwischen den 13 autosomalen Loci, die in den Konsensusrichtlinien der American Type Cell Culture Collection (ATCC) ASN-0002-2022 definiert wurden, plus 3 zusätzliche Loci (Tabelle 1). Die Massen-RNA-Sequenzierung (RNA-seq) der Tumorprobe des Patienten und PDX bestätigte ein gleichwertiges Alignment mit dem neuesten humanen Referenzgenom (T2T CHM13v2.0), wobei 82,3 % bzw. 79,1 % der Reads ausgerichtet waren. Darüber hinaus zeigten der Patiententumor und PDX eine starke positive Korrelation mit einem Pearson-r-Wert von 0,9559 (Abbildung 4A). Die Analyse der Gensatzanreicherung, bei der PDX mit dem Patiententumor verglichen wurde, zeigte, dass die Top 10 der signifikant angereicherten Signalwege aus genetischen ontologischen biologischen Prozessen überwiegend immunologische Gensätze waren, was darauf hindeutet, dass der Großteil der transkriptionellen Varianz zwischen PDX und Patiententumor auf das Fehlen von Immunzellen in der PDX-Probe zurückzuführen ist (Abbildung 4B).
<table border="1" fo:font-size="7px" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td></td>
			<td>Nr. D5S818</td>
			<td>D13S317</td>
			<td>Nr. D7S820</td>
			<td>VWA</td>
			<td>TH01</td>
			<td>BIN</td>
			<td>TPOX</td>
			<td>CSF1PO</td>
			<td>D3S1358</td>
			<td>Nr. D21S11</td>
			<td>Nr. D18S51</td>
			<td>Penta_E</td>
			<td>Penta_D</td>
			<td>D8S1179</td>
			<td>FGA</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tumor des Patienten</td>
			<td>12 13</td>
			<td>8 8</td>
			<td>8 9</td>
			<td>17 17</td>
			<td>9 9.3</td>
			<td>X X</td>
			<td>8 10</td>
			<td></td>
			<td>15 16</td>
			<td>29 31.2</td>
			<td>16 19</td>
			<td>12 13</td>
			<td>14 14</td>
			<td>10 14</td>
			<td>21 25</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PDX-Tumor</td>
			<td>13 14</td>
			<td>8 8</td>
			<td>8 9</td>
			<td>17 17</td>
			<td>9 9.3</td>
			<td>X X</td>
			<td>10 10</td>
			<td></td>
			<td>15 15</td>
			<td>29 29</td>
			<td>16 19</td>
			<td>12 13</td>
			<td>14 14</td>
			<td>10 14</td>
			<td>21 25</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>
Tabelle 1: STR-Authentifizierung (Short Tandem Repeat).
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67607/67607fig4.jpg"> 
Abbildung 4: RNA-Sequenzierungskorrelation und Gensatzanreicherung. (A) Streudiagramm zur Visualisierung der log2 normalisierten Counts per Million (CPM) für alle Gene aus dem Patiententumor (x-Achse) und PDX (y-Achse). Es wurde eine starke positive Korrelation mit einem Pearson-r-Wert von 0,9559 gefunden. (B) Ridge-Plots für die Top 10 der angereicherten Gen-Ontologie-Gensätze für biologische Prozesse beim Vergleich von PDX vs. Patient Tumor. Kurven zeigen die Verteilung des Anreicherungswerts für jeden Gensatz; color stellt den FDR-q-Wert für jeden Gensatz dar. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67607/67607fig4large.jpg" target="_blank">Bitte klicken Sie hier, um eine größere Version dieser Abbildung anzuzeigen.</a>

Hochdurchsatz-Dissoziation und orthotope Implantation von Xenotransplantaten von Brustkrebspatientinnen

Patient-derived xenografts (PDXs) provide a clinically relevant method for recapitulating tumor-involved cell types and the tumor microenvironment, which ...

high-throughput-dissociation-orthotopic-implantation-breast-cancer

Research

Forschung

JoVE Journal

Cancer Research

Krebsforschung

In diesem Video werden vom Menschen stammende Melanomzellen subkutan in die Flankenregion einer immungeschwächten Maus implantiert. Das PDX-Modell ermöglicht die präklinische Untersuchung von Melanomzellen, die die in  vivo beobachtete Tumorheterogenität und Melanomaggressivität besser rekapitulieren.

Patienten-abgeleitete Xenotransplantat-Modellierung: Eine Technik zur Generierung von Melanom-Mausmodellen

Die etablierte Technik, um primäre invasive orthotopen Blasenkrebs Xenografts impfen erfordert Laparotomie und Mobilisierung der Blase. Dieses Verfahren verursacht eine signifikante Morbidität auf Mäuse, ist technisch anspruchsvoll und zeitaufwendig. Wir haben deshalb eine hohe Präzision, die perkutane Ansatz verwendet Ultraschallkontrolle.

Minimal Invasive Gründung von murinen orthotopen Blasen Xenografts

Wir beschreiben ein Verfahren zur stabilen Markierung von Patienten stamm Xenotransplantaten (PDXs) mit lentivirale Partikel exprimieren grün fluoreszierenden Protein und Luziferase-Reporter. Diese Methode ermöglicht es, das Wachstum von PDXs am primären Standort zum Verfolgen sowie Detektieren spontaner und experimentelle Metastasen in vivo Bildgebungssysteme verwendet werden .

Die Markierung von Brustkrebs-Patienten stamm Xenografts mit Nachvollziehbare Reporter für Tumorwachstum und Metastasierung Studies

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Nutzung von Ultraschall geführte Gewebe gerichtet zellulären Implantation für die Einrichtung der biologisch relevanten metastasiertem Tumor Xenografts

Hier präsentieren wir Ihnen ein Protokoll zur Brustkrebs-Zellen in der Mamma Fettpolster in einer einfachen, weniger invasiv und einfach zu handhabende Möglichkeit, einzupflanzen und dieses orthotopen Brust Krebs Mausmodell mit einer richtigen Mamma Fettlappen Umgebung kann verwendet werden, um verschiedene Aspekte zu untersuchen Krebs.

Orthotopen Injektion von Brustkrebs-Zellen in den Mäusen Mamma Fettlappen

Diese Arbeit setzt ein fortschrittliches Protokoll vor, um die Tumorbelastung durch den Nachweis von grünen Fluoreszenzprotein- und Biolumineszenzsignalen sowie die Integration quantitativer molekularer Detektionstechniken genau zu bewerten.

Studieren von dreifach negativem Brustkrebs mit orthotopischem Brustkrebsmodell

Hier stellen wir ein Protokoll vor, um die Wirksamkeit gezielter Therapien zu testen, die auf der Grundlage der genomischen Zusammensetzung eines Tumors ausgewählt wurden. Das Protokoll beschreibt die Identifizierung und Validierung struktureller DNA-Umlagerungen, die Einplage von Patiententumoren in Mäuse und die Erprobung von Reaktionen auf entsprechende Medikamente.

Testen von gezielten Krebstherapien mit struktureller DNA-Alterationsanalyse und patientenabgeleiteten Xenografts

Patientenbasierte Xenograft-Modelle (PDX) und transplantierbare gentechnisch veränderte Mausmodelle rekapitulieren menschliche Krankheiten originalgetreu und sind bevorzugte Modelle für die grundlegende und translationale Brustkrebsforschung. Hier wird eine Methode beschrieben, Brusttumorfragmente orthotopisch in das Brustfettpolster zu transplantieren, um die Tumorbiologie zu untersuchen und die Arzneimittelreaktion zu bewerten.

Orthotope Transplantation von Brusttumoren als präklinische Modelle für Brustkrebs

Knochenmetastasenmodelle entwickeln Metastasen nicht gleichmäßig oder mit einer 100%igen Inzidenz. Die direkte intraossäre Injektion von Tumorzellen kann zu einer Embolisation der Lunge führen. Wir stellen unsere Technik zur Modellierung von primären Knochentumoren und Knochenmetastasen mittels solider Tumortransplantatimplantation in den Knochen vor, was zu reproduzierbarem Transplantat und Wachstum führt.

Modellierung von primären Knochentumoren und Knochenmetastasen mit Implantation eines soliden Tumortransplantats in den Knochen

Die Entwicklung von orthotopen pädiatrischen Hirntumormodellen erfordert akribische Präzision, bei der Krebszellen mit einem stereotaktischen Gerät präzise implantiert werden. Die hier vorgestellte Methodik beschreibt die Schritte bei der Vorbereitung von Hirntumorzellen, der Durchführung intrakranieller Injektionen und der Implementierung eines postoperativen Überwachungssystems zur Beurteilung der Hirntumortransplantation.

Etablierung von orthotopen patientenabgeleiteten Xenotransplantatmodellen für Hirntumoren mit Hilfe eines stereotaktischen Geräts

Ziel dieses Protokolls ist es, Forschern eine hochgradig reproduzierbare Technik für intrakranielle Implantationen bereitzustellen.

Stereotaktische intrakranielle Implantation von Glioblastom-Patienten-abgeleiteten Xenograftzelllinien bei Mäusen

Erfahren Sie die Hochdurchsatz-Dissoziation und orthotope Implantation von Brustkrebs-Patienten-Xenotransplantaten in Mäuse. Diese Methode ermöglicht effiziente Studien systemischer Tumorantworten und beschleunigt die Krebsforschung erheblich.

Hochdurchsatz-Dissoziation und orthotope Implantation von Xenotransplantaten von Brustkrebspatientinnen

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