Verwendung von In-vivo-Assemblierung für den hocheffizienten Plasmidbau

Meine Doktorarbeit konzentriert sich auf die Untersuchung von Proteinen, die von Bakterien sezerniert werden. Ich möchte insbesondere verstehen, ob einige dieser sezernierten Proteine wichtig sind, um Infektionen beim Menschen zu verursachen. Eine große Herausforderung bei der Arbeit mit kürzlich isolierten klinischen Bakterien ist ihre Antibiotikaresistenz, die molekulargenetische Techniken behindert, die auf der Auswahl von Antibiotika beruhen, wie z. B. Gendeletionen und genetische Komplementierung.

Dieses Klonierungsprotokoll ist schneller und kostengünstiger, da IVA keine spezialisierten Enzyme und sequenziellen enzymatischen Reaktionen für die Plasmidassemblierung vor der E.coli-Transformation benötigt. Starten Sie zunächst eine spezielle DNA-Analysesoftware auf einem Computersystem. Bauen Sie das gewünschte Plasmid künstlich zusammen.