Einseitiges Harnleiterobstruktionsmodell zur Untersuchung der interstitiellen Nierenfibrose

Diese Forschung konzentriert sich hauptsächlich auf den Mechanismus, der der Interaktion zwischen Makrophagen und den Nierenparenchymzellen beim Fortschreiten der Nierenfibrose zugrunde liegt, mit dem Ziel, neue therapeutische Angriffspunkte für chronische Nierenerkrankungen zu finden. Eine kürzlich durchgeführte Studie ergab, dass der Schlüssel-Makrophagen-Subtyp, der am Umbau der extrazellulären Matrix beteiligt ist, über den insulinähnlichen Wachstumsfaktor-Signalweg mit dem Fibroblasten interaktiv ist, was chronische Nierenentzündungen und Fibrose fördert. Die Einzelzell-Multi-Omics-Sequenzierungstechnologie ermöglicht es Forschern, den potenziellen pathogenen Mechanismus verschiedener Nierenerkrankungen aufzudecken, wie z. B. akutes Nierenversagen, Lupusnephritis, primäre membranöse Nephropathie und IgA-Nephropathie, und liefert so neue Erkenntnisse für eine gezielte Therapie. Schlüsselmechanismen bei Nierenerkrankungen wurden erfolgreich identifiziert, einschließlich der Rolle von KR4, PIST-1 und dem Signalweg des IL-1-Rezeptors-1 in verschiedenen Zellen. Dies liefert neue Erkenntnisse für die Prävention und Behandlung sowohl von akuten als auch von chronischen Nierenerkrankungen. Diese Forschung etablierte ein standardisierteres und hochgradig reproduzierbares Modell der obstruktiven Nephropathie bei Mäusen. Dieses Modell ist kostengünstig, zuverlässig und zeichnet sich durch einfache Schritte mit hoher Stabilität aus.

[Erzähler] Platzieren Sie die Maus zunächst in Rückenlage auf einer externen Wärmequelle, wobei Kopf und Hals ausgestreckt sind, um die Atemwege offen zu halten. Sichern Sie die Pfoten mit niedrig klebendem Klebeband. Verwenden Sie ein Thermometer, um die Umgebungstemperatur zu überwachen, und stellen Sie sicher, dass sie zwischen 37° und 38° Celsius bleibt. Tragen Sie eine Augensalbe auf die Augen auf, um Verletzungen der Hornhautzirrhose vorzubeugen. Verwenden Sie eine chirurgische Klinge, um einen vertikalen chirurgischen Schnitt von etwa 1 bis 1,5 Zentimetern von der Blase bis zum unteren linken Rand der Rippen zu machen, um die Bauchhöhle freizulegen. Bewegen Sie den Darm mit einem Wattestäbchen, das mit steriler Kochsalzlösung angefeuchtet ist, auf die rechte Seite der Bauchhöhle, um die linke Niere freizulegen, die sich unterhalb der Milzrückseite und neben der Wirbelsäule befindet. Befreien Sie mit einer gebogenen Iriszange das Fett und Bindegewebe, das den linken Harnleiter umgibt. Nach einer sanften Isolierung wird der linke Harnleiter mit einer chirurgischen Naht 4/0 nahe dem unteren Pol der Niere ligiert. Führen Sie eine zweite Ligatur zwischen der ersten Ligatur und der Blase durch. Positionieren Sie den Darm vorsichtig wieder in die Bauchhöhle. Injizieren Sie 0,5 Milliliter warme normale Kochsalzlösung intraperitoneal, um eine Austrocknung zu verhindern. Setzen Sie die wiederhergestellte Maus wieder in einen sauberen Käfig. Verabreichen Sie Buprenorphin in einer Menge von 50 Mikrogramm pro Kilogramm durch subkutane Injektion für drei Tage. Periodische Säure-Schiff-, Masson-Trichrom-Färbung und Sirius-Rot-Färbung von Nierenschnitten aus Schein- und unilateralen Harnleiterobstruktionsnieren sind hier dargestellt. Tubuläre Dilatation, Verlust der Bürstenränder, Gipsbildung und tubuläre Epithelschwellung wurden bei unilateralen Harnleiterobstruktion der Nieren mit periodischer Säure-Schiff-Färbung beobachtet. Die interstitielle Fibrose nahm im Laufe der Zeit progressiv zu, wie die Masson-Trichrom-Färbung und die Sirius-Rot-Färbung zeigen. Die Western-Blot-Analyse zeigte einen zeitabhängigen Anstieg der Fibronektin-, Kollagen-I- und α-glatten Muskelaktinexpression in unilateralen Harnleiterobstruktionsnieren im Vergleich zur Scheingruppe. Die Echtzeit-PCR-Analyse zeigte eine signifikant höhere mRNA-Expression von fibrotischen Markern in unilateralen Harnleiterobstruktionsnieren im Vergleich zur Scheingruppe. Auch entzündliche Zytokine waren in den betroffenen Nieren erhöht.