Name: Subnanometer-Auflösung Strukturbestimmung von Hämagglutinin aus der Kryo-Elektronentomographie von Influenzaviren (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-11-07T12:50:00.000+00:00
Duration: 8 min 19 s
Description: Erfahren Sie die Kryo-Elektronentomographie zur Strukturbestimmung von Influenza-Hämagglutinin bei subnanometer Auflösung. Diese Methode ermöglicht die Visualisierung konformationeller Änderungen bei Rezeptorbindung.

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<li>Navarro, P. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantitative+cryo-electron+tomography%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Mol+Biosci%22%5BJournal%5D)">Quantitative cryo-electron tomography.</a> Front Mol Biosci. 9, 934465(2022).</li>
<li>Hong, Y., Song, Y., Zhang, Z., Li, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cryo-electron+tomography%3A+the+resolution+revolution+and+a+surge+of+in+situ+virological+discoveries%5BTitle%5D)+AND+%22Annu+Rev+Biophys%22%5BJournal%5D)">Cryo-electron tomography: the resolution revolution and a surge of in situ virological discoveries.</a> Annu Rev Biophys. 52, 339-360 (2023).</li>
<li>Turk, M., Baumeister, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+promise+and+the+challenges+of+cryo-electron+tomography%5BTitle%5D)+AND+%22FEBS+Lett%22%5BJournal%5D)">The promise and the challenges of cryo-electron tomography.</a> FEBS Lett. 594 (20), 3243-3261 (2020).</li>
<li>Huang, Q. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantitative+structural+analysis+of+influenza+virus+by+cryo-electron+tomography+and+convolutional+neural+networks%5BTitle%5D)+AND+%22Structure%22%5BJournal%5D)">Quantitative structural analysis of influenza virus by cryo-electron tomography and convolutional neural networks.</a> Structure. 30 (5), 777-786.e3 (2022).</li>
<li>Ke, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Structures+and+distributions+of+SARS-CoV-2+spike+proteins+on+intact+virions%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Structures and distributions of SARS-CoV-2 spike proteins on intact virions.</a> Nature. 588 (7838), 498-502 (2020).</li>
<li>Mangala Prasad, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cryo-ET+of+Env+on+intact+HIV+virions+reveals+structural+variation+and+positioning+on+the+Gag+lattice%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">Cryo-ET of Env on intact HIV virions reveals structural variation and positioning on the Gag lattice.</a> Cell. 185 (4), 641-653.e17 (2022).</li>
<li>Förster, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Subtomogram+analysis%3A+the+sum+of+a+tomogram%27s+particles+reveals+molecular+structure+in+situ%5BTitle%5D)+AND+%22J+Struct+Biol+X%22%5BJournal%5D)">Subtomogram analysis: the sum of a tomogram's particles reveals molecular structure in situ.</a> J Struct Biol X. 6, 100063(2022).</li>
<li>Tegunov, D., Xue, L., Dienemann, C., Cramer, P., Mahamid, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Multi-particle+cryo-EM+refinement+with+M+visualizes+ribosome-antibiotic+complex+at+3.5+%C3%85+in+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Methods%22%5BJournal%5D)">Multi-particle cryo-EM refinement with M visualizes ribosome-antibiotic complex at 3.5 Å in cells.</a> Nat Methods. 18 (2), 186-193 (2021).</li>
<li>Xue, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Visualizing+translation+dynamics+at+atomic+detail+inside+a+bacterial+cell%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Visualizing translation dynamics at atomic detail inside a bacterial cell.</a> Nature. 610 (7930), 205-211 (2022).</li>
<li>Kühlbrandt, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+resolution+revolution%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">The resolution revolution.</a> Science. 343 (6178), 1443-1444 (2014).</li>
<li>Chen, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cryo-electron+tomography+reveals+the+microtubule-bound+form+of+inactive+LRRK2%5BTitle%5D)+AND+%22Elife%22%5BJournal%5D)">Cryo-electron tomography reveals the microtubule-bound form of inactive LRRK2.</a> Elife. 13, e97222(2024).</li>
<li>Chen, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((De+novo+protein+identification+in+mammalian+sperm+using+in+situ+cryoelectron+tomography+and+AlphaFold2+docking%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">De novo protein identification in mammalian sperm using in situ cryoelectron tomography and AlphaFold2 docking.</a> Cell. 186 (23), 5041-5053.e19 (2023).</li>
<li>Kelley, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Towards+community-driven+visual+proteomics+with+large-scale+cryo-electron+tomography+of+Chlamydomonas+reinhardtii%5BTitle%5D)+AND+%22bioRxiv%22%5BJournal%5D)">Towards community-driven visual proteomics with large-scale cryo-electron tomography of Chlamydomonas reinhardtii.</a> bioRxiv. , (2024).</li>
<li>Klumpe, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In-cell+structure+and+snapshots+of+copia+retrotransposons+in+intact+tissue+by+cryo-ET%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">In-cell structure and snapshots of copia retrotransposons in intact tissue by cryo-ET.</a> Cell. 188 (8), 2094-2110.e18 (2025).</li>
<li>Li, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+structure+of+basal+body+inner+junctions+from+Tetrahymena+revealed+by+electron+cryo-tomography%5BTitle%5D)+AND+%22EMBO+J%22%5BJournal%5D)">The structure of basal body inner junctions from Tetrahymena revealed by electron cryo-tomography.</a> EMBO J. 44 (7), e1975-e2001 (2025).</li>
<li>Song, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+mechanism+underlying+fascin-mediated+bundling+of+actin+filaments+unveiled+by+cryo-electron+tomography%5BTitle%5D)+AND+%22J+Struct+Biol%22%5BJournal%5D)">The mechanism underlying fascin-mediated bundling of actin filaments unveiled by cryo-electron tomography.</a> J Struct Biol. 217 (2), 108212(2025).</li>
<li>Waltz, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In-cell+architecture+of+the+mitochondrial+respiratory+chain%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">In-cell architecture of the mitochondrial respiratory chain.</a> Science. 387 (6740), 1296-1301 (2025).</li>
<li>Huang, Q. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Virion-associated+influenza+hemagglutinin+clusters+upon+sialic+acid+binding+visualized+by+cryo-electron+tomography%5BTitle%5D)+AND+%22bioRxiv%22%5BJournal%5D)">Virion-associated influenza hemagglutinin clusters upon sialic acid binding visualized by cryo-electron tomography.</a> bioRxiv. , (2024).</li>
<li>Turoňová, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+situ+structural+analysis+of+SARS-CoV-2+spike+reveals+flexibility+mediated+by+three+hinges%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">In situ structural analysis of SARS-CoV-2 spike reveals flexibility mediated by three hinges.</a> Science. 370 (6513), 203-208 (2020).</li>
<li>Ke, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Structures+and+distributions+of+SARS-CoV-2+spike+proteins+on+intact+virions%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Structures and distributions of SARS-CoV-2 spike proteins on intact virions.</a> Nature. 588 (7838), 498-502 (2020).</li>
<li>Calcraft, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Integrated+cryoEM+structure+of+a+spumaretrovirus+reveals+cross-kingdom+evolutionary+relationships+and+the+molecular+basis+for+assembly+and+virus+entry%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">Integrated cryoEM structure of a spumaretrovirus reveals cross-kingdom evolutionary relationships and the molecular basis for assembly and virus entry.</a> Cell. 187 (16), 4213-4230.e19 (2024).</li>
<li>Tegunov, D., Cramer, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Real-time+cryo-electron+microscopy+data+preprocessing+with+Warp%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Methods%22%5BJournal%5D)">Real-time cryo-electron microscopy data preprocessing with Warp.</a> Nat Methods. 16 (11), 1146-1152 (2019).</li>
<li>Mastronarde, D. N., Held, S. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Automated+tilt+series+alignment+and+tomographic+reconstruction+in+IMOD%5BTitle%5D)+AND+%22J+Struct+Biol%22%5BJournal%5D)">Automated tilt series alignment and tomographic reconstruction in IMOD.</a> J Struct Biol. 197 (2), 102-113 (2017).</li>
<li>Zheng, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((AreTomo%3A+an+integrated+software+package+for+automated+marker-free%2C+motion-corrected+cryo-electron+tomographic+alignment+and+reconstruction%5BTitle%5D)+AND+%22J+Struct+Biol+X%22%5BJournal%5D)">AreTomo: an integrated software package for automated marker-free, motion-corrected cryo-electron tomographic alignment and reconstruction.</a> J Struct Biol X. 6, 100068(2022).</li>
<li>Liu, Y. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Isotropic+reconstruction+for+electron+tomography+with+deep+learning%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Isotropic reconstruction for electron tomography with deep learning.</a> Nat Commun. 13 (1), 6482(2022).</li>
<li>Chen, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+complete+data+processing+workflow+for+cryo-ET+and+subtomogram+averaging%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Methods%22%5BJournal%5D)">A complete data processing workflow for cryo-ET and subtomogram averaging.</a> Nat Methods. 16 (11), 1161-1168 (2019).</li>
<li>Zhou, Q. Y., Park, J., Koltun, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Open3D%3A+a+modern+library+for+3D+data+processing%5BTitle%5D)+AND+%22arXiv%22%5BJournal%5D)">Open3D: a modern library for 3D data processing.</a> arXiv. , (2018).</li>
<li>Zivanov, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+Bayesian+approach+to+single-particle+electron+cryo-tomography+in+RELION-4.0%5BTitle%5D)+AND+%22Elife%22%5BJournal%5D)">A Bayesian approach to single-particle electron cryo-tomography in RELION-4.0.</a> Elife. 11, e83724(2022).</li>
<li>Pettersen, E. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((UCSF+ChimeraX%3A+structure+visualization+for+researchers%2C+educators%2C+and+developers%5BTitle%5D)+AND+%22Protein+Sci%22%5BJournal%5D)">UCSF ChimeraX: structure visualization for researchers, educators, and developers.</a> Protein Sci. 30 (1), 70-82 (2021).</li>
<li>Adams, P. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((PHENIX%3A+a+comprehensive+Python-based+system+for+macromolecular+structure+solution%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Crystallogr+D+Biol+Crystallogr%22%5BJournal%5D)">PHENIX: a comprehensive Python-based system for macromolecular structure solution.</a> Acta Crystallogr D Biol Crystallogr. 66 (Pt 2), 213-221 (2010).</li>
<li>Burt, A., Gaifas, L., Dendooven, T., Gutsche, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+flexible+framework+for+multi-particle+refinement+in+cryo-electron+tomography%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+Biol%22%5BJournal%5D)">A flexible framework for multi-particle refinement in cryo-electron tomography.</a> PLoS Biol. 19 (8), e3001319(2021).</li>
<li>Watanabe, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intracellular+Ebola+virus+nucleocapsid+assembly+revealed+by+in+situ+cryo-electron+tomography%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">Intracellular Ebola virus nucleocapsid assembly revealed by in situ cryo-electron tomography.</a> Cell. 187 (20), 5587-5603.e19 (2024).</li>
<li>Woldeyes, R. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Structure+of+the+thin+filament+in+human+iPSC-derived+cardiomyocytes+and+its+response+to+heart+disease%5BTitle%5D)+AND+%22bioRxiv%22%5BJournal%5D)">Structure of the thin filament in human iPSC-derived cardiomyocytes and its response to heart disease.</a> bioRxiv. , (2025).</li>
<li>Li, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((HIV-1+Env+trimers+asymmetrically+engage+CD4+receptors+in+membranes%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">HIV-1 Env trimers asymmetrically engage CD4 receptors in membranes.</a> Nature. 623 (7989), 1026-1033 (2023).</li>
<li>Scaramuzza, S., Castaño-Díez, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Step-by-step+guide+to+efficient+subtomogram+averaging+of+virus-like+particles+with+Dynamo%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+Biol%22%5BJournal%5D)">Step-by-step guide to efficient subtomogram averaging of virus-like particles with Dynamo.</a> PLoS Biol. 19 (8), e3001318(2021).</li>
<li>Castaño-Díez, D., Kudryashev, M., Arheit, M., Stahlberg, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dynamo%3A+a+flexible%2C+user-friendly+development+tool+for+subtomogram+averaging+of+cryo-EM+data+in+high-performance+computing+environments%5BTitle%5D)+AND+%22J+Struct+Biol%22%5BJournal%5D)">Dynamo: a flexible, user-friendly development tool for subtomogram averaging of cryo-EM data in high-performance computing environments.</a> J Struct Biol. 178 (2), 139-151 (2012).</li>
<li>Tran, E. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cryo-electron+microscopy+structures+of+chimeric+hemagglutinin+displayed+on+a+universal+influenza+vaccine+candidate%5BTitle%5D)+AND+%22mBio%22%5BJournal%5D)">Cryo-electron microscopy structures of chimeric hemagglutinin displayed on a universal influenza vaccine candidate.</a> mBio. 7 (2), e00257-e00316 (2016).</li>
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<table><tbody><tr><td>AMD Ryzen Threadripper PRO 5965WX</td><td>AMD</td><td>https://www.amd.com/en/support/downloads/drivers.html/processors/ryzen-threadripper-pro/ryzen-threadripper-pro-5000wx-series/amd-ryzen-threadripper-pro-5965wx.html</td><td></td></tr><tr><td>AreTomo 1.3.4</td><td>UC San Francisco</td><td>https://drive.google.com/drive/folders/1Z7pKVEdgMoNaUmd_cOFhlt-QCcfcwF3_</td><td></td></tr><tr><td>EMAN2 2.99.52</td><td>Baylor College of Medicine</td><td>https://blake.bcm.edu/emanwiki/EMAN2</td><td></td></tr><tr><td>IMOD 4.12.27</td><td>Universität von Colorado in Boulder</td><td>https://bio3d.colorado.edu/imod/</td><td></td></tr><tr><td>Grippeanalyse-Skripte</td><td>UMass Chan Medizinische Fakultät</td><td>https://github.com/jqyhuang/influenza-analysis</td><td></td></tr><tr><td>IsoNet 0.3</td><td>UCLA</td><td>https://github.com/IsoNet-cryoET/IsoNet</td><td></td></tr><tr><td>M 2.0.0</td><td>Genentech</td><td>https://warpem.github.io/warp/home/m/</td><td></td></tr><tr><td>NVIDIA A4000</td><td>NVIDIA&nbsp;</td><td>https://www.nvidia.com/en-us/products/workstations/rtx-a4000/</td><td></td></tr><tr><td>Open3D&nbsp;</td><td>Intel Labs</td><td>https://www.open3d.org/</td><td></td></tr><tr><td>PHENIX 1.21-5207</td><td>Lawrence Berkeley Nationallabor</td><td>phenix-online.org</td><td></td></tr><tr><td>RELION 4.0</td><td>MRC-Labor für Molekularbiologie</td><td>https://relion.readthedocs.io/en/release-4.0/</td><td></td></tr><tr><td>Ubuntu 20.04</td><td>Ubuntu</td><td>https://releases.ubuntu.com/focal/</td><td></td></tr><tr><td>UCSF ChimeraX 1.6.1</td><td>UC San Francisco</td><td>https://www.cgl.ucsf.edu/chimerax/</td><td></td></tr><tr><td>Warp 2.0.0</td><td>Genentech</td><td>http://warpem.github.io/warp/</td><td></td></tr></tbody></table>

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Das Protokoll beschreibt eine High-Throughput-Ansatz zur Bestimmung Strukturen von Membranproteinen mittels Kryo-Elektronen-Tomographie und 3D-Bildverarbeitung. Es deckt die Einzelheiten der Probenvorbereitung, Datenerfassung, Datenverarbeitung und-interpretation, und schließt mit der Produktion von einer repräsentativen Ziel für den Ansatz, die HIV-1 Envelope Glykoproteins. Diese Berechnungsverfahren sind in einer Weise, Forscher und Studenten ermöglicht, remote arbeiten und einen Beitrag zur...

Bestimmung von Molekülstrukturen von HIV Hüllglycoproteine ​​mit Cryo-Elektronen-Tomographie und automatisierte Sub-Tomogramm Averaging

Wir beschreiben eine korrelative Mikroskopie-Methode, die High-Speed-3D-Live-cell Fluoreszenzlichtmikroskopie und hochauflösenden Kryo-Elektronen-Tomographie vereint. Wir demonstrieren die Fähigkeit des korrelativen Verfahren durch Abbilden dynamisch kleine HIV-1-Partikeln Interaktion mit dem Host-HeLa-Zellen.

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Wir präsentieren ein Protokoll, wie die Erfassung und Verarbeitung Kryo-Elektronenschichtaufnahmen von ganzen Mitochondrien. Die Technik liefert detaillierte Einblicke in die Struktur, Funktion und Organisation der großen Membranproteinkomplexen in nativen biologischen Membranen.

Visualisierung der ATP-Synthase-Dimere in den Mitochondrien durch Elektronen Cryo-Tomographie

Die Befestigung von Virionen an einer Oberfläche ist eine Voraussetzung für eine einzelne Virionen-Bildgebung durch Super-Resolution Fluoreszenz-Bildgebung oder Atomkraftmikroskopie (AFM). Hier zeigen wir ein Probenvorbereitungsverfahren zur kontrollierten Haftung von Virionen auf Glasoberflächen, die für den Einsatz in AFM und Super-Auflösungfluoreszenz-Bildgebung geeignet sind.

Probenvorbereitung für Single Virion Atomic Force Microscopy und Super-Resolution Fluorescence Imaging

Es wird ein Ansatz zur Bestimmung der Strukturen von viralen Membran-Glykoprotein-Komplexen unter Verwendung einer Kombination aus Elektronen-Kryo-Tomographie und Sub-Tomogramm-Mittelung mit dem Rechenpaket Jsubtomo vorgestellt.

Mittelung der Virushülle Glykoprotein-Spikes von Electron Cryotomography Rekonstruktionen mit Jsubtomo

Dieses Papier stellt ein Protokoll für die Verarbeitung von Kryo-EM-Bildern mit der Software-Suite SPHIRE vor. Das vorliegende Protokoll kann für fast alle Einzelteilchen-EM-Projekte angewendet werden, die auf eine nahezu atomare Auflösung abzielen.

Hochauflösende Einzelteilchenanalyse aus Elektronen-Kryomikroskopie-Bildern mit SPHIRE

Wir präsentieren ein Protokoll zur Lamellenpräparation von gefrorenen biologischen Proben mittels kryofokussiertem Ionenstrahl-Mikrobearbeitung für hochauflösende Strukturstudien von Makromolekülen in situ mit Kryo-Elektronentomographie. Das vorgestellte Protokoll enthält Richtlinien für die Herstellung von hochwertigen Lamellen mit hoher Reproduzierbarkeit zur strukturellen Charakterisierung von Makromolekülen innerhalb der Saccharomyces cerevisiae.

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Hier werden Protokolle beschrieben, um Virusanordnungen herzustellen, die für die Flüssig-EM- und Kryo-EM-Analyse auf der Nanoskala mittels Transmissionselektronenmikroskopie geeignet sind.

Weiterentwicklung der hochauflösenden Bildgebung von Virusanordnungen in Flüssigkeit und Eis

Das vorliegende Protokoll beschreibt die hochauflösende Kryo-Elektronentomographie-Ferndatenerfassung mit Tomo5 und die anschließende Datenverarbeitung und Subtomogramm-Mittelung mittels emClarity. Apoferritin wird als Beispiel verwendet, um detaillierte Schritt-für-Schritt-Prozesse zu veranschaulichen, um eine Kryo-ET-Struktur bei 2,86 Å Auflösung zu erreichen.

Kryo-Elektronen-Tomographie Ferndatenerfassung und Subtomogramm-Mittelwertbildung

Dieses Videoprotokoll veranschaulicht die Durchführung einer Rastertransmissionselektronenmikroskopie-Tomographie von virologischen Proben. Für optimale Ergebnisse werden die Proben durch Hochdruckgefrieren und anschließende Gefriersubstitution vorbereitet.

Rastertransmissionselektronenmikroskopie-Tomographie in der Virologie: 3D-Bildgebung von unter hohem Druck eingefrorenen, gefriersubstituierten Proben

Erfahren Sie die Kryo-Elektronentomographie zur Strukturbestimmung von Influenza-Hämagglutinin bei subnanometer Auflösung. Diese Methode ermöglicht die Visualisierung konformationeller Änderungen bei Rezeptorbindung.

Subnanometer-Auflösung Strukturbestimmung von Hämagglutinin aus der Kryo-Elektronentomographie von Influenzaviren

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