Name: Vor Ort einsetzbare, linsenfreie Bildgebungsplattform für die schnelle markierungsfreie Analyse der Aktivierung natürlicher Killerzellen (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-08-08T14:40:00.000+00:00
Duration: 8 min 34 s
Description: Erfahren Sie die schnelle, markierungsfreie Analyse natürlicher Killerzellen mit linsenfreier Schattenbildgebung. Diese Methode quantifiziert NK-Zell-Aktivierung in 30 Sekunden auf Einzelzellebene.

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<table><tbody><tr><td>1,7 mL Mikrozentrifugenröhrchen</td><td>AXYGEN</td><td>MCT-175-C</td><td>Steril, DNase/RNase-frei</td></tr><tr><td>Assay-Objektträger</td><td>Metaimmuntechnik</td><td>AS050-G</td><td>Spezielle Folie für das Cellytics System 50 Folien in einer Box</td></tr><tr><td>Cellytics System mit Software</td><td>Metaimmuntechnik</td><td>CS001</td><td>Objektivlose Schattenbildgebungsplattform</td></tr><tr><td>Zentrifuge (Ausschwingrotor)</td><td>LABOGENE</td><td>1580R</td><td>300&ndash; 500 & mal; G-Reihe</td></tr><tr><td>CMOS-Bildsensor</td><td>Im Lieferumfang des Cellytics Geräts enthalten</td><td>Integriert</td><td>Wird für die Beugungsbildgebung verwendet</td></tr><tr><td>Cytospin-Zentrifuge</td><td>Nasco Korea</td><td>TXT3 Cyto Zentrifuge</td><td>Für die Cytospin-Färbung</td></tr><tr><td>Digitaler Heizblock (37 &Grad; C)</td><td>Daihan Wissenschaftlich</td><td>DH. WHB00349</td><td>Für die Zellinkubation</td></tr><tr><td>ELISA-Kit (IFN-&gamma;)</td><td>Forschung & Forschung D-System</td><td>DIF50C</td><td>Humane IFN-& Gamma; ELISA-Bausatz</td></tr><tr><td>Guava easyCyte Durchflusszytometer</td><td>Millipore</td><td>0500-5005</td><td>Für die CD107a-Expressionsanalyse</td></tr><tr><td>Hema 3 Stat-Paket</td><td>ThermoFisher</td><td>122-911</td><td>Für die Cytospin-Färbung</td></tr><tr><td>IL-12 (rekombinanter Mensch)</td><td>Forschung & Forschung D-System</td><td></td><td>Bestandteil von ASC</td></tr><tr><td>IL-2 (rekombinanter Mensch)</td><td>Peprotech</td><td>200-02</td><td>Bestandteil von ASC</td></tr><tr><td>Magnetisches Trenngestell</td><td>Metaimmuntechnik</td><td>M13R8</td><td>Zur Raupentrennung</td></tr><tr><td>Objektträger</td><td>Marienfeld</td><td>1000612</td><td>Für Cytospin-Präparate</td></tr><tr><td>NK-Aktivierungskit</td><td>Metaimmuntechnik</td><td>MIT2301V, MIT2301A</td><td>Zur Aktivierung von NK-Zellen</td></tr><tr><td>NK Sep Bausatz</td><td>Metaimmuntechnik</td><td>MIT2301-500</td><td>Für die Isolierung von NK-Zellen</td></tr><tr><td>PE Maus Anti-Human CD107a, 100test</td><td>BD Biowissenschaften</td><td>555801</td><td>Für die CD107a-Expressionsanalyse</td></tr><tr><td>Lochblende</td><td>Im Lieferumfang des Cellytics Geräts enthalten</td><td>Integriert</td><td>Wird im LSIT-Beleuchtungspfad verwendet</td></tr><tr><td>Pipetten (2&ndash; 20 & Mikro; L, 20&ndash; 200 & Mikro; L)</td><td>AXYGEN</td><td>T-200-Y</td><td>Einstellbare Lautstärke</td></tr><tr><td>Schatten-Kalibrierungsfolie</td><td>Metaimmuntechnik</td><td>AS050-G</td><td>Für die Gerätekalibrierung. 1 Kalibrierobjektträger in 1 Assay-Objektträgerbox</td></tr><tr><td>Vortex-Mischer</td><td>Merck&nbsp;</td><td>SI-0246A</td><td>Zur Resuspension</td></tr></tbody></table>

vor ort einsetzbare, linsenfreie bildgebungsplattform für die schnelle markierungsfreie analyse der aktivierung natürlicher killerzellen

Field-Deployable Lens-Free Imaging Platform for Rapid Label-Free Analysis of Natural Killer Cell Activation

In Anlehnung an dieses Protokoll ermöglicht die LSIT-Plattform eine quantitative, markierungsfreie Beurteilung der NK-Zellaktivierung auf der Grundlage morphologischer Veränderungen in den Zellen. Abbildung 2A zeigt Hema-3-gefärbte Cytospin-Präparate von primären NK-Zellen von gesunden Spendern nach 2-stündiger Inkubation mit oder ohne ASC. Die Aktivierung durch ASC führt zu deutlichen Veränderungen, vor allem Zellvergrößerung und erhöhter interner Komplexität oder Granularität, im Vergleich...

Vor Ort einsetzbare, linsenfreie Bildgebungsplattform für die schnelle markierungsfreie Analyse der Aktivierung natürlicher Killerzellen

Natural killer (NK) cells are important effectors of innate immunity that eliminate virus-infected and malignant cells. Monitoring NK cell activity is ...

field-deployable-lens-free-imaging-platform-for-rapid-label-free

Research

Forschung

JoVE Journal

Bioengineering

Biotechnik

Lensfree On-Chip-Bildgebung und Charakterisierung von Zellen dargestellt. Diese On-Chip-Cell-Imaging-Ansatz bietet eine kompakte und kostengünstige Tool für die medizinische Diagnostik und High-Throughput-Zellbiologie-Anwendungen, so dass es besonders geeignet für arm an Ressourcen-Einstellungen.

Ohne Linsen auskommt, On-Chip-Bildgebung von Zellen hat ein neues Instrument für High-Throughput-Zell-Biologie und der medizinischen Diagnostik

Hier beschreiben wir eine nicht-invasive Zwei-Photonen (2P)-Mikroskopie Ansatz zur Untersuchung Leukozyten homing in der Maus Fußballen. Wir besprechen die technischen Aspekte unserer Tissue Imaging Vorbereitung und gehen den Leser durch ein typisches Experiment von der ersten bis zur Ausführung und Datensammlung eingestellt.

Nicht-invasive Bildgebung von Leukozyten Homing und Migration In vivo</em

In diesem Video beschreiben wir die Gitterlichtblattmikroskopie-Technik, um Wechselwirkungen zwischen lebenden T-Zellen und Antigen-präsentierenden Zellen zu visualisieren. Bei der Methode wird ein ultradünnes Gitterlichtblatt auf ein wechselwirkendes Zellpaar fokussiert, um eine Reihe von zweidimensionalen Bildern zu erhalten, die kombiniert werden, um hochauflösende vierdimensionale Bilder zu erhalten, die die raumzeitliche Dynamik der Zell-Zell-Interaktion offenbaren.

Gitterlichtblattmikroskopie zur Visualisierung von Rezeptor-Liganden-Wechselwirkungen in lebenden Zellen

Dieses Video demonstriert eine Technik zur Visualisierung der Bildung der immunologischen Synapse in natürlichen Killerzellen (NK) auf einer gestützten Lipiddoppelschicht (SLB). Der SLB wird zunächst mit einem Fluorophor-markierten NK-Zell-aktivierenden Rezeptorliganden markiert, gefolgt von der Inkubation mit NK-Zellen. Anschließend werden die Zellen mit polymerisiertem Aktin und Perforin-positiven lytischen Granulaten angefärbt. Dieser Ansatz ermöglicht die Visualisierung der Synapsenbildung...

Super-Resolution-Bildgebung der immunologischen Synapsenbildung von NK-Zellen auf einer gestützten Lipiddoppelschicht

Hier veranschaulichen wir das Protokoll für die Bildgebung durch Zwei-Farben-STED Nanoskopie die zytotoxische Immunsynapse von NK-Zellen auf Glas rekapituliert. Mit dieser Methode erhalten wir sub-100 nm Auflösung von Synapsen-Proteine ​​und des Zytoskeletts.

Visualisierung der immunologischen Synapse von Dual Color Zeitgesteuerte Stimulated Emission Depletion (STED) Nanoskopie

Wir beschreiben hier eine Kombination aus der glasgestützten Lipid-Doppelschichttechnik zur Bildung immunologischer Synapsen und der superhochauflösenden Bildgebungstechnik der STED-Mikroskopie (Stimulated Emission Depletion). Das Ziel dieses Protokolls ist es, den Benutzern die notwendigen Anweisungen zur Verfügung zu stellen, um diese beiden Techniken erfolgreich durchzuführen.

Super-Resolution Imaging der natürlichen Killerzell Immunologische Synapse auf einem Glas-gestützten Planar Lipiddoppelschicht

Interzellulären Kommunikation ist wichtig für die Steuerung verschiedener physiologischer Aktivitäten innerhalb und außerhalb der Zelle. Dieser Aufsatz beschreibt ein Protokoll zum Messen der räumlich-zeitliche Art der Einzelzellsekrete. Um dies zu erreichen, ist ein multidisziplinärer Ansatz verwendet, der markierungsfreien nanoplasmonische Erfassung mit Live Cell Imaging integriert.

Ein Markierungsfreie Technik für die Raum-zeitliche Imaging von Single Cell Sekrete

Objektiv-freie Videomikroskopie ermöglicht es uns, Zellkulturen direkt in die Brutmaschine zu überwachen. Hier beschreiben wir die vollständige Protokoll zum erwerben und analysieren eine 2,7 Tage lang Übernahme von kultivierten HeLa-Zellen, was zu einem Dataset von 2,2 x 106 Messungen der einzelnen Zellmorphologie und 10584 Zellzyklus tracks.

Objektiv-kostenlose Videomikroskopie für die Dynamik und Quantitative Analyse der adhärente Zellkultur

Wir beschreiben ein Protokoll für die markierungsfreie Identifizierung von Lymphozyten-Subtypen mit quantitativen Phase Bildgebung und ein maschinelles lernen-Algorithmus. Messungen der 3D Brechungsindex Schichtbilder von Lymphozyten präsentieren 3D morphologische und biochemische Informationen für einzelne Zellen, die dann mit einem Computerlernen Algorithmus zur Identifizierung von Zelltypen analysiert wird.

Markierungsfreie Identifikation von Lymphozyten-Subtypen mit dreidimensionale Quantitative Phase Bildgebung und maschinelles lernen

Ziel dieses Protokolls ist es, zu zeigen, wie die Lattice Light-Sheet-Mikroskopie verwendet wird, um die Dynamik von Oberflächenrezeptoren in lebenden Zellen vierdimensional zu visualisieren. Hier werden T-Zellrezeptoren auf CD4+ primären T-Zellen gezeigt.

Visualisierung der Oberflächen-T-Zell-Rezeptordynamik vierdimensional mit Lattice Light-Sheet-Mikroskopie

Erfahren Sie die schnelle, markierungsfreie Analyse natürlicher Killerzellen mit linsenfreier Schattenbildgebung. Diese Methode quantifiziert NK-Zell-Aktivierung in 30 Sekunden auf Einzelzellebene.

Vor Ort einsetzbare, linsenfreie Bildgebungsplattform für die schnelle markierungsfreie Analyse der Aktivierung natürlicher Killerzellen (Video) | JoVE Journal

Vor Ort einsetzbare, linsenfreie Bildgebungsplattform für die schnelle markierungsfreie Analyse der Aktivierung natürlicher Killerzellen

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