Einfaches und wirksames Verfahren zur Hämostase in den Mausarterien

Diese Forschung entwickelt eine Methode, um arterielle Einstiche zu schließen und gleichzeitig die Durchblutung zu erhalten. Es untersucht, ob Fettumwicklung eine Ischämie nach einer arteriellen Punktion verhindert. Eine zentrale experimentelle Herausforderung bei diesem Verfahren ist die effektive Hämostase nach einer arteriellen Punktion ohne arterielle Verschluss.

Zunächst positionieren Sie die betäubte Maus auf dem Operationstisch. Nach der Bestätigung der Anästhesie entfernen Sie Haare aus dem Hals- und Schädelbereich mit einem Enthaarungsapparat. Desinfizieren Sie die freiliegende Haut mit Povidoniod und anschließend 75 % Ethanol, um eventuelle Rückstände zu entfernen.

Legen Sie die Maus auf ein Heizkissen, das auf 37 Grad Celsius eingestellt ist, und lassen Sie sie während der gesamten Dauer des experimentellen Verfahrens dort aufbewahren. Positioniere die Maus in Rückenposition auf dem Heizkissen. Nach einem Mittellinien-Zervikalschnitt entnehmen Sie ein drei mal drei mal einen Millimeter großes subkutanes Fettgewebetransplantat für die spätere Nutzung.

Führen Sie eine stumpfe Dissektion der Submandibulardrüse, des Zungenbeinmuskels und des Musculus sternocleidomastoideus durch, um beide gemeinsamen Halsschlagadern freizulegen. Dann befreit man vorsichtig die arterie Halsschlagader gemeinsam, um die inneren und äußeren Halsschlagader freizulegen. Legen Sie eine Gefäßklemme am distalen Ende der Arteria Halsschlagader und dann eine Gefäßklemme zwei am proximalen Ende der Arteria an.

Als Nächstes wird die gemeinsame Halsschlagader zwischen den beiden Klemmen mit einer 23-Gauge-Nadel durchstochen. Nach dem Entfernen der Nadel wickelt man die arterie Halsschlagader an der Stichstelle mit der Schnittfläche oder der nicht-serosaliegenden Seite des zuvor entnommenen Fettpads. Setzen Sie eine 4-0-Naht unter die fettumwickelte Arterie.

Binden Sie vorsichtig eine einzelne Decke über die Fettoberfläche, um Druck auszuüben und einen sicheren Kontakt zwischen der Fettplatte und der Gefäßwand auszuüben. Dann passen Sie die Ligatur schrittweise an, um den Druck auszugleichen und eine Hämostase zu erreichen. Heben Sie die distale arterie der Halsschlagader mit einem feuchten Wattestäbchen an.

Lass die Gefäßklemme eins los und ziehe den Abstrich langsam heraus, um eine allmähliche Rückkehr des Blutflusses zur Einstichstelle zu ermöglichen. Überprüfen Sie nun die Durchblutung an der Stichstelle. Wenn aktive Blutungen festgestellt werden, wird eine Gefäßklemme erneut auf die distale arterie der Halsschlagader gemischt angelegt.

Nach einer Minute langsam die Gefäßklemme eins lösen. Wenn die Blutung anhält, positionieren Sie das Fettpolster neu oder ziehen Sie die Ligatur leicht an, um den Druck zu erhöhen, bis eine vollständige Hämostase erreicht ist. Heben Sie die proximale Arteria gewöhnliche Halsschlagader mit einem feuchten Wattestäbchen an.

Als Nächstes lösen Sie die Gefäßklemme zwei und ziehen Sie den Abstrich langsam heraus, um einen kontrollierten Blutfluss zur Einstichstelle zu ermöglichen. Wenn eine Blutung auftritt, legen Sie erneut eine Gefäßklemme zwei an der distalen Halsschlagader der Halsschlagader an. Jetzt ziehe die einzelne Naht leicht fester, um den Druck zu erhöhen, und warte eine Minute.

Dann hebt man die proximale arterie der Halsschlagader der Arterie Arteria Commons an und löst die Gefäßklemme zwei, indem man den feuchten Abstrich langsam zur Einstichstelle rollt. Füge einen weiteren Wurf mit derselben Naht hinzu, um einen Doppelknoten über dem ursprünglichen Wurf zu bilden, was die Fixierung des Fettpolsters verbessert und eine ausgewogene Hämostase fördert. Überprüfen Sie, dass die gemeinsamen Halsschlagader auf beiden Seiten des Fettpads gefüllt sind und der Gefäßdurchmesser konstant bleibt, was auf eine erfolgreiche Wiederherstellung des Blutflusses hinweist.

Zum Schluss nähen Sie den Halswirbelschnitt und legen Sie ein Desinfektionsmittel an der Wunde auf. Präoperative und postoperative Laser-Speckle-Kontrastbildgebung und Perfusionseinheitsmessungen sowohl bei Placebo- als auch bei operierten Mäusen zeigten keine signifikanten Veränderungen und bestätigten, dass der zerebrale Blutfluss durch die arterielle Hämostase-Technik nicht beeinträchtigt wurde. Die histologische Untersuchung des Hirngewebes mittels Hämatoxylin- und Eosin-Färbungen sieben, 14 und 28 Tage nach der Operation bei operierten Mäusen und bei Scheinmäusen zeigte eine intakte Gewebearchitektur im Cortex, Hippocampus und Thalamus ohne pathologische Veränderungen.

Die Nissl-Färbung zeigte eine organisierte neuronale Ausrichtung, eine normale Zellstruktur und erhaltene Nissl-Körper über alle Gruppen und Zeitpunkte, was darauf hinweist, dass keine strukturellen Schäden durch arteriellen Verschluss erforderlich sind. Die vorliegende Methode zielt darauf ab, die Stichstelle nach dem Eingriff zu versiegeln und dabei den normalen Blutfluss aufrechtzuerhalten, um so postoperative Ischämie zu verhindern.