Precise Phage Mutagenesis with NgTET-Assisted CRISPR-Cas Systems

Helene Keuthen; Nadiia Pozhydaieva; Katharina H&#246;fer

doi:10.3791/69022

Präzise Phagenmutagenese mit NgTET-assistierten CRISPR-Cas-Systemen

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Bioengineering

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Precise Phage Mutagenesis with NgTET-Assisted CRISPR-Cas Systems

Präzise Phagenmutagenese mit NgTET-assistierten CRISPR-Cas-Systemen

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10:52 min

October 14, 2025

DOI: 10.3791/69022-v

Helene Keuthen¹, Nadiia Pozhydaieva^1,2,3, Katharina Höfer^1,4,5

¹Max Planck Institute for Terrestrial Microbiology, ²Kavli Institute of Nanoscience,Delft University of Technology, ³Department of Bionanoscience,Delft University of Technology, ⁴Philipps-Universität Marburg, Department of Chemistry,Center for Synthetic Microbiology (SYNMIKRO), ⁵Institute of Pharmaceutical Biology and Biotechnology, Department of Pharmacy,Marburg University

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Hier stellen wir ein Protokoll vor, um DNA-Modifikationen in Bakteriophagen mit Hilfe des NgTET-Enzyms zu reduzieren, das eine effiziente und narbenfreie CRISPR-Cas-Mutagenese ermöglicht. Diese Methode ermöglicht die Gentechnik von Phagen für Anwendungen in der Biotechnologie und Phagentherapie.

Wir untersuchen Phageninfektionen auf molekularer Ebene. Das ist wirklich Grundlagenforschung. Wir betreiben jedoch nicht nur Grundlagenforschung, sondern sind auch daran interessiert, diese Grundlagenforschung in Anwendungen umzusetzen, in denen wir dieses Wissen nutzen, um die Phageninfektion zu untersuchen und es für das Phagen-Engineering und für therapeutische Anwendungen zu nutzen.

Eine der jüngsten Entwicklungen auf dem Gebiet der Phagenforschung ist die Entdeckung eines bakteriellen Immunsystems. Dieses Immunsystem ist in allen Bakterien vorhanden und sie haben Werkzeuge identifiziert oder generiert, um den Phagen wirklich zu bekämpfen. Allerdings ist der Phagen ziemlich schlau.

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