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<table><tbody><tr><td>Amphotericin B</td><td>Gibco (Thermo Fisher Scientific)</td><td>15290018</td><td>Endkonzentration: 1,25&nbsp;&mu;g/mL</td></tr><tr><td>Autologous serum, rabbit (AS)</td><td>Prepared in-house</td><td>-</td><td>Zubereitet aus Vollblut; gefiltert durch&nbsp;0,22 &mu;m&nbsp;PES</td></tr><tr><td>Blue LED curing lamp</td><td>Woodpecker Medical Instrument Co</td><td>LED.C model</td><td>Wellenlänge: &lambda;=420&ndash;480&nbsp;nm; Abstand: 1&ndash;2&nbsp;cm; Lichtleistung: 850-1000 mW/cm2</td></tr><tr><td>Buprenorphine (Buprecare)</td><td>Ecuphar</td><td>578950</td><td>Dosis: 0,05&nbsp;mg/kg, subkutane Injektion alle&nbsp;12&nbsp;h&nbsp;für&nbsp;72&nbsp;h</td></tr><tr><td>Camera</td><td>Panasonic</td><td>LUMIX TZ35</td><td>Kamera mit Leica-Optik ausgestattet</td></tr><tr><td>Cimarec Digital Stirring Hotplate</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>SP131320-33</td><td>220-240 V, Max. Temperatur: 540 &deg;C</td></tr><tr><td>Crescent microsurgical blade</td><td>BVI Medical</td><td>373807</td><td>-</td></tr><tr><td>DMEM (Dulbecco&rsquo;s Modified Eagle Medium)</td><td>Gibco (Thermo Fisher Scientific)</td><td>11966025</td><td>-</td></tr><tr><td>Eppendorf tubes (0.2 mL)</td><td>Merck KGaA</td><td>30124707</td><td>Für HAMe-Vorbereitung kalt gehalten; Aliquotierung</td></tr><tr><td>Eppendorf tubes (5 mL)</td><td>Merck KGaA</td><td>30119606</td><td>Für HAMe-Vorbereitung kalt gehalten; Aliquotierung</td></tr><tr><td>Fluorescein solution&nbsp;</td><td>Novartis</td><td>Colorcusi Fluotest</td><td>2% Fluorescein-Lösung, 5 &micro;l Augentropfen</td></tr><tr><td>Gibco Neomycin</td><td>Merck KGaA</td><td>N1142</td><td>Endkonzentration: 50&nbsp;&mu;g/mL</td></tr><tr><td>Gelatin powder</td><td>Sigma Aldrich</td><td>G1890</td><td>Bei&nbsp;80 &deg;C aufgelöst; pH auf 7,0 eingestellt</td></tr><tr><td>Hyaluronic acid artificial tears (0.2%)</td><td>Chem.-pharm. Fabrik GmbH</td><td>Hylo-Tear</td><td>-</td></tr><tr><td>ImageJ image processing software</td><td>National Institute of Mental Health</td><td>-</td><td>Entwickelt von Wayne Rasband am Research Services Branch</td></tr><tr><td>Ketamine (Ketolar)</td><td>Pfizer</td><td>631028.1</td><td></td></tr><tr><td>Lidocaine</td><td>Vet One</td><td>NDC 13985-222-04</td><td>Topisch oder subkutane Injektion</td></tr><tr><td>Penicillin&ndash;Streptomycin</td><td>Gibco (Thermo Fisher Scientific)</td><td>15140-122</td><td>Endkonzentration: 50&nbsp;&mu;g/mL</td></tr><tr><td>PES syringe filters,&nbsp;0.22&thinsp;&mu;m0.22&mu;m&nbsp;(Millex)</td><td>Merck KGaA</td><td>SLGP033RS</td><td>-</td></tr><tr><td>Phosphate-buffered saline (PBS)</td><td>Sigma Aldrich</td><td>P4417-100TAB</td><td>-</td></tr><tr><td>Protease inhibitor cocktail</td><td>Sigma Aldrich</td><td>P8340</td><td>Zugabe von&nbsp;5&nbsp;&mu;L&nbsp;pro&nbsp;mg&nbsp;Gewebe</td></tr><tr><td>Povidone-iodine solution</td><td>Meda pharma</td><td>7167204</td><td>Präoperative Desinfektion</td></tr><tr><td>Riboflavin phosphate (RFP)</td><td>Sigma Aldrich</td><td>R0630000</td><td>Konzentrationen: 0,01%&nbsp;w/v&nbsp;(Endkonzentration);&nbsp;0,02%&nbsp;w/v&nbsp;(Stammlösung)</td></tr><tr><td>Sonicator</td><td>Bandelein electronic</td><td>Sonoplus GM mini20</td><td>-</td></tr><tr><td>Sonicator probe</td><td>Bandelein electronic</td><td>MS 1.5</td><td>1,5 mm Durchmesser, 63 mm Länge.</td></tr><tr><td>Tarsorrhaphy sutures (non-absorbable)</td><td>Alcon&nbsp;</td><td>8065308001</td><td>1&ndash;2 Nähte nach Bedarf</td></tr><tr><td>Tobramycin ophthalmic solution (3 mg/mL)</td><td>Novartis</td><td>Tobrex</td><td>Dosierung: zweimal täglich bis zum Verschluss</td></tr><tr><td>Hessburg-Barron trephine, 6.5&nbsp;mm diameter</td><td>Jedmed</td><td>21-8265</td><td>-</td></tr><tr><td>Vacutainer blood collection tubes with polymer gel separator</td><td>BD (Becton, Dickinson and Company)</td><td>367704</td><td>-</td></tr><tr><td>Xylazine solution</td><td>Laboratorios Calier SA</td><td>Xylagesic</td><td>Dosis: 5&nbsp;mg/kg&nbsp;intramuskuläre Injektion</td></tr></tbody></table>

herstellung und chirurgische anwendung von angereicherten, fotovernetzten gelatine-riboflavin-hydrogelen zur reparatur von hornhautwunden bei kaninchen

Fabrication and Surgical Application of Enriched Photo-crosslinked Gelatin&#8211;Riboflavin Hydrogels for Corneal Wound Repair in Rabbits

Herstellung und chirurgische Anwendung von angereicherten, fotovernetzten Gelatine-Riboflavin-Hydrogelen zur Reparatur von Hornhautwunden bei Kaninchen

This article presents a step&#8209;by&#8209;step protocol to fabricate, supplement, and surgically apply an in situ blue&#8209;light&#8211;crosslinkable ...

fabrication-surgical-application-enriched-photo-crosslinked

Research

Forschung

JoVE Journal

Bioengineering

Biotechnik

Wir berichten über ein Verfahren zur Herstellung von Mikrotaschen in elektro Membranen, bei denen auf das Zellverhalten zu untersuchen. Insbesondere beschreiben wir eine Kombination von Mikrostereo und Elektro zur Herstellung von PLGA (Poly (lactid-co-glycolid)) Hornhaut Biomaterial Geräten mit Mikromerkmalen ausgestattet.

Kombination von Mikrostereolithographie und Elektrospinnen auf Membranen Ausgestattet mit Nischen für die Hornhautregeneration Produzieren

Hornhautkollagen-Vernetzung (CXL) ist die einzige derzeit verfügbare konservative Behandlung, um das Fortschreiten des Keratokonus zu stoppen, indem die biomechanische Steifigkeit des Hornhautstromas verbessert wird. Das Ziel dieses Manuskripts ist es, die Methoden von drei verschiedenen CXL-Protokollen hervorzuheben: konventionelle CXL (C-CXL), beschleunigte CXL (A-CXL) und Iontophorese CXL (I-CXL).

Drei Verschiedene Protokolle der Hornhautkollagenvernetzung in Keratokonus: Konventionelle, beschleunigte und Iontophorese

Wir zeigen die Wirkung von scleral Vernetzung mit Riboflavin und UVA auf einer axialen Verlängerung Kaninchenaugen. Axial Dehnung wurde in 13 Tage alte Neuseeland-Kaninchen (männlich und weiblich), induziert durch ihr rechtes Auge Augenlider Vernähen (Tarsorrhaphie).

Sklerale Vernetzungs Mit Riboflavin und UV-A-Strahlung-für Prävention von Axial Myopie in einem Kaninchenmodell

Dieses Protokoll beschreibt Techniken für die Bewertung der chemische Vernetzung von den Kaninchen Sklera mit Erzeugung der zweiten harmonischen Bildgebung und differential scanning Kalorimetrie.

Zweite harmonische Generation Signale in Kaninchen Sklera als Instrument für die Bewertung des therapeutischen Gewebes Vernetzung (TXL) für Kurzsichtigkeit

Ein Protokoll für eine Ex Vivo Hornhaut Orgel Kulturmodells nützlich für Wundheilung Studien beschrieben wird. Dieses Modellsystem kann verwendet werden, um die Auswirkungen von Agenten, regenerative Heilung zu fördern oder Medikamententoxizität in einer organisierten mehrzelligen 3D-Umgebung.

Ex Vivo Wundheilung Hornhaut Orgel Kulturmodells für Studien

Hier werden Tiermodelle auf der Basis von Maus und Kaninchen für mechanische und chemische Verletzungen des Hornhautepithels entwickelt, um neue Therapeutika und den zugrunde liegenden Mechanismus zu untersuchen.

Ex vivo und in vivo Tiermodelle für mechanische und chemische Verletzungen des Hornhautepithels

Dieser Artikel beschreibt ein neues Tiermodell, das entwickelt wurde, um die Anatomie und Histologie der Hornhaut und ihre Heilungsprozesse zu untersuchen. Dieses neue Tiermodell verwendet die mongolische Rennmaus, die eine Hornhaut mit vielen Ähnlichkeiten mit der menschlichen Hornhaut hat.

Mongolische Rennmäuse als Tiermodell der Wundheilung

Descemet's Stripping Only ist ein experimentelles Verfahren, bei dem Patienten mit zentralen Hornhautguttae, die aus Fuchs Endothelial Corneal Dystrophy resultieren, Descemets Membran für periphere Zellen abgestreift haben, um die Endothelschicht zu regenerieren. Wir stellen eine neuartige Methodik vor, die DSO in dystrophischen menschlichen Hornhäuten ex vivo mit beschleunigter Heilung simuliert, die durch eFGF1 (NM141) stimuliert wird.

Ein menschliches Hornhautorgan-Kulturmodell des Descemet-Strippings nur mit beschleunigter Heilung, stimuliert durch den künstlichen Fibroblasten-Wachstumsfaktor 1

Das vorliegende Protokoll beschreibt die Extraktion von Lumican aus der Amnionmembran (AM) und deren Lagerbedingungen als AM-Extrakt (AME) bei -20 °C, 4 °C und Raumtemperatur (RT) für 6, 12, 20 und 32 Tage, um seine Proteine und Lumican-Konzentration zu quantifizieren.

Lumican-Extraktion aus Amnionmembran und Bestimmung ihrer Lagertemperatur

Das hier vorgestellte Protokoll zeigt die Synthese eines stark adhäsiven Hydrogels Gelatine o-Nitrosobenzaldehyd (Gelatine-NB). Gelatine-NB hat eine schnelle und effiziente Gewebeadhäsionsfähigkeit, die eine starke physikalische Barriere zum Schutz von Wundoberflächen bilden kann, so dass erwartet wird, dass es auf dem Gebiet der Biotechnologie zur Reparatur von Verletzungen angewendet wird.

Synthese von stark adhäsivem Hydrogel, Gelatine O-Nitrosobenzaldehyd

Die mechanisch isolierte stromale Gefäßfraktion (SVF) in Kombination mit einem Fibrinhydrogel bietet einen einfachen und effizienten Träger für lebensfähige Stromazellen aus Fettgewebe für verschiedene Indikationen, einschließlich Tissue Engineering und/oder Wundheilungszwecke. Hier stellen wir die Herstellung eines mechanischen SVF (mSVF)-Fibrin-Hydrogel-Konstrukts für die translationale Forschung und klinische Anwendung vor.

Die Kombination aus mechanisch isolierter stromaler vaskulärer Fraktion und Fibrinhydrogel: Ein Verarbeitungsprotokoll

University of the Basque Country UPV/EHU.  Ein reproduzierbares Protokoll wird für die Herstellung, Anreicherung und Anwendung eines in situ blaulicht-kreuzvernetzbaren Gelatine-Ribollavin-Hydrogels zur Reparatur von hornhautstromaler Wunden bei Kaninchen vorgestellt, einschließlich prozeduraler Schritte für chirurgische Handhaben, partielle Tarsorrhaphie und postoperative Betreuung.

Herstellung und chirurgische Anwendung von angereicherten, fotovernetzten Gelatine-Riboflavin-Hydrogelen zur Reparatur von Hornhautwunden bei Kaninchen

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