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<ol><li>Thomas, F. H., Vanderhyden, B. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Oocyte-granulosa+cell+interactions+during+mouse+follicular+development%3A+regulation+of+kit+ligand+expression+and+its+role+in+oocyte+growth%5BTitle%5D)+AND+%22Reprod+Biol+Endocrinol%22%5BJournal%5D)">Oocyte-granulosa cell interactions during mouse follicular development: regulation of kit ligand expression and its role in oocyte growth.</a> Reprod Biol Endocrinol. 4 (1), 19(2006).</li>
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<li>Dipali, S. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Self-organizing+ovarian+somatic+organoids+preserve+cellular+heterogeneity+and+reveal+cellular+contributions+to+ovarian+aging%5BTitle%5D)+AND+%22Aging+Cell%22%5BJournal%5D)">Self-organizing ovarian somatic organoids preserve cellular heterogeneity and reveal cellular contributions to ovarian aging.</a> Aging Cell. 25 (1), e70333(2026).</li>
<li>Di Nisio, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Silk-ovarioids%3A+establishment+and+characterization+of+a+human+ovarian+primary+cell+3D-model+system%5BTitle%5D)+AND+%22Hum+Reprod+Open%22%5BJournal%5D)">Silk-ovarioids: establishment and characterization of a human ovarian primary cell 3D-model system.</a> Hum Reprod Open. 2025 (3), hoaf042(2025).</li>
<li>Nikanfar, S., Leonel, E. C. R., Damdimopoulou, P., Flaws, J. A., Amorim, C. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+phthalate+exposure+on+human+ovarian+extracellular+matrix+composition%3A+insights+from+a+3D+spheroid+model%5BTitle%5D)+AND+%22Environ+Res%22%5BJournal%5D)">Effects of phthalate exposure on human ovarian extracellular matrix composition: insights from a 3D spheroid model.</a> Environ Res. 279, 121797(2025).</li>
<li>Briley, S. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reproductive+age-associated+fibrosis+in+the+stroma+of+the+mammalian+ovary%5BTitle%5D)+AND+%22Reproduction%22%5BJournal%5D)">Reproductive age-associated fibrosis in the stroma of the mammalian ovary.</a> Reproduction. 152 (3), 245-260 (2016).</li>
<li>Converse, A., Zaniker, E. J., Amargant, F., Duncan, F. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Recapitulating+folliculogenesis+and+oogenesis+outside+the+body%3A+encapsulated+in+vitro+follicle+growth%5BTitle%5D)+AND+%22Biol+Reprod%22%5BJournal%5D)">Recapitulating folliculogenesis and oogenesis outside the body: encapsulated in vitro follicle growth.</a> Biol Reprod. 108 (1), 5-22 (2023).</li>
<li>Dean, M., Jin, V., Russo, A., Lantvit, D. D., Burdette, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Exposure+of+the+extracellular+matrix+and+colonization+of+the+ovary+in+metastasis+of+fallopian-tube-derived+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Carcinogenesis%22%5BJournal%5D)">Exposure of the extracellular matrix and colonization of the ovary in metastasis of fallopian-tube-derived cancer.</a> Carcinogenesis. 40 (1), 41-51 (2019).</li>
<li>Charalambous, C., Webster, A., Schuh, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Aneuploidy+in+mammalian+oocytes+and+the+impact+of+maternal+ageing%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Mol+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Aneuploidy in mammalian oocytes and the impact of maternal ageing.</a> Nat Rev Mol Cell Biol. 24 (1), 27-44 (2023).</li>
<li>Rowley, J. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Low+molecular+weight+hyaluronan+induces+an+inflammatory+response+in+ovarian+stromal+cells+and+impairs+gamete+development+in+vitro%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Mol+Sci%22%5BJournal%5D)">Low molecular weight hyaluronan induces an inflammatory response in ovarian stromal cells and impairs gamete development in vitro.</a> Int J Mol Sci. 21 (3), 1036(2020).</li>
<li>Amargant, F., Vieira, C., Pritchard, M. T., Duncan, F. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Systemic+low-dose+anti-fibrotic+treatment+attenuates+ovarian+aging+in+the+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22Geroscience%22%5BJournal%5D)">Systemic low-dose anti-fibrotic treatment attenuates ovarian aging in the mouse.</a> Geroscience. 47 (3), 3475-3495 (2024).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>0,2 &micro;m, Polyethersulfon-Spritzfilter</td><td>Corning</td><td>431229</td><td></td></tr><tr><td>1,5 mL Mikrozentrifugen-Röhrchen</td><td>MIDSCI</td><td>PR-MCT15</td><td></td></tr><tr><td>100 mL Glasbecher</td><td>Fisherbrand</td><td>FB100100</td><td></td></tr><tr><td>100 mm Petrischalen</td><td>Corning</td><td>351029</td><td></td></tr><tr><td>15 mL Konusrohre</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>339651&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>24-Well-Platten (TC-behandelt)</td><td>Corning</td><td>353047</td><td></td></tr><tr><td>28-Gauge Insulin-Nadeln</td><td>Exel International</td><td>26027</td><td></td></tr><tr><td>35 mm Petrischalen</td><td>Corning</td><td>351008</td><td></td></tr><tr><td>3&beta;-HSD Antikörper</td><td>Cosmo Bio</td><td>K0607</td><td>1:1000</td></tr><tr><td>4% Paraformaldehyd</td><td>Electron Microscopy Sciences</td><td>1574100</td><td></td></tr><tr><td>40 &micro;m Zellsieb</td><td>Corning</td><td>431750</td><td></td></tr><tr><td>45 mm Uhrglas</td><td>Electron Microscopy Sciences</td><td>7054345</td><td></td></tr><tr><td>50 mL Konusrohre</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>339652&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>60 mL sterile Spritze</td><td>Air-Tite</td><td>ML60</td><td></td></tr><tr><td>60 mm TC-behandelte Platten</td><td>Corning</td><td>353037</td><td></td></tr><tr><td>6-Well-Platten (TC-behandelt)</td><td>Corning</td><td>353046</td><td></td></tr><tr><td>Agarose</td><td>Hoefer</td><td>GR140-500</td><td>Gelstärke >1200 g/cm2; Geltemperatur 36 &deg;C</td></tr><tr><td>Autoklav-Sterilisationsbeutel</td><td>Fisherbrand</td><td>01-812-55</td><td></td></tr><tr><td>Biotinyliertes Ziegen-Anti-Maus-IgG</td><td>Vector Laboratories</td><td>BA-9200-1.5</td><td>1:200</td></tr><tr><td>Biotinyliertes Ziegen-Anti-Kaninchen-IgG</td><td>Vector Laboratories</td><td>PK-6101</td><td>1:200</td></tr><tr><td>Biotinyliertes Ziegen-Anti-Ratten-IgG</td><td>Vector Laboratories</td><td>BA-9400-1.5</td><td>1:100</td></tr><tr><td>Blaufärbemittel</td><td>Fisherbrand</td><td>23-245681</td><td></td></tr><tr><td>Zentrifuge mit Schwingkorbrotor für 50 mL Konusrohre</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>Sorvall X1R Pro-MD</td><td></td></tr><tr><td>Klasse II Biosicherheitsschrank</td><td>The Baker Company</td><td>SG403A</td><td></td></tr><tr><td>Gespaltenes Caspase-3 (CC3) Antikörper</td><td>Cell Signaling Technology</td><td>9579T</td><td>1:250</td></tr><tr><td>CO2-Inkubator</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>Heracell VIOS 160i CO2 Inkubator</td><td></td></tr><tr><td>Collagenase, Typ IV, Pulver</td><td>Gibco, Fisher Scientific</td><td>17-104-019</td><td></td></tr><tr><td>C-Series Mouse Cytokine Antibody Array 3 Kit</td><td>RayBiotech</td><td>AAM-CYT-3-8</td><td></td></tr><tr><td>Cytoseal XYL</td><td>Epredia</td><td>83124</td><td></td></tr><tr><td>Desoxyribonuklease I aus Rinderpankreas</td><td>Millipore Sigma</td><td>DN25-100MG</td><td>Dnase I</td></tr><tr><td>Dissektionsmikrozange</td><td>World Precision Instruments</td><td>WPI-14003</td><td></td></tr><tr><td>Dissektionsscheren</td><td>World Precision Instruments</td><td>WPI-15922</td><td></td></tr><tr><td>Dissektionsmikroskop</td><td>Leica</td><td>MZ9.5, S9 series</td><td></td></tr><tr><td>DPBS, kein Calcium, kein Magnesium</td><td>Gibco, Fisher Scientific</td><td>14-190-250</td><td>pH 7.0&ndash;7.3</td></tr><tr><td>Eosin</td><td>Fisherbrand</td><td>23-314631</td><td></td></tr><tr><td>F4/80 Antikörper</td><td>Bio-Rad</td><td>MCA497G</td><td>1:50</td></tr><tr><td>Fötales bovines Serum, zertifiziert, hitzeinaktiviert, USA</td><td>Gibco, ThermoFisher Scientific</td><td>10082147</td><td></td></tr><tr><td>Feinspitzen-Dissektionszange</td><td>World Precision Instruments</td><td>WPI-14098</td><td></td></tr><tr><td>FOXL2 Antikörper</td><td>Abcam</td><td>ab246511</td><td>1:200</td></tr><tr><td>Graefe-Pinzette</td><td>Fine Science Tools</td><td>1105010</td><td></td></tr><tr><td>Hämatoxylin</td><td>EK Industries</td><td>EKI 47971GL</td><td></td></tr><tr><td>Hämozytometer</td><td>MedOne</td><td>DHCN015</td><td></td></tr><tr><td>Bildgebungssystem</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>EVOS FL Auto</td><td></td></tr><tr><td>IntestiCult Organoid Growth Medium (Maus)</td><td>STEMCELL Technologies</td><td>06005</td><td>Basismedium, Supplements 1 und 2</td></tr><tr><td>Laminar-Flow-Haube</td><td>IVFtech</td><td>IVFtech sterile Workstation</td><td></td></tr><tr><td>Leibovitz's L-15 Medium</td><td>Gibco, Fisher Scientific</td><td>11415114</td><td></td></tr><tr><td>Mikroskop-Objektträger</td><td>Mercedes Scientific</td><td>MER 7255/90/WH/CC</td><td></td></tr><tr><td>MicroTissues 3D Petrischalen Mikroformen für Sphäroide</td><td>Millipore Sigma</td><td>Z764043-6EA</td><td>Silikonformen für Agarose-Mikroformen</td></tr><tr><td>Modifiziertes Davidson's Fixativ</td><td>Electron Microscopy Sciences</td><td>6413350</td><td></td></tr><tr><td>OVCAR8-RFP-Zellen</td><td></td><td></td><td>Geschenk von Joanna Burdette PhD, University of Illinois Chicago</td></tr><tr><td>Penicillin-Streptomycin</td><td>Millipore Sigma</td><td>P4333-100ML</td><td></td></tr><tr><td>Picrosirius Rot Färbelösung</td><td>StatLab</td><td>STPSRPT</td><td></td></tr><tr><td>RPMI 1640 Medium (ATCC-Modifikation)</td><td>Gibco, Fisher Scientific</td><td>A1049101</td><td></td></tr><tr><td>Tischzentrifuge</td><td>Eppendorf</td><td>Centrifuge 5430 R&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>Trypanblau</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>T10282</td><td></td></tr><tr><td>Trypsin-EDTA (0,05%), phenolrot</td><td>Gibco, ThermoFisher Scientific</td><td>25300054</td><td></td></tr><tr><td>Vimentin Antikörper</td><td>Cell Signaling Technology</td><td>5741S</td><td>1:100</td></tr><tr><td>&alpha;MEM, GlutaMAX-Supplement, keine Nukleoside</td><td>Gibco, Fisher Scientific</td><td>32561102</td><td></td></tr></tbody></table>

untersuchung des ovarialmikroumfelds: methoden zur isolierung, 2d-kultur und organoiden kultur somatischer maus-ovarialzellen

Probing the Ovarian Microenvironment: Methods for Isolation, 2D Culture, and Organoid Culture of Mouse Ovarian Somatic Cells

Untersuchung des Ovarialmikroumfelds: Methoden zur Isolierung, 2D-Kultur und organoiden Kultur somatischer Maus-Ovarialzellen

The ovary consists of heterogeneous populations of somatic cells, both within the follicle and the surrounding stroma, which are critical to support ...

probing-ovarian-microenvironment-methods-for-isolation-2d-culture

Research

Forschung

JoVE Journal

Developmental Biology

Entwicklungsbiologie

Kultur von normalen Zellen in ihrer dreidimensionalen Kontext stellt eine alternative Methode zur frühen Ereignisse für die zelluläre Transformation und Tumorentstehung erforderlich studieren. Diese Methode wird verwendet, um normale Eierstock-und Eileiter Zellen wachsen zu frühen Ereignisse bei Eierstockkrebs Bildung zu studieren.

Alginat Hydrogele für Three-Dimensional Organ Culture der Eierstöcke und Eileitern

Dieses Protokoll beschreibt die Primärkultur / Co-Kultur von Maus-Eierstockgewebe, mit Eierstöcke von neugeborenen Mäusen und individuelle Eibläschen von präpubertären Mäusen. Die Kulturtechniken unterstützt Entwicklung in einer hoch physiologischer Weise ermöglicht Untersuchung der Wirkung von äußeren Mitteln an den Eierstöcken und der Wechselwirkungen zwischen Follikeln.

Kultur und Co-Kultur von Maus Eierstöcke und Eibläschen

Hier präsentieren wir ein Protokoll zur Konstruktion eines dreidimensionalen in vitro Modells der Auskleidung der Bauchhöhle, bestehend aus primären menschlichen Mesothelzellen und Fibroblasten, die mit extrazellulärer Matrix überlagert sind, als Werkzeug zur Untersuchung der Adhäsion, Invasion und Proliferation von Eierstockkrebszellen.

Modellierung der frühen Schritte der Eierstockkrebs Verbreitung in einer organotypischen Kultur der Menschen Peritonealhöhle

Hier präsentieren wir ein Protokoll, um die Follikel in kultivierten Eierstöcken von jungen Mäusen ohne seriellen Schnitt zu quantifizieren. Mit ganzen Organs Immunfluoreszenz und Gewebe löschen, wird körperliche Schneiden mit optischer Schnitt ersetzt. Diese Methode der Probenvorbereitung und Visualisierung Orgel Integrität bewahrt und automatisierte Quantifizierung bestimmter Zellen erleichtert.

Ganze Mount Immunfluoreszenz und Follikel Quantifizierung der kultivierten Maus Eierstöcke

Eierstöcke Gewebekulturen als Modelle der Follikel Entwicklung, Eisprung und Follikel Atresie einsetzbar und regulatorische Mechanismen der Eierstöcke Dynamiken zeigen.

Ovarian Tissue Culture Phänomene in der Maus Eierstock zu visualisieren

In-vitro-Kultur der rindereigenen Ovarialrinde und die Wirkung der ernährungsphysiologischen Stair-Step-Diät auf die ovarielle Mikroumgebung wird vorgestellt. Eierstockkortexstücke wurden sieben Tage lang kultiviert und Steroide, Zytokine und Follikelstadien wurden bewertet. Die Stair-Step-Diätbehandlung hatte eine erhöhte Steroidogenese, was zu einer Follikelprogression in Kultur führte.

Gewebekultur der Rinderovariarinde

Dieses Protokoll bietet einen systematischen Rahmen für die Etablierung von Eierstockkrebs-Organoiden aus verschiedenen Krankheitsstadien und adressiert die Herausforderungen der patientenspezifischen Variabilität, um die Ausbeute zu erhöhen und eine robuste langfristige Expansion für nachfolgende Anwendungen zu ermöglichen. Es umfasst detaillierte Schritte für die Gewebeverarbeitung, die Aussaat, die Anpassung der Medienanforderungen und die Immunfluoreszenzfärbung.

Strategie für das Biobanking von Ovarialkarzinom-Organoiden: Berücksichtigung der Heterogenität zwischen Patienten über histologische Subtypen und Krankheitsstadien hinweg

Dieses Protokoll beschreibt die Etablierung dreidimensionaler (3D) Gewebeorganoide aus primären humanen Zellen des Oberflächenepithels der Eierstöcke (hOSE). Das Protokoll umfasst die Isolierung von hOSE aus frisch entnommenen Eierstöcken, die zelluläre Expansion des hOSE, Kryokonservierungs- und Auftauverfahren und die Ableitung von Organoiden. Immunfluoreszenz, quantitative Analyse und die Präsentation des Nutzens als Screening-Plattform sind enthalten.

Organoide des menschlichen Oberflächenepithels der Eierstöcke als Plattform zur Untersuchung der Geweberegeneration

Dieses Protokoll beschreibt die Entwicklung von hochgradigen serösen Ovarialkarzinom-Mausmodellen (HGSOC) in vitro und in vivo. Von der Gewinnung von murinen Eileiter-Organoiden über ihre genetische Modifikation zur Rekapitulation der menschlichen HGSOC-Genetik bis hin zu ihrer Einführung in den Eierstockschleimbeutel syngener Mäuse für die in vivo-Entwicklung von Tumoren.

Entwicklung von mausabgeleiteten Organoidlinien aus Epithelzellen des Eileiters für die Modellierung des hochgradigen serösen Ovarialkarzinoms

Wir beschreiben Methoden zur Kultivierung von Ovarialfollikeln in einer neuartigen gerüstfreien Agaroseform, die die in vitro Gametogenese ergänzen.

Herstellung und Verwendung von anpassbaren Agaroseformen für die gerüstfreie Ovarialfollikelkultur von Mäusen

Northwestern University, Chicago.  Wir beschreiben Methoden zur Isolierung somatischer maus-ovarialer Zellen aus einem stroma-angereicherten Anteil des Eierstocks und zur Erzeugung maus-ovarialer somatischer Organoide mittels eines gerüstfreien Ansatzes.

Untersuchung des Ovarialmikroumfelds: Methoden zur Isolierung, 2D-Kultur und organoiden Kultur somatischer Maus-Ovarialzellen

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