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</ol>

<table><tbody><tr><td>16 gauge 1,5" Nadel</td><td>Stellar Scientific</td><td>SOLM-111615</td><td></td></tr><tr><td>3-Wege-Hahn, steril</td><td>Cole-Parmer</td><td>UX-48523-28</td><td></td></tr><tr><td>20ml Luer-Lock-Spritze</td><td>Becton Dickenson</td><td>302830</td><td></td></tr><tr><td>25ml steril serologische Pipette</td><td>Stellar Scientific</td><td>TC50-TAU-25</td><td></td></tr><tr><td>25mm Spritzenfilter, steril</td><td>Thomas Scientific</td><td>1162B74</td><td></td></tr><tr><td>38 mm Reservoir-Kappe</td><td>FiberCell Systems&nbsp;</td><td>A1006</td><td></td></tr><tr><td>50 ml Konische Zentrifugenrohr</td><td>Stellar Scientific</td><td>T50-101-PK</td><td></td></tr><tr><td>500 ml Dulbecco's Phosphat-Puffer-Salinel'oe sung</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>D8537-500ML</td><td></td></tr><tr><td>CVS Sterile Alkohol-Präparationspads, 480 CT</td><td>CVS Pharmacy</td><td>Artikel-Nr. 376560</td><td></td></tr><tr><td>Hohlfaser-Bioreaktor</td><td>FiberCell Systems</td><td>C2011</td><td></td></tr><tr><td>Human Fibronektin, 1 mg</td><td>Corning</td><td>354008</td><td></td></tr></tbody></table>

großangelegte produktion extrazellulärer vesikel aus hochdichten 3d-zellkulturen in hohlfaserperfusions-bioreaktoren

Large-Scale Production of Extracellular Vesicles from High-Density 3D Cell Cultures in Hollow Fiber Perfusion Bioreactors

Großangelegte Produktion extrazellulärer Vesikel aus hochdichten 3D-Zellkulturen in Hohlfaserperfusions-Bioreaktoren

Progress in the field of exosome research is hindered by the small cell numbers and low productivity of secreted exosomes in traditional 2-D cell culture. ...

large-scale-production-extracellular-vesicles-from-high-density-3d

Research

Forschung

JoVE Journal

Bioengineering

Biotechnik

In der Vergangenheit haben viele in-vitro-Kultur-Systeme - vor allem Monolayerkulturen - oft den Nachteil erlitten, dass differenzierte primären Zellen eine relativ kurze Lebensdauer hatten und während der Kultur de-differenziert. Als Folge davon wurden die meisten ihrer organ-spezifischen Funktionen verloren schnell. So, um bessere Bedingungen für diese Zellen in vitro zu vervielfältigen, haben Änderungen und Anpassungen zu herkömmlichen Monolayerkulturen worden.

Interview: Bioreaktoren und Aufgetaucht-Modified 3D-Gerüste für Stammzellforschung

Das funktionale Verhalten der Zellen in Kultur können -ähnlichen 3-dimensional Kulturumgebungen 16-21 in mehr in vivo durch Züchten verbessert werden. Dieses Manuskript beschreibt den Aufbau und den Betrieb eines Hohlfaser - Bioreaktor - System für In - vivo - -ähnlichen Säugetiergewebekultur.

Hohlfaser-Bioreaktoren für<em&gt; In Vivo</em&gt; -ähnlichen Mammalian Gewebekultur

Das Protokoll beschreibt, wie ein perfusable Kreislauf Netzwerk in ein Sphäroid zu konstruieren. Das Sphäroid umliegenden Mikroumgebung ist entworfen, um induzieren Angiogenese und der Sphäroid an die Mikrokanäle in einem mikrofluidischen Gerät anschließen. Die Methode erlaubt die Perfusion der Sphäroid, das eine lang ersehnte Technik in dreidimensionale Kulturen ist.

Perfusable vaskuläre Netzwerk mit einem Gewebe-Modell in einem mikrofluidischen Gerät

Das Ziel dieses Protokolls ist Produktion der gesamten extrazelluläre Matrix Fasern für Wunde Reparatur gezielt die für präklinische Evaluierung im Rahmen eines Implantates, regenerative Gerüst geeignet sind. Diese Fasern hergestellt durch die Kultur der Fibroblasten auf Hohlfaser-Membranen und durch Auflösung der Membranen extrahiert.

Produktion von Fasern der extrazellulären Matrix über Opfer Hohlfaser-Membran Zellkultur

Dieses Protokoll zeigt Methoden, um eine erweiterte In-vitro-Kultur von patientenabgeleiteten Xenografts (PDX) zu ermöglichen. Ein Schritt verbessert die Gesamtlebensfähigkeit von mehrzelligen Clusterkulturen in 3D-Hydrogelen durch die einfache Entfernung nicht lebensfähiger Einzelzellen. Ein sekundärer Schritt veranschaulicht Best Practices für PDX-Kultur in einer durchsetzten mikrofluidischen Plattform.

Verbesserte Lebensfähigkeit für Ex vivo 3D Hydrogelkulturen von patientenabgeleiteten Xenografts in einer perfused Microfluidic Platform

Hier präsentieren wir ein Protokoll zur Herstellung einer großen Anzahl von GMP-konformen Exosomen aus mesenchymalen Stammzellen der Synovialflüssigkeit unter Verwendung eines 3D-Bioreaktors.

Großtechnische Herstellung von Exosomen aus der Synovialflüssigkeit mesenchymaler Stammzellen durch 3D-Bioreaktorkultur

Dieses Protokoll beschreibt ein Verfahren zur Herstellung von drei verschiedenen Arten von Sphäroiden in einer Weise, die sie für ein groß angelegtes High-Content-Screening und -Analyse geeignet macht. Darüber hinaus werden Beispiele vorgestellt, die zeigen, wie sie auf Sphäroid- und Einzelzellebene analysiert werden können.

Eine robuste Methode für die großtechnische Produktion von Sphäroiden für High-Content-Screening- und Analyseanwendungen

Dieses Papier stellt eine Methode zum Aufbau und Betrieb eines kostengünstigen, mehrkanaligen Perfusionszellkultursystems zur Messung der Dynamik der Sekretions- und Absorptionsraten von gelösten Stoffen in zellulären Prozessen vor. Das System kann Zellen auch dynamischen Reizprofilen aussetzen.

Multi-Stream-Perfusionsbioreaktor integriert mit Auslassfraktionierung für dynamische Zellkultur

Dieses Protokoll stellt den Aufbau und Betrieb eines neu entwickelten, 3D-gedruckten Bioreaktors für die ex vivo Kultur von Blutgefäßen in Perfusion vor. Das System ist so konzipiert, dass es leicht von anderen Benutzern übernommen werden kann, praktisch, erschwinglich und an verschiedene experimentelle Anwendungen wie grundlegende biologische und pharmakologische Studien anpassbar ist.

Ex Vivo Perfusionskultur großer Blutgefäße in einem 3D-gedruckten Bioreaktor

Hier stellen wir ein Protokoll vor, um die Herstellung von adhärenten Zellen in großem Maßstab durch ein vollständig geschlossenes System auf der Basis von auflösbaren Mikroträgern in GMP-Qualität zu erreichen. Die Kultivierung von humanen mesenchymalen Stammzellen, HEK293T Zellen und Vero-Zellen wurde validiert und erfüllte sowohl die Quantitätsanforderungen als auch die Qualitätskriterien für die Zell- und Gentherapieindustrie.

Großtechnische Zellproduktion auf Basis von auflösbaren porösen Mikroträgern in GMP-Qualität

Extrazelluläre Vesikel sind für biomedizinische Anwendungen sehr vielversprechend, aber die derzeitigen Isolierungsmethoden sind zeitaufwändig und für den klinischen Einsatz unpraktisch. In dieser Studie stellen wir ein mikrofluidisches Gerät vor, das die direkte Isolierung extrazellulärer Vesikel aus großen Mengen von Bioflüssigkeiten in einer kontinuierlichen Weise mit minimalen Schritten ermöglicht.

Einstufige Isolierung extrazellulärer Vesikel aus großvolumigen Proben mit einem gegabelten mikrofluidischen A4F-Gerät

FiberCell Systems Inc..  Es werden Anweisungen zur Einrichtung und Nutzung eines 3D-Perfusions-Hohlfaser-Bioreaktors zur Produktion von extrazellulären Vesikeln aus MSC und anderen Zelltypen bereitgestellt. Dieses Protokoll beschreibt eine Methode, um extrazelluläre Vesikel in hohen Konzentrationen kontinuierlich zu erzeugen und dabei die Zelldichte in hohlen Faser-Bioreaktoren zu kontrollieren.

Großangelegte Produktion extrazellulärer Vesikel aus hochdichten 3D-Zellkulturen in Hohlfaserperfusions-Bioreaktoren

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