12.12
Los detergentes contienen grupos de cabeza hidrofílicos y colas hidrofóbicas, que les permiten formar micelas esféricas; por lo tanto, son ampliamente utilizados para purificar proteínas de membrana.
Hay tres tipos de detergentes: iónicos, no iónicos y zwitteriónicos.
Los detergentes iónicos, como el dodecil sulfato de sodio, tienen grupos principales cargados, mientras que los detergentes no iónicos, como el Triton X-100, no están cargados.
Los detergentes zwitteriónicos como CHAPS tienen grupos de cabeza con cargas positivas y negativas.
Los detergentes no iónicos y zwitteriónicos son los más utilizados para la purificación de proteínas, ya que permiten que la proteína conserve su forma funcional. Por el contrario, los detergentes iónicos pueden desnaturalizar las proteínas objetivo.
Las proteínas integrales de membrana se purifican en tres etapas distintas. En primer lugar, la micela detergente interactúa con la bicapa exterior de la membrana.
A continuación, la membrana se solubiliza, con la formación de complejos lípidos-detergente y proteínas-detergente.
Una vez retirados los detergentes, la proteína puede purificarse mediante técnicas como la cromatografía de afinidad.
Se utilizan detergentes para purificar las proteínas integrales de la membrana. La porción hidrofóbica del detergente puede reemplazar los fosfolípido…
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