Impresión por microcontacto se utiliza ampliamente a las proteínas de patrones y otras moléculas en las superficies de material. Se demuestra los pasos básicos de este proceso, los patrones de estampación de la fibronectina sobre el cristal.
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Artículo de método
Microcontacto de impresión de las proteínas de Biología Celular
En este artículo
Resumen
Resumen
Protocolo
1. Preparación de soluciones y materiales
Estos pasos deben llevarse a cabo de varios días de antelación.
- Cubreobjetos de vidrio. Cubreobjetos fueron limpiados por inmersión durante 10 minutos en una solución de detergente Linbro 7X: agua, mezclado en una relación 1: 3 relación y se calienta con agitación hasta que se aclare. Cubreobjetos se lavaron exhaustivamente con agua destilada, y luego se hornea a 450 ° C durante 6 horas. Cargando cubreobjetos en bastidores tinción de cerámica (ver reactivos) simplifica este proceso.
- Proteína solución para la estampación. Reconstituir la fibronectina siguiendo las instrucciones de los fabricantes u....
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Discusión
El proceso de impresión por microcontacto es conceptualmente simple y muy robusto, que se ha aplicado a los patrones de una amplia gama de moléculas en una variedad de sustratos. Sin embargo, este proceso sigue siendo algo de un arte. La geometría específica del modelo que se creó, la proteína a ser modelado, el peso aplicado, y el recubrimiento / sellado todas las condiciones de afectar la calidad de estampado. Por ejemplo, poco peso, aplicada a grandes rasgos, a menudo resulta en diferencias en el patrón como se puede ver en el logo super.......
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Divulgaciones
Los autores no tienen nada que revelar.
Materiales
| Nombre | Empresa | Número de catálogo | Comentarios | |
|---|---|---|---|---|
| Limpieza de plasma | Harrick Scientific Products, Inc. | PDC-32G | ||
| Desecador | Nalge Nunc international | 5315-0150 | ||
| PBS | Reactivo | Invitrogen | 10010-072 | |
| Kit de etiquetado de proteínas | Reactivo | Invitrogen | A30006 | |
| Fibronectina | Reactivo | Sigma-Aldrich | F2006 | |
| Portapocillos para tinción | Reactivo | Thomas Scientific | 8542E40 | |
| Cubreobjetos | Reactivo | Fisher Scientific | 12-544-12 | |
| Sylgard 184 | Reactivo | Ellsworth Adhesives | 184 Sil Elast Kit | |
| Rejilla de difracción | Reactivo | Edmund Scientific | 3040267 |
Referencias
- Chen, C. S. Geometric control of cell life and death. Science. 276, 1425-1425 (1997).
- Kumar, A., Whitesides, G. M. Features of Gold Having Micrometer to Centimeter Dimensions can b....
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Reimpresiones y permisos
