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Artículo de método

Implantación de la ingeniería tisular en el corazón de rata

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DOI:

10.3791/1139

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24 de junio de 2009

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En este artículo

Resumen

Aquí se describe un procedimiento de cirugía cardiaca para implantar la ingeniería tisular en el auriculoventricular (AV) con ranura de un adulto de rata Lewis.

Resumen

La cirugía de roedores es a menudo un componente importante en la evaluación de la utilidad de los tejidos de ingeniería. Una amplia variedad de procedimientos quirúrgicos pueden ser realizados en ratas o ratones de laboratorio común y estas muy a menudo sirven como un paso intermedio entre el de sobremesa experimentos y pruebas con animales grandes o los ensayos en humanos. Teniendo en cuenta que los roedores disponer de un sistema modelo establecido, rentable, y fisiológicamente relevantes en los que probar nuevas combinaciones de materiales del armazón y las células, que son especialmente adecuados para los estudios de ingeniería de tejidos cardiovasculares. En la actualidad, se describe un procedimiento quirúrgico de corazón abierto para la implantación de la ingeniería tisular con células miogénicas progenitoras en el auriculoventricular (AV) ranura de un corazón de rata. Estos implantes tienen la intención de crear un conducto eléctrico entre la aurícula y el ventrículo derecho, con el objetivo último de proporcionar un tratamiento alternativo a la implantación de un marcapasos convencional en pacientes pediátricos con bloqueo cardíaco completo [1]. La ingeniería tisular se implanta en la AV-surco por medio de una toracotomía. Para nuestros propósitos, las ratas Lewis son anestesiados y ventilados invasiva para mantener la presión positiva de aire durante el procedimiento quirúrgico estéril. El enfoque hacia el corazón se realiza una toracotomía derecha a través de una incisión antero-lateral en el 5

Protocolo

Parte 1: La inducción de la anestesia general

  1. A 200-250 g de ratas Lewis es anestesiados con 50 mg / kg de ketamina y 4 mg / kg de xilazina inyecta con una aguja de 30 G en la cavidad intraperitoneal. La parte superior del abdomen y el pecho derecho se recorta para eliminar el vello y la zona de la incisión limpiado a fondo con el 70% de etanol y una solución de yodo-povidona antiséptico tópico.
  2. El animal está intubado por vía endotraqueal utilizando un catéter de 16 G por vía intravenosa conectada a un respirador de pequeños animales (Harvard Apparatus). El respirador se conecta a un vaporizador para suministrar 0,5 a 1,0% isoflurano (Baxter), m....

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Discusión

Para obtener un resultado favorable a la intervención quirúrgica, es fundamental para intubar correctamente y invasiva ventilar el animal. Si la rata es simplemente sedado para permitir que respire de forma espontánea, los dos pulmones se derrumbará inevitablemente, mientras que el tórax se abre debido a la pleura común en roedores. Antes de cerrar el pecho, cualquier neumotórax debe ser eliminado por completo y los pulmones totalmente expandida para reducir la atelectasia. De lo contrario, el destete del respirador y l.......

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Divulgaciones

Los experimentos con animales se realizaron de acuerdo con las directrices y normas establecidas por el Cuidado de Animales institucional y el empleo en el Hospital Infantil de Boston s.

Agradecimientos

Este trabajo es apoyado por becas de investigación de los Institutos Nacionales de Salud (HL068915; HL088206) y las contribuciones al Fondo de conducción cardiaca en el Hospital de Niños de Boston.

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Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo
NombreEmpresaNúmero de catálogoComentarios
7x4 Thermo Pad 4/cajaEquipoHood Thermo-Pad, Summerland, BC CanadáMODELO 704R
Ventilador Inspira ASVEquipoHarvard Apparatus
Oxímetro de pulso portátilEquipoNellcorN20PA
RetractorEquipoRoboz Surgical Instruments Co.RS-6514
Isoflurano (Forane)ReactivoBaxter International Inc.1001936040
Clorhidrato de ketaminaReactivoHospira Inc.RL-0065
Xilazina (AnaSed)ReactivoLloyd, Inc.LB15705A
Inyección de clorhidrato de buprenorfinaReactivoBedford LaboratoriesDiv-BUP-P00
Bupivacaína 0,25 %ReactivoHospira Inc.

Referencias

  1. Choi, Y. H. Cardiac conduction through engineered tissue. Am J Pathol. 169, 72-85 (2006).
  2. Shin, J. W. Low-dose systemic bupivacaine prevents the development of allodynia after thoracotomy in rats. Anesth Analg. 107, 1587-1591 (2008).
  3. Horstick, G.

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