La disección de Saccharomyces cerevisiae Asci

Resumen

Micromanipulación de células de levadura que se necesita para el análisis genético meiótica o para seleccionar cigotos diploides. Estos micromanipulaciones se llevan a cabo con la microaguja de un microscopio de disección. La microaguja se utiliza para trasladar las células y es controlado por un micromanipulador que están disponibles con diferentes grados de automatización.

Resumen

La levadura es un sistema modelo muy manejable que se utiliza para estudiar muchos procesos celulares diferentes. La cepa de laboratorio común

Protocolo

Construcción de cepas diploides
Protocolo para la producción de diploides en el apareamiento

1. Las cepas inicial debe ser ponchado en medio YPD, o selectiva, si es necesario, para producir colonias aisladas. Las dos cepas haploides debe ser de tipo de apareamiento opuesto (es decir, Mata y MATα).
2. El uso de un asa de siembra estéril recoger una pequeña parte de una colonia de una de las dos cepas haploides. En una racha de nueva placa YPD el circuito una vez en una línea recta a través de la placa. Marca la dirección de la veta con una flecha en la parte inferior de la placa.
3. Repita esta operación para la segunda cepa de la placa de....

Discusión

Disección de la levadura es una herramienta útil para seleccionar nuevas variedades con marcadores deseado. Al determinar el patrón de crecimiento teórico de cuatro ascosporas es importante tener en cuenta el genotipo de la célula vegetativa. Si un plásmido está presente, hay que saber si es solo ejemplar, de baja o alta ya que esto afectará la que las ascosporas (s) recibe el plásmido, y afectará a las predicciones y conclusiones con respecto a las cepas siendo manipulados.

Ciertas cepas pu.......

Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo

Nombre	Empresa	Número de catálogo	Comentarios
Singer MSM System 200	Microscopio	Singer Instruments	NA
D-sorbitol	Reactivo	BioShop Canada	SOR508
Tris	Reactivo	BioShop Canada	TRS001
Zimoliasa 100T	Reactivo	Seikagaku Corporation	120493
Extracto de levadura	Reactivo	BioShop Canada	YEX401
Peptona	Reactivo	BioShop Canada	PEP 403
D-glucosa	Reactivo	BioShop Canada	GLU501
Base de nitrógeno para levadura	Reactivo	BioShop Canada	YNB406
Bio-tryptona	Reactivo	BioShop Canada	TRP402
Cloruro de sodio	Reactivo	BioShop Canada	SOD002
Acetato de potasio	Reactivo	BioShop Canada	POA 301
Agar	Reactivo	BioShop Canada	AGR003
Sulfato de adenina	Reactivo	BioShop Canada	ADS201
L-uracilo	Reactivo	BioShop Canada	URA 241
L-triptófano	Reactivo	BioShop Canada	TRP 100
L-histidina	Reactivo	BioShop Canada	HIS 200
L-arginina	Reactivo	Amresco	0877-100G
L-metionina	Reactivo	BioShop Canada	MET 222
L-tirosina	Reactivo	BioShop Canada	TYR 333
L-isoleucina	Reactivo	BioShop Canada	ISO 910
L-valina	Reactivo	BioShop Canada	VAL 201
L-lisina	Reactivo	BioShop Canada	LYS 101
L-fenilalanina	Reactivo	BioShop Canada	PHA 302
Ácido L-glutámico	Reactivo	BioShop Canada	GLU 202
L-treonina	Reactivo	BioShop Canada	THR002
L-leucina	Reactivo	BioShop Canada	LEU 222