Lisado de plaquetas humanas es una rica fuente de factores de crecimiento y un suplemento potente en cultivo celular. Este protocolo se presenta el proceso de preparación de una gran cantidad de lisado de plaquetas humanas, partiendo de plasma rico en plaquetas, la realización de varios ciclos de congelación-descongelación y el agotamiento de los fragmentos de plaquetas.
Se requiere una suscripción a JoVE para ver este contenido. Inicie sesión o comience su prueba gratuita.
Artículo de método
Preparación de combinados lisado plaquetario humano (pHPL) como un suplemento eficaz de los animales libres de suero humano culturas de células madre
En este artículo
Resumen
Resumen
Factores de crecimiento derivados de plaquetas se ha demostrado que estimulan la proliferación celular de manera eficiente
Protocolo
1. Material de partida
Comience con plasma rico en plaquetas (PRP) unidades preparadas por citaféresis o derivados de buffy abrigos.
2. Comprobar la esterilidad
Para comprobar la esterilidad tomar una muestra de 20 ml de cada unidad de PRP mediante la transferencia del volumen de una bolsa conectada pequeños (Baxter). Desconecte esta bolsa por soldadura.
3. La congelación de las unidades de PRP
Inmediatamente después de la preparación, congelación de las unidades de PRP hasta al menos -20 ° C en la bolsa de almacenamiento original....
Acceso restringido. Inicie sesión o comience una prueba gratuita para ver este contenido.
Discusión
En algunas regiones de plaquetas en plasma rico (PRP) se puede obtener a partir de buffy-coats de lo contrario ser un producto de desecho de concentrados de la producción de glóbulos rojos a partir de donaciones de sangre analizadas (Figura 1). En condiciones óptimas, PRP se utiliza inmediatamente para su posterior elaboración de pHPL, como en las plaquetas obsoletas se concentra la disponibilidad de factores de crecimiento puede ser reducida debido a las lesiones de almacenamiento de plaquetas y la degradación 20........
Acceso restringido. Inicie sesión o comience una prueba gratuita para ver este contenido.
Agradecimientos
Este trabajo ha sido financiado por el Austrian Research Foundation (FMF, la concesión N211-NAN para DS) y la Agencia de Promoción de la Investigación de Austria (FFG, otorgar N200 para DS). Los autores agradecen Url Claudia por su excelente asistencia técnica y Mónica Farrell para la edición lingüística.
....Acceso restringido. Inicie sesión o comience una prueba gratuita para ver este contenido.
Materiales
| Nombre | Empresa | Número de catálogo | Comentarios |
|---|---|---|---|
| Doble bolsa (2 x 3,5 L) | MacoPharma | VDL 8000XQ | originalmente para punción de ascitis |
| Tubo Falcon de 50 mL | Falcon BD | 2098 | |
| Probetas graduadas de 50 mL | Costar | 4501 | |
| Bolsas para plasma (600 mL) | Baxter International Inc. | R4R2021 | |
| Soldador de tubos estéril | Terumo Medical Corp. | TSCD-II | |
| Equipo de soldadura | Fresenius Kabi | Compo Seal | |
| Baño de agua | |||
| Tijeras estériles | |||
| Pinzas | |||
| Centrífuga |
Referencias
- Nurden, A. T., Nurden, P., Sanchez, M., Andia, I., Anitua, E. Platelets and wound healing. Front Biosci. 13, 3532-3548 (2008).
- Barrientos, S., Stojadinovic, O., Golinko, M. S., Brem, H., Tomic-Canic, M. Growth factors and cytokines in wound healing. Wound Repair Regen. 16, 585-601 (2008).
- Giacco, F.....
Acceso restringido. Inicie sesión o comience una prueba gratuita para ver este contenido.
Reimpresiones y permisos
