Dextran נתרן סולפט (DSS) מנוהל במי השתייה הוא מודל הוקמה Murine פגיעה דלקתית חריפה של קוליטיס. פרוטוקול זה מתאר את שיטת הטיפול DSS והכנת רקמות.
Abstract
קוליטיס יכולה להתרחש מפני זיהומים נגיפי או חיידקי, להעליב איסכמי, או הפרעות אוטואימוניות, קוליטיס כיבית ביותר בעיקר את גרסה הגס של מחלת קרוהן – קוליטיס קרוהן. קוליטיס חריפה עשויה להציג עם הכאב התנפחות הבטן, ספיגה, שלשולים, hematochezia וריר בצואה. אנו מתחילים להבין את יחסי הגומלין המורכבים בין הסביבה, גנטיקה, תפקוד מחסום האפיתל דלקתיות מחלות מעי חיה מודלים של קוליטיס כבר חיוני בקידום ההבנה שלנו של מחלה זו. אחת מודל פופולרי כרוך להשלים את מי השתייה של העכברים עם סולפט dextran משקל מולקולרי נמוך נתרן (DSS), וכתוצאה מכך לנזק אפיתל תגובה דלקתית חזקה במעי הגס שנמשכה כמה ימים<sup> 1</sup>. וריאציות של גישה זו יכולה לשמש מודל פגיעה חמורה, פגיעה חריפה בעקבות התיקון, מחזורים חוזרים ונשנים של DSS וביניהם התאוששות דוגמנות מחלות דלקתיות כרוניות<sup> 2</sup>. לאחר טיפול של ארבעה ימים אחת של DSS 3% במי שתייה, עכברים להראות סימנים של דלקת חריפה כולל ירידה במשקל, צואה דמית, שלשול. עכברים מומתים בסיומו של מהלך הטיפול בכל נקודתיים גזור necropsy מעובדים יכול להיות "שוויצרי התגלגל"<sup> 3</sup> כדי לאפשר ניתוח מיקרוסקופי של המעי הגס כולו או רווי פורמלין כמו "נקניקיות" כדי לאפשר ניתוח מאקרוסקופיים. רקמות מוטבע אז פרפין, מחולק, ומוכתמת לבדיקה היסטולוגית.
Protocol
חלק 1: פציעה, תיקון דגם קוליטיס משקל Baseline יש לקבל עבור כל עכבר לפני תחילת הטיפול DSS. בצע 3% (w / v) נתרן סולפט dextran מלח פתרון במים ולסנן עם מסנן 0.45 מיקרומטר אצטט תאית. החל?…
Discussion
פרוטוקול זה יכול להיות שונה למודל פגיעה חריפה, פגיעה לתקן או פציעה כרונית תהליכים הגס.
פגיעה חריפה שינוי:
מודעה DSS טיפול lib עבור 4-6 ימים ואחריו להקריב מיידית
פ…
Divulgaciones
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
המימון הניתנים על ידי NIH (1 DK080221 K08-01) וקרנות ונדרבילט פיתוח מוסדיים.
Whittem, C. G., Williams, A. D., Williams, C. S. Murine Colitis Modeling using Dextran Sulfate Sodium (DSS). J. Vis. Exp. (35), e1652, doi:10.3791/1652 (2010).