Method Article

Modelagem Colite murino utilizando Dextran Sulfato de Sódio (DSS)

DOI:

10.3791/1652

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January 19th, 2010

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1Department of Cancer Biology, Vanderbilt University, 2Departments of Medicine and Cancer Biology, Vanderbilt University

In This Article

Summary

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Dextran sulfato de sódio (DSS), administrada na água de beber é um modelo de lesão inflamatória estabelecida murino de colite aguda. Este protocolo descreve o método para o tratamento DSS ea preparação dos tecidos.

Abstract

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Colite pode ocorrer por infecções virais ou bacterianas, insulto isquêmico, ou doenças auto-imunes; Colite Ulcerativa e mais notadamente a variante do cólon da doença de Crohn - Colite de Crohn. Colite aguda podem apresentar dor abdominal e distensão, má absorção, diarréia, hematoquezia e muco nas fezes. Estamos começando a entender as complexas interações entre o meio ambiente, genética e disfunção da barreira epitelial em modelos de doença inflamatória intestinal e animal de colite têm sido essenciais para fazer avançar a nossa compreensão da doença. Um modelo popular envolve completando a água potável de camundongos com sulfato de baixo peso molecular de sódio Dextran (DSS), resultando em danos epiteliais e uma resposta robusta inflamatória no cólon de vários dias

Protocol

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Parte 1: Lesão Modelo de Colite

  1. Peso inicial deve ser obtido para cada rato antes do início do tratamento DSS.
  2. Fazer uma de 3% (w / v) Sulfato de Dextran solução de sal de sódio em água e filtrar com um filtro de 0,45 mM de acetato de celulose.
  3. Substituir a água potável na gaiola do rato com a solução DSS 3% por quatro dias. Os ratos não devem ter acesso a qualquer outra fonte de água (ou seja, a exclusão dicas colocados em sistemas de rega automática).
  4. No dia quatro, substitua a solução DSS com água por mais três dias, permitindo alguma recuperação do cólon epiteliais. Os ratos devem ser pesados ​​no dia quatro, a fim de quan....

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Discussion

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Este protocolo pode ser modificado para modelo de lesão aguda, lesão de reparação, ou crônica processos de lesão do cólon.

Modificação lesão aguda:

DSS ad lib tratamento para 4-6 dias, seguido pelo sacrifício imediato

Lesão-Modificação:

Lesões com 4-6 dias de tratamento DSS seguido por período de recuperação de 3-4 dias e sacrifício (como descrito no protocolo acima).

Modificação colite.......

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Disclosures

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Experimentos em animais foram realizados de acordo com as diretrizes e regulamentos estabelecidos pela Vanderbilt IACUC.

Acknowledgements

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Financiamento fornecido pelo NIH (1 K08 DK080221-01) e fundos de desenvolvimento institucional Vanderbilt.

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Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
Sal de sódio de sulfato de dextranoUSB Corp., Affymetrix9011-18-1mol wt 40,000-50,000
10% tamponado fosfato de formalinaFisher ScientificSF100-4
Isoflurano, USPPhoenix Pharmaceuticals, Inc.NDC 57319-474-06
TISSUE PATH de MacrosetteFisher Scientific15182706
BD Seringa de 10 mlBD Biosciences309604
Álcool EtílicoPharmco-AAPERE190Diluir a 70% com água destilada
Agulha de alimentação reta 20GVWR international20068-612
27G1/2 Agulha PrecisionGlideBD Biosciences305109
Tesoura de Dissecação Ponta Afiada/RombaVWR international82027-588
Waugh ForcepsVWR international82027-428
Sutura não absorvível LOOK SurgicalSP116
Papel absorvente WhatmanVWR international28298-020Corte conforme necessário
Sem surfactante Nalgene Filtro de acetato de celulose (SFCA)Cole-ParmerEW-06731-2
Composto de fibra de carbono paquímetro digitalFisher Scientific15-007-958

References

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Okayasu, I. A novel method in the induction of reliable experimental acute and chronic ulcerative colitis in mice. Gastroenterology. 98 (3), 694-702 (1990).
  2. Martinez, J. A. Deletion of Mtgr1 sensitizes the colonic e....

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Dextran Sulfate SodiumMurine Colitis ModelColon HarvestingSwiss Roll TechniqueSausage PreparationFormalin FixationParaffin EmbeddingHistologic AnalysisMacroscopic AnalysisWeight Loss Measurement

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