Dextran sulfate de sodium (DSS) administré dans l'eau potable est un modèle murin établie blessures inflammatoires de colite aiguë. Ce protocole décrit la méthode pour le traitement de DSS et la préparation des tissus.
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Article de méthode
Modélisation colite murin en utilisant du sulfate de sodium Dextran (DSS)
Dans cet article
Résumé
Résumé
Colite peuvent survenir des infections virales ou bactériennes, ischémique ou de troubles auto-immunes; colite ulcéreuse et plus particulièrement la variante du côlon de la maladie de Crohn - maladie de Crohn. La colite aiguë peuvent présenter des douleurs abdominales et une distension, une malabsorption, diarrhée, rectorragies et de mucus dans les selles. Nous commençons à comprendre les interactions complexes entre l'environnement, la génétique et le dysfonctionnement de la barrière épithéliale inflammatoire modèles de maladies animales et l'intestin de colite ont été essentielles pour faire progresser notre compréhension de cette maladie. Un modèle populaire implique complétant l'eau potable des souris du sulfate de sodium à faible poids moléculaire Dextran (DSS), entraînant des dommages épithéliaux et une réponse robuste inflammatoires dans le côlon de plusieurs jours
Protocole
Partie 1: modèle de colite blessures-Réparation
- Poids à l'inclusion devrait être obtenue pour chaque souris avant de commencer le traitement du MAS.
- Faites un 3% (p / v) Sulfate de Dextran Sodium solution de sel dans l'eau et le filtre avec un filtre de 0,45 um d'acétate de cellulose.
- Remplacer l'eau potable dans la cage de la souris avec la solution DSS 3% pendant quatre jours. Les souris ne devraient pas avoir accès à toute autre source d'eau (à savoir l'exclusion des conseils mis sur les systèmes d'arrosage automatique).
- Le quatrième jour, remplacer la solution SSD avec de l'eau pour une période supplémentaire de trois jour....
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Discussion
Ce protocole peut être modifié pour modèle de lésion aiguë, blessure-réparation, ou chronique du côlon processus blessures.
Modification des traumatismes aigus:
Lib DSS ad traitement pendant 4-6 jours, suivie par le sacrifice immédiat
Blessure-Réparation de modification:
Blessure avec 4-6 jours de traitement DSS suivie par la période de récupération de 3-4 jours et le sacrifice (comme décrit dans le protocole ci.......
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Déclarations de divulgation
Expériences sur les animaux ont été effectuées en conformité avec les directives et les règlements stipulés par Vanderbilt IACUC.
Remerciements
Le financement accordé par le NIH (1 K08 DK080221-01) et les fonds de développement institutionnel Vanderbilt.
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Matériaux
| Nom | Entreprise | Numéro de catalogue | Commentaires |
|---|---|---|---|
| Sulfate de dextrane, sel sodique | USB Corp., Affymetrix | 9011-18-1 | masse moléculaire 40 000-50 000 |
| Formol tamponné à 10 %, phosphate | Fisher Scientific | SF100-4 | |
| Isoflurane, USP | Phoenix Pharmaceuticals, Inc. | NDC 57319-474-06 | |
| Cassettes TISSUE PATH Macrosette | Fisher Scientific | 15182706 | |
| Seringue BD de 10 ml | BD Biosciences | 309604 | |
| Alcool éthylique | Pharmco-AAPER | E190 | Diluer à 70 % avec de l'eau distillée |
| Aiguille droite de 20G pour alimentation | VWR international | 20068-612 | |
| Aiguille PrecisionGlide 27G1/2 | BD Biosciences | 305109 | |
| Ciseaux de dissection à extrémité pointue/émoussée | VWR international | 82027-588 | |
| Pinces de Waugh | VWR international | 82027-428 | |
| Fil de suture non absorbable | LOOK Surgical | SP116 | |
| Papier buvard Whatman | VWR international | 28298-020 | Couper selon les besoins |
| Filtre en acétate de cellulose sans surfactant (SFCA), Nalgene | Cole-Parmer | EW-06731-2 | |
| Pièce à main numérique en composite de fibres de carbone | Fisher Scientific | 15-007-958 |
Références
- Okayasu, I. A novel method in the induction of reliable experimental acute and chronic ulcerative colitis in mice. Gastroenterology. 98 (3), 694-702 (1990).
- Martinez, J. A. Deletion of Mtgr1 sensitizes the colonic e....
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Réimpressions et autorisations
