Una demostración del aislamiento de la médula espinal de ratón neonatal para los estudios electrofisiológicos.
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Artículo de método
La médula espinal de Electrofisiología
En este artículo
Resumen
Resumen
El cordón espinal de ratón recién nacido es un modelo para estudiar el desarrollo de circuitos neuronales y el movimiento del aparato locomotor. Nos demuestran que la disección de la médula espinal y la preparación del baño de grabación de líquido cefalorraquídeo artificial utilizado para estudios del aparato locomotor. Una vez disecado, las raíces nerviosas de la médula espinal ventral puede ser conectado a un electrodo de registro para registrar las señales electrofisiológicas de los circuitos generadores de patrones centrales dentro de la médula lumbar.
Protocolo
1. Prepare líquido cefalorraquídeo artificial (ACSF) 1. En primer lugar, preparar un 2 litros de un depósito de 10 veces LCRa sin magnesio o calcio. Reactivos enumerados en milimolar. Los números de catálogo se refieren a Sigma / Aldrich.
| 2 Litros 10X LCRa (sin Mg o Ca) | |||
| Reactivo | mM | g/2L | Catálogo |
| KCl | 40 | 5.96 | P-9333 |
| NaCl | 1280 | 149,61 | S-7653 |
| NaHCO3 | 210 | 35.28 | .... |
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Discusión
El aislado de la médula espinal neonatal proporciona un método manejable de estudiar el sistema nervioso desarrollo1, 2. Dentro de la médula lumbar espinal de roedores recién nacidos, los circuitos centrales de generación de patrones puede producir locomoción ficticia en la presencia de neurotransmisores. Esta locomoción ficticia consiste en aumentos de ritmo en la actividad, las explosiones, que se producen en el 0,2 a 0,5 Hz. Estas explosiones se organizan para producir la alternancia izquierda-derecha a lo largo de l.......
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Divulgaciones
Cuidado de los Animales
Los experimentos en animales se realizaron de acuerdo con las directrices y normas establecidas por el Instituto Salk para Estudios Biológicos AIACUC.
Los experimentos en animales se realizaron de acuerdo con las directrices y normas establecidas por el Instituto Salk para Estudios Biológicos AIACUC.
Agradecimientos
Samuel L. Pfaff es profesor en el Laboratorio de Expresión Génica en el Instituto Salk de Estudios Biológicos y un investigador en el Instituto Médico Howard Hughes. Este trabajo fue apoyado por el Christopher y Dana Reeve Foundation. Joe Belcovson, Schnoeker Kent y Mike Sullivan en Recursos Multimedia en el Instituto Salk proporcionó asistencia con la fotografía y la edición.
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Materiales
| Nombre | Empresa | Número de catálogo | Comentarios |
|---|---|---|---|
| KCl | P-9333 | ||
| NaCl | S-7653 | ||
| NaHCO3 | S-6297 | ||
| NaH2PO4 | S-9638 | ||
| Glucosa | D-9434 | ||
| CaCl2 | C-5080 | ||
| MgSO4 | M-5921 | ||
| Tijeras grandes | Fine Science Tools | 14070-12 | |
| Pinzas | Fine Science Tools | 11050-10 | |
| Tijeras finas | Fine Science Tools | 15000-10 | |
| Alfileres para insectos | Fine Science Tools | 26002-10 | |
| Sylgard 184 (Dow-Corning) | |||
| Matraz aforado de 1 L | |||
| Matraz aforado de 100 mL |
Referencias
- Myers, C. P. Cholinergic input is required during embryonic development to mediate proper assembly of spinal locomotor circuits. Neuron. 46, 37-49 (2005).
- Goulding, M., Pfaff, S. L. Development of circuits that generate simp....
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Reimpresiones y permisos
