Este vídeo muestra cómo obtener hemocitos (células sanguíneas) de la hawaiana calamar bobtail, Euprymna scolopes Para su uso en ensayos de adhesión celular biológica y bacteriana. Hemocitos se tiñen con un colorante fluorescente y se expone a las buenas prácticas agrarias con etiqueta bacterias.
Se requiere una suscripción a JoVE para ver este contenido. Inicie sesión o comience su prueba gratuita.
Artículo de método
La obtención de hemocitos de la hawaiana Squid Bobtail Euprymna scolopes Y la observación de su adhesión a las bacterias simbióticas y no simbióticas-
En este artículo
Resumen
Resumen
Estudios sobre el papel del sistema inmune en la mediación de señalización molecular entre bacterias beneficiosas y sus anfitriones tienen, en los últimos años, hizo importantes contribuciones a nuestra comprensión de la co-evolución de los eucariotas con la microbiota presente. La asociación simbiótica entre el hawaiano calamar bobtail,
Protocolo
- Preparar 500 mL de 0,22 micras, esterilizada por filtración de agua de mar artificial (FSW, la salinidad de 35 ppt). Filtro de agua de mar artificial o natural a través de un filtro de 0,22 micrones micras para eliminar las partículas y bacterias.
- Anestesiar a un adulto de Hawai bobtail calamar (Euprymna scolopes) mediante la colocación de una solución al 2% de etanol en agua de mar. Colocar el animal en la anestesia por aproximadamente 10 minutos. El calamar dejará de nadar y no responden activamente al tacto. La respiración continua, indicado por el movimiento del manto, y la actividad de los cromatóforos aún deben ser observados.
- Colocar los calamares....
Acceso restringido. Inicie sesión o comience una prueba gratuita para ver este contenido.
Discusión
Estudios sobre el papel del sistema inmune en la mediación de señalización molecular entre bacterias beneficiosas y sus anfitriones tienen, en los últimos años, hizo importantes contribuciones a nuestra comprensión de la co-evolución de los eucariotas con la microbiota presente. El sistema de squid / vibrio ha demostrado ser un sistema modelo manejable para responder preguntas fundamentales en este campo 2,3,5,6,8. La luz de los órganos del calamar scolopes Euprymna permite la colonización exclusivam.......
Acceso restringido. Inicie sesión o comience una prueba gratuita para ver este contenido.
Agradecimientos
Fuentes de financiación: Universidad de Connecticut, Fundación para la Investigación y el Departamento de Biología Molecular y Celular de SVN, Sigma Xi Grant-in-Ayuda de Investigación y Antonio H. y R. Majorie
Romano de Educación para Graduados de Becas para AJC
Acceso restringido. Inicie sesión o comience una prueba gratuita para ver este contenido.
Materiales
| Nombre | Empresa | Número de catálogo | Comentarios |
|---|---|---|---|
| Sistema de cubreobjetos de borosilicato nº 1.0 con cámara (8 cámaras) | Thermo Fisher Scientific, Inc. | 155411 | |
| Jeringa de insulina de 1 ml sin látex, calibre 26,5 G | BD Biosciences | C34551 | |
| Cell Tracker Orange | Invitrogen | C34551 | |
| Microscopio SteREO Discovery V20 | Carl Zeiss, Inc. | ||
| Microscopio confocal SP2 | Leica Microsystems |
Referencias
- Koropatnick, T. A., Kimbell, J. R., McFall-Ngai, M. J. Responses of host hemocytes during the initiation of the squid-Vibrio symbiosis. Biol. Bull. 212, 29-39 (2007).
- McFall-Ngai, M. J. Unseen forces: the influence of bacteria on animal development. Dev. Biol.
Acceso restringido. Inicie sesión o comience una prueba gratuita para ver este contenido.
Reimpresiones y permisos
