Montaje de cerebros adultos de Drosophila: un método para preparar portaobjetos para la obtención de imágenes confocales

En este artículo

Resumen

Fuente: Kelly, S. M., et al. Disección y tinción inmunofluorescente de neuronas fotorreceptoras y cuerpo de hongo en cerebros adultos de Drosophila melanogaster. J. Vis. Exp. (2017).

Este video describe un método para montar cerebros intactos de moscas adultas debajo de un portaobjetos de puente y muestra el protocolo realizado en cerebros inmunoteñidos para microscopía fluorescente.

Protocolo

Este protocolo es un extracto de Kelly et al., Disección y tinción inmunofluorescente de neuronas fotorreceptoras y cuerpo de hongo en cerebros adultos de Drosophila melanogaster, J. Vis. Exp. (2017).

1. Montaje de cerebros adultos de D. melanogaster en portaobjetos de microscopio e imágenes

Construye un tobogán de "puente". Coloque dos cubreobjetos "base" a una distancia aproximada de 1 cm en un portaobjetos cargado positivamente. Asegúrese de que el lado cargado positivamente de la guía esté hacia arriba. Adherir los cubreobjetos al portaobjetos con esmalte de uñas como se muestra en

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Resultados

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Figura 1: Montaje de cerebros en preparación para la obtención de imágenes de inmunofluorescencia. (A) Los cerebros están montados en portaobjetos SuperFrost Plus con una cubierta de puente para evitar el aplanamiento de los cerebros. Dos cubreobjetos "base" se adhieren a un portaobjetos Superfrost Plus cargado positivamente con esmalte de uñas transparente y luego se colocan cerebros diseccionados en el.......