C. elegans Seguimiento del movimiento: un método para evaluar la locomoción en gusanos

Resumen

Fuente: Davies, A. G. et al. Un ensayo para medir los efectos del etanol en la velocidad de locomoción de Caenorhabditis elegans.J. Vis. Exp.(2015).

Este video describe el uso de software de video y seguimiento para registrar el movimiento de los gusanos en una arena. El protocolo de ejemplo mide el efecto de la exposición al etanol en la locomoción de los gusanos.

Protocolo

El siguiente protocolo es un extracto de Davies et al, Un ensayo para medir los efectos del etanol en la velocidad de locomoción de Caenorhabditis elegans, J. Vis. Exp. (2015).

1. Pasos a realizar el día antes del ensayo

   1. Escoja los gusanos de la etapa L4 en placas frescas de medio de crecimiento de nematodos (NGM) sembradas con un césped de E. coli OP50 y cultívelos a 20 °C O/N. Cada condición de ensayo requiere 10 gusanos; elija un exceso de lombrices para pe....

Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo

Nombre	Empresa	Número de catálogo	Comentarios
C. elegans strain	Centro de Genética de Caenorhabditis
60 x 15 mm Placas de Petri, triple ventilación	Greiner Bio-One	628161	Otras marcas de placas serán suficientes.
NGM agar	varios		NaCl (3 g/L), agar (17 g/L), peptona (2,5 g/L), 1 ml de colesterol (5 mg/ml en etanol), 1 ml (1 M) de MgSO4, 1 ml (1 M) de CaCl2, 25 ml (1 M) de KPO4, pH=6, 975 ml de H2O
Pinzas	varios		por ejemplo, Fisher Scientific #10300
37 °C Incubadora	varios		Para el secado de agar
Anillos de cobre	Maestro de plomo	STK#35583 (junta de rosca de 48 tapas)	Anillos de cobre de 1,6 cm de diámetro interior, 1,8 cm de diámetro exterior
100% etanol	varios
Parafilm M	Bemis	PM996
Cámara CCD	QImaging	RET-4000R-F-M-12	Esta cámara tiene un gran campo de visión.
Microscopio estereoscópico con montura C y objetivo 0.5X	Leica	MZ6	Modelo descontinuado, M60 es el equivalente actual.
Fuente de luz	Schott	A08923	Retroiluminación de 3"x3" para una iluminación uniforme en todo el campo de visión
Software de imagen y seguimiento	Cibernética de los medios de comunicación	ImagePro-Plus v6.0-6.3	Las versiones más recientes del software tienen funciones de seguimiento.