Inyección de venas de cola: un método para administrar células cancerosas para estudios metastásicos en un modelo de ratón

Resumen

Fuente: Warren et. al., Uso combinado de ensayos de metástasis de venas de cola e imágenes in vivo en tiempo real para cuantificar la colonización metastásica del cáncer de mama y la carga en los pulmones. J. Vis. Exp. (2019).

Este video describe una técnica de inyección de células cancerosas marcadas mediante inyección de venas de cola en un modelo de ratón. Además, monitorizamos la formación y el crecimiento del cáncer de mama mediante imágenes de animales vivos in vivo en tiempo real.

Protocolo

1. Inyección en la vena de cola de células cancerosas marcadas

NOTA: El paso 1.2.4 se ha optimizado para células 4T1 que crecen en ratones BALB/c singénicos. Si se utilizan otras líneas celulares cancerosas y cepas de ratones, primero se debe optimizar el número de células inyectadas y la duración del ensayo.

1. Expanda las líneas celulares 4T1 generadas en el paso 2 en dos placas de 15 cm en un medio de crecimiento completo para que las células sobrantes estén disponibles el día de la inyección.
2. Prepare las células para la inyección de la vena de cola de la siguiente manera:
   1. Aspire el medio y....

Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo

Nombre	Empresa	Número de catálogo	Comentarios
2.5% Tripsina	Gibco	15090-046	Tripsina para el cultivo de tejidos
Toallitas con alcohol			Para esterilizar el lugar de la inyección antes de las inyecciones de las venas de cola
Ratones BALB/C (hembras, 6 semanas)	Taconic	BALB-F	Para la colonización metastásica de la vena de cola y los ensayos de carga
Dulbecco&39; S solución salina tamponada con fosfato	Himedia	TS1006
EDTA	VWR	97061-406	Se utiliza para diluir la tripsina para el cultivo de tejidos
FBS 100% de origen estadounidense	VWR	97068-085	Componente de los medios de crecimiento completos
L-Glutamina	Gibco	25030-081	Componente de los medios de crecimiento completos
Células de cáncer de mama de ratón, 4T1	Instituto Oncológico Karmanos	Aslakson, CJ et al.,1992	Línea celular de cáncer mamario metastásico en ratón
Penicilina Estreptomicina	Gibco	Números 15140-122	Componente de los medios de crecimiento completos