La inducción de la hipofisitis autoinmune experimental en ratones SJL

Resumen

Este video muestra la forma de inducir hipofisitis autoinmune en ratones SJL y la forma de evaluar su gravedad por la histopatología.

Resumen

Hipofisitis autoinmune se puede reproducir experimentalmente mediante la inyección de proteínas de la hipófisis se mezcla con un adyuvante en ratones susceptibles ^1. Los modelos de ratón nos permitirá estudiar cómo se desarrollan las enfermedades, a menudo proporciona una buena réplica de los mismos procesos que ocurren en los seres humanos. Para algunas enfermedades autoinmunes, como la diabetes tipo 1A, hay modelos (el ratón NOD), que desarrollan espontáneamente una enfermedad similar a la contraparte humana. Para muchas otras enfermedades autoinmunes, sin embargo, el modelo necesita ser inducida experimentalmente. Un enfoque común a este respecto consiste en inyectar el ratón con un antígeno dominante derivada de la del órgano estudiado. Por ejemplo, los investigadores interesados ​​en la tiroiditis autoinmune inyectar ratones con tiroglobulina ^2, y aquellos interesados ​​en la miastenia gravis inyectarles el receptor de acetilcolina ^3. Si el autoantígeno para una enfermedad autoinmune en particular no se conoce, los investigadores inyectan un extracto de proteína cruda del órgano blanco de la reacción autoinmune. Para hipofisitis autoinmune, el autoantígeno patógenos (s) aún no se han identificado ^4, y por lo tanto una preparación de proteína cruda pituitaria se utiliza. En este artículo de vídeo se demuestra cómo inducir hipofisitis autoinmune experimental en ratones SJL.

Protocolo

Protocolo experimental

Una vez que el inmunógeno pituitaria está preparado (véase el artículo del compañero), se inyecta por vía subcutánea en ratones SJL (de los Laboratorios Jackson, las acciones de 000.686). Una inyección de idéntica se repite 7 días después. Los ratones se utilizan para recoger en vivo y los resultados post-mortem.

Paso 1. La inyección subcutánea de inmunógeno hipófisis en ratones SJL

Los ratones son los primeros anestesiados mediante la inyección de 0,5 ml de 20 mg / ml 2,2,2-tribromoetanol (Avertin, Islas Turcas y Caicos Estados Unidos, T-1420) por vía i....

Discusión

Cuatro técnicas se han reportado para inducir hipofisitis en animales de experimentación. La técnica descrita en este artículo, que es la inyección de proteínas pituitaria mezclada con adyuvante de Freund s, es la más antigua, que data de 1967 ^6, y se ha mejorado, más recientemente, ^1. Otras técnicas son la inyección de glicoproteínas solubles virus de la rubéola en 1992 ^7, la inyección estereotáxica de un adenovirus directamente en la glándula pituitaria en 2002 ^8, y el trasp.......

Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo

Nombre	Empresa	Número de catálogo	Comentarios
Ratones SJL (The Jackson Laboratories)		stock 000686
2,2,2-Tribrom–etanol (Avertin)	TCI America	T-1420
Fijador de Beckstead’s