Los tumores de vejiga se establecen en las hembras de una forma mínimamente invasiva a través de cateterismo, la cauterización local, y posterior adhesión de las células cancerosas a los sitios de quema.
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Artículo de método
Un modelo ortotópico de cáncer de vejiga murino
En este artículo
Resumen
Resumen
En este sencillo procedimiento, los tumores de vejiga se establecen en las mujeres ratones C57 a través del uso de la cateterización, la cauterización local, y la adhesión celular posterior. Después de su vejiga está transuretral sondaje y drenaje, los animales son una vez más por sondaje para permitir la inserción de un alambre de platino en la vejiga sin dañar la uretra o la vejiga. Los catéteres están hechos de teflón para servir como aislante para los cables, que conducen la corriente eléctrica en la vejiga para crear una lesión por quemadura. Una unidad de electrocauterio son utilizados para entregar 2,5 W para el extremo expuesto del cable, quemando capas extracelular y proporcionar sitios de unión de las células de carcinoma que se entregan en la suspensión de la vejiga a través de un cateterismo posterior. Las células permanecen en la vejiga durante 90 minutos, tras lo cual los catéteres se retiran y la vejiga se deja escurrir de manera natural. El desarrollo de tumor se controla a través de ultrasonido. Se presta especial atención a la técnica de cateterismo en el video que lo acompaña.
Protocolo
1. Los animales
- Ratones hembra C57BL/6J (Mus musculus) se verifican libres de ectoparásitos contagiosa, endoparásitos helmintos, y los anticuerpos a 17 virus murinos por el proveedor antes del envío. Los ratones se encuentran en las instalaciones de animales AAALAC acreditado por la Universidad de Tulane, de acuerdo con la Guía para el Cuidado y Uso de Animales de Laboratorio 1.
- En concreto, los ratones son alojados en grupo (4-5 ratones / jaula) en forma individual con ventilación tapas de policarbonato microaislamiento cageswith filtro de cama de madera dura. Se les proporciona alimentación ad libitum de roedores gr....
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Discusión
Este método mínimamente invasivo para el establecimiento de los tumores de vejiga ortotópica en ratones hembras también se puede aplicar a otros tipos de células de MB49, a pesar de los diferentes resultados se deben anticipar. Al menos agresiva células tumorales se utilizan, aumentando ligeramente la potencia (con incrementos de 0,5 W para establecer el nuevo óptimo) rendirá un área más susceptible a la conexión de las células tumorales, y los tiempos de incubación de la vejiga para que las células inculcado dará lugar.......
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Divulgaciones
Los experimentos con animales se realizaron de acuerdo con las directrices y normas establecidas por el cuidado institucional y el empleo de la Universidad de Tulane.
Agradecimientos
Este trabajo fue financiado por el premio Nacional de Ciencias CARRERA Foundation (CBET-0846395) y el Departamento de Medicina Comparada, Universidad de Tulane.
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Materiales
| Nombre | Empresa | Número de catálogo | Comentarios |
|---|---|---|---|
| Ratones C57Bl/6J | Laboratorio Jackson | 000664 | de 3 a 5 semanas de edad |
| Jaulas de policarbonato y estante ventilado | Lab Products | Super Mouse 750 | 327 mm x 190 mm x 143 mm |
| Camada de madera dura | Harlan Laboratories | SaniChips de grado para laboratorio– | |
| Dieta para roedores | Harlan Laboratories | Dieta para Roedores 2019 | |
| Catéter intravenoso | MWI Veterinary Supply | 009231 | 24 G x ¾ in. |
| Unidad de electrocoagulación | Bovie Medical Corporation | Aaron 900 | |
| Unidad de ultrasonido | Sonosite | 180 Plus (Vet) | |
| Línea celular MB49 | Centro Médico Universitario Bautista de Wake Forest | N.A. | |
| DMEM | Invitrogen | 21063-029 | |
| Suero bovino fetal | Gemini Bio Products | 100106 500A57B | |
| Penicilina-Estreptomicina | Invitrogen | 15140-163 |
Referencias
- Institute of Laboratory Animal Resources. Guide for the Care and Use of Laboratory Animals. , National Academies Press. Washington, DC. (1996).
- Gunther, J. H., Jurczok, A., Wulf, T., Brandau, S., Deinert, I., Jocham, D. Optimizing syngeneic orthotopic murine bladder cancer (MB49). Cancer Res. 59, 2834-2837 (1999).
- Zha....
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Reimpresiones y permisos
