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Muestreo de microextracción en fase sólida: una técnica basada en sondas para la extracción de muestras de tejidos de injerto

April 30th, 2023

In This Article

Abstract

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Fuente: Stryjak, I. et al. Uso de una biopsia química para la evaluación de la calidad del injerto. J. Vis. Exp. (2020)

En este video, demostramos la extracción de metabolitos basada en sondas SPME de un riñón de un donante previamente extraído. Los metabolitos extraídos se pueden utilizar para realizar análisis metabolómicos y lipidómicos con el fin de evaluar la calidad del órgano para el trasplante.

Protocol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Todos los procedimientos que involucran participantes humanos se han realizado de acuerdo con las directrices institucionales, nacionales e internacionales para el bienestar humano y han sido revisados por la junta de revisión institucional local.

1. Preparación de sondas

  1. Prepare sondas de aleación de titanio-níquel (40 mm de longitud; 0,2 mm de diámetro) recubiertas con un sorbente de modo de mezcla de 7 mm. El número de sondeos depende de los puntos de tiempo destinados durante todo el procedimiento y del número de réplicas (se recomiendan 3 por punto de tiempo).
    nota: La duración y el ....

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Disclosures

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
No se han declarado conflictos de interés.

Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
ácido acéticoMerck5330010050Aditivo de fase móvil
acetonitriloAlquimia696-34967-4X2.5LDisolvente de HPLC
Acetato de amonioMerck5330040050Aditivo de fase móvil
MEZCLADOR DE BANCO XL MULTI-TUBO VORTEXERBenchmark CientíficoBV1010Mezclador de vórtice
capsTecnologías Perlan5183-2076Azul scrw tp, PTFE/Si spta precortado, 100PK
cloroformoMerck1024441000
Cartucho Discovery HS F5 Supelguard, 3 μm, L × D.I. 2 cm × 2,1 mmMerck567570-UColumna de protección de HPLC
Discovery HS F5, 2,1 mm x 100 mm, 3 μmMerck567502-UColumna de HPLC
ácido fórmicoAlquimia497-94318-50MLAditivo de fase móvil
Viales de vidrioTecnologías Perlan5182-0714
HILIC Luna 3 μm, 200A, 100 x 2,0 mmShim-PolPHX-00D-4449-B0Columna de HPLC
Cartucho HILIC SecurityGuard, 3 μm, 4 x 2,0 mmShim-PolPHX-AJ0-8328Columna de protección de HPLC
IsopropanolAlquimia231-AL03262500Disolvente de HPLC
metanolAlquimia696-34966-4X2.5LDisolvente de HPLC
Agua nanopuraMerck1037281002Disolvente de HPLC
Q Exactive Focus híbrido cuadrupolo-Orbitrap MSTermo CientíficoQ Enfoque exactivoEspectrómetro
SeQuant ZIC-cHILIC 3μm,100Å 100 x 2.1 mmMerck1506570001Columna de HPLC
Kit de protección SeQuant ZIC-HILIC 20 x 2,1 mmMerck1504360001Columna de protección de HPLC
Sondas de fibra SPME LC, modo mixtoSupelcoFibras prototipo
Sistemas de HPLC UltiMate 3000Termo CientíficoUltiMate 3000Sistema de HPLC
Insertos de viales (desactivados)Tecnologías Perlan5181-8872
XSelect CSH C18 3.5μm 2.1x75mmaguas186005644Columna de HPLC
Cartucho XSelect CSH C18 VanGuard de 3,5 μm, 2,1 x 5 mmaguas186007811Columna de protección de HPLC

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Solid Phase MicroextractionSPME ProbeMetabolite ExtractionGraft Tissue SamplingOrgan Quality AssessmentHydroalcoholic CleaningActivation SolutionDesorption SolutionLC MS AnalysisSterile Processing

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