Modelo Murino de Obstrucción Ureteral Unilateral: Un Procedimiento Quirúrgico para Obstruir el Flujo Urinario de un Riñón en Modelos de Ratón

Resumen

Fuente: Yanai, K. et al. Evaluación cuantitativa por PCR en tiempo real de las expresiones de microARN en riñón de ratón con obstrucción ureteral unilateral. J. Vis. Exp. (2020)

Este video muestra el procedimiento para generar un modelo de ratón de obstrucción ureteral unilateral. El procedimiento consiste en cortar uno de los uréteres del ratón para obstruir el flujo de orina.

Protocolo

Todos los procedimientos que involucran modelos animales han sido revisados por el comité institucional local de cuidado de animales y la junta de revisión veterinaria de JoVE.

1. La Cirugía UUO

1. Prepare los siguientes artículos: isoflurano, hoja de corcho, crema depilatoria, toallitas de laboratorio, placa de Petri con PBS, seda 4-0, nailon 4-0, una jeringa de 2,5 ml, hisopos de algodón, pinzas, tijeras quirúrgicas y ratones machos C57BL/6 de 8 semanas de edad.
2. Anestesiar un ratón con isoflurano al 1,5% y mantenerlo al 1,5%. A continuación, aplica la crema depilatoria en el abdomen del ratón. Después de unos minutos, limpie la crema depilatoria con una toallita de laboratorio empapada en PBS.
3. Inyecte etanol al 70% en el abdomen del ratón y colóquelo en posición supina sobre la lámina de corcho.
4. Con unas tijeras quirúrgicas y pinzas, haga una incisión en la piel del abdomen y corte el músculo y la membrana peritoneal desde la vejiga hasta el borde inferior izquierdo de las costillas.
5. Coloque la jeringa de 2,5 ml debajo del ratón. Tome dos bastoncillos de algodón y humedézcalos con PBS. Tire de los intestinos con cuidado hacia un lado con las pinzas y coloque los hisopos humedecidos de manera adecuada para identificar el uréter izquierdo. Con las pinzas, levante el riñón izquierdo.
6. Utilice la seda 4-0 para ligar el uréter izquierdo en dos lugares separados aproximadamente 1 cm. Corte el uréter en el punto central de las dos ligaduras y luego use suturas de nailon 4-0 para cerrar la membrana peritoneal y la incisión.