Tinción de ácido peryódico Schiff o PAS: un método para evaluar las deformidades estructurales del glomérulo

Resumen

Fuente: Stevens, M., Oltean, S. Evaluación de la función renal en modelos de ratón de enfermedad glomerular.J. Vis. Exp. (2018)

En este video, describimos el protocolo para realizar la tinción de Schiff de ácido peryódico (PAS) para evaluar las anomalías estructurales en el glomérulo renal. El método de tinción PAS permite una evaluación adecuada de la fisiopatología del glomérulo.

Protocolo

1. Tinción de Schiff de ácido peryódico (PAS)

NOTA: La tinción PAS resaltará las membranas basales de los asas capilares glomerulares y el epitelio tubular. Permite una visualización detallada de las células glomerulares, la matriz mesangial y la posible expansión, y los posibles cambios de la GBM (es decir, engrosamiento e irregularidades).

1. Seccione la corteza renal fijada en PFA incrustada en parafina utilizando un micrótomo de 5 μm de espesor en portaobjetos recubiertos de poli-L-lisina. Secar a 37 °C durante 1 h. Asegúrese de que la sección no contenga pliegues o agujeros que puedan distors....

Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo

Nombre	Empresa	Número de catálogo	Comentarios
Sistema de tinción de ácido peryódico-Schiff (PAS)	Sigma-Aldrich	395B-1KT
hematoxilina	Sigma-Aldrich	H3136
xileno	MerckMillipore	108298
Portaobjetos de preparación de polietileno	Sigma-Aldrich	P0425-72EA
Medio de montaje	ThermoFisher Scientific	8030
Bolígrafo hidrofóbico	Abcam	AB2601
Miscroscopio de luz fluorescente	Microsistemas Leica
Software de análisis de imágenes J	Imagen J