Microinyección intravenosa de nefrotoxinas en embrión de pez cebra: una técnica para administrar agentes nefrotóxicos en el torrente sanguíneo de un embrión de pez cebra

Resumen

Fuente: McKee, Robert A. et al. Microinyección de nefrotoxina en pez cebra para modelar la lesión renal aguda. J. Vis. Exp.(2016)

Este video muestra la microinyección intravenosa de nefrotoxinas en la vena de la cola de un embrión de pez cebra para estudiar sus efectos químicos sobre la función renal.

Protocolo

Todos los procedimientos que involucran modelos animales han sido revisados por el comité institucional local de cuidado de animales y la junta de revisión veterinaria de JoVE.

1. Preparación de soluciones

1. Prepare una solución madre 50x de medios de embriones E3 mezclando 73,0 g de NaCl, 3,15 g de KCl, 9,15 g de CaCl2 y 9,95 g de MgSO₄ en 5 L de agua destilada, y almacene en RT.
2. Prepare una solución madre 50x de medios de embriones E3 mezclando 73,0 g de NaCl, 3,15 g de KCl, 9,15 g de CaCl2 y 9,95 g de MgSO₄ en 5 L de agua destilada, y almacene en RT.
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Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo

Nombre	Empresa	Número de catálogo	Comentarios
cloruro de sodio	Bioanalítica Americana	AB01915
Cloruro de potasio	Bioanalítica Americana	AB01652
Sulfato de magnesio	Sigma-Aldrich	M7506
Cloruro de calcio	Bioanalítica Americana	AB00366
N-feniltiourea (PTU)	Química de Aldrich	P7629
3-aminobenzoato de etilo (tricaína)	Analítica de Fluka	A5040
Vidrio de borosilicato	Sutter Instruments Co.	BF100-50-10
Extractor de micropipetas aplanadas/marrones	Sutter Instruments Co.	Lu. P097
Agarosa ultrapura	Invitrogen	15510-027
Placas de Petri Diponibles Falcon, Estériles, Corning:
60 mm x 15 mm	VWR	25373-085
100 mm x 15 mm	VWR	25373-100
Bandeja de microinyección 150 mm x 15 mm	VWR	25373-187
Incubadora de baja temperatura	Fischer Científico	11 690 516DQ
Pinza de micro disección	Roboz Instrumentos Quirúrgicos Co.	RS-5010
micrómetro	Ted Pella, Inc.	2280-24